[發(fā)明專利]一種高寒草地牧草內(nèi)生細(xì)菌深褐芽孢桿菌菌株、微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410397803.5
• 申請日: 2014-08-13
• 公開（公告）號: CN104195074B
• 公開（公告）日: 2016-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊成德;陳秀蓉;薛莉;暢濤
• 申請（專利權(quán)）人: 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C05F11/08;C12R1/07
• 代理公司: 北京中恒高博知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11249
• 代理人: 張秋云

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，具體涉及一種內(nèi)生細(xì)菌深褐芽孢桿菌菌株、微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著社會發(fā)展，人們對食品的要求越來越高，基于化學(xué)農(nóng)藥對環(huán)境的污染和農(nóng)藥殘留等問題，植物病害的生物防治成為了研究熱點(diǎn)，其中尤以植物內(nèi)生細(xì)菌作為拮抗菌的研究得到眾多學(xué)者的觀注。植物內(nèi)生細(xì)菌是指生活在植物體內(nèi)，但對植物沒有任何實(shí)質(zhì)性傷害的細(xì)菌，其具有固氮、溶磷和產(chǎn)IAA等生物學(xué)功能，特別是抑菌功能是其成為生防菌資源的有力支撐。植物內(nèi)生菌的固氮、溶磷和產(chǎn)IAA等生物學(xué)功能對宿主有促進(jìn)生長的作用；植物內(nèi)生細(xì)菌也可以通過分泌抑菌物質(zhì)、與病原菌競爭營養(yǎng)空間及誘導(dǎo)植物獲得抗病性阻止或降低病原菌對植物的侵染或造成的危害。以內(nèi)生細(xì)菌為菌種資源研制的微生物農(nóng)藥不易產(chǎn)生抗藥性，不傷害天敵，且能利用農(nóng)副產(chǎn)品等廣泛生產(chǎn)，更重要的是內(nèi)生細(xì)菌可以定殖于作物體內(nèi)，甚至可以通過種子(苗木)傳播于下一代，長期起作用，省時(shí)省力，高效，應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)后為生產(chǎn)綠色或無公害農(nóng)產(chǎn)品提供了一個(gè)新的途徑。

微生物肥料作為一種新型肥料，施入土壤后，通過其特定菌株的快速繁殖，能固定大氣中的氮素、釋放土壤中固定態(tài)的磷、鉀元素，使得環(huán)境的養(yǎng)分潛力得以充分發(fā)揮，并為作物生長營造一個(gè)良好的土壤微生物環(huán)境，在減少化肥用量、降低環(huán)境污染、提高農(nóng)作物品質(zhì)等方面具有重要意義。尤其是集抑菌、固氮、解磷、解鉀和作物生長素于一身的復(fù)合微生物肥料的研發(fā)，在農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展中有舉足輕重的作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是針對上述現(xiàn)有技術(shù)中化學(xué)農(nóng)藥和化學(xué)肥料環(huán)保性差、易產(chǎn)生抗藥性和安全性差的缺陷，提供了一種內(nèi)生細(xì)菌深褐芽孢桿菌菌株。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種高寒草地牧草內(nèi)生細(xì)菌深褐芽孢桿菌菌株，命名為深褐芽孢桿菌(Bacillus?atrophaeus)菌株QLY001，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏時(shí)間為2014年03月10日，保藏編號為CGMCC?No.8904。

進(jìn)一步的，上述的一種高寒草地牧草內(nèi)生細(xì)菌深褐芽孢桿菌菌株，所述深褐芽孢桿菌(Bacillus?atrophaeus)菌株QLY001在不含色氨酸的King氏培養(yǎng)基中分泌IAA的濃度為2.6mg/L，在含100mg/L色氨酸的King氏培養(yǎng)基中分泌IAA的濃度為3.42mg/L。

本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供了上述一種內(nèi)生細(xì)菌深褐芽孢桿菌菌株在抑制病原菌中的應(yīng)用。

進(jìn)一步的，上述的應(yīng)用，所述病原菌包括有馬鈴薯褐腐病菌(Stysanus?stemonitis)、馬鈴薯壞疽病菌(Phoma?foveata)、小麥根腐病菌(Bipolaris?sorokiniana)、番茄早疫病原菌(Alternaria?solani)、馬鈴薯炭疽病菌(Colletotrichum?coccodes)、馬鈴薯枯萎病菌(Fusarium?avenaceum)、孜然根腐病菌(Fusarium?solani)和馬鈴薯干腐病菌(Fusarium?oxysporum)。

本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供了一種微生物菌劑，其活性成分為上述深褐芽孢桿菌(Bacillus?atrophaeus)菌株QLY001的菌體。

進(jìn)一步的，上述的一種微生物菌劑，所述微生物菌劑中，含有按重量百分比計(jì)的深褐芽孢桿菌(Bacillus?atrophaeus)菌株QLY0016-12％，培養(yǎng)基余量。

進(jìn)一步的，上述的一種微生物菌劑，所述培養(yǎng)基由以下物質(zhì)組成：氯化銨8-16g，玉米粉13-21g，牛肉膏4-6g，蒸餾水或無離子水1000mL，所述培養(yǎng)基的pH值為6.6-7.4。

進(jìn)一步的，上述的一種微生物菌劑，所述微生物菌劑中，深褐芽孢桿菌(Bacillus?atrophaeus)菌株QLY001的活菌數(shù)為1.82×10¹⁰CFU/mL-3.5×10¹⁰CFU/mL。

本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供了上述一種微生物菌劑的制備方法，是將深褐芽孢桿菌(Bacillus?atrophaeus)菌株QLY001接入至培養(yǎng)基中發(fā)酵，接入量為6-12％，發(fā)酵時(shí)間為33-39h，發(fā)酵溫度為24-32℃，發(fā)酵轉(zhuǎn)速為140-180r/min，發(fā)酵溶氧量為55％-75％。

本發(fā)明的第五個(gè)目的是提供了上述一種微生物菌劑在制備農(nóng)藥或肥料中的應(yīng)用。