[發明專利]一種不含苯的組織脫蠟透明劑

在審

• 申請號: 201410394768.1
• 申請日: 2014-08-12
• 公開（公告）號: CN104155160A
• 公開（公告）日: 2014-11-19
• 發明（設計）人: 陸可望;張磊
• 申請（專利權）人: 陸可望;張磊
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/30
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

技術領域

本發明涉及一種用于生物組織學，組織病理學，法醫學的不含苯的組織脫蠟透明劑,?是一種體外診斷試劑，具體涉及既可以使組織透明、又可以使組織脫蠟的制劑。屬體外診斷試劑技術領域。?

背景技術

臨床實驗室在臨床醫學中發揮著越來越重要的作用，臨床實驗室提供的診斷信息涉及診斷、治療、健康狀況評估、公共衛生突發事件、科學研究各方面。占患者全部診斷、療效等醫療信息的60%以上。?

組織病理學的誕生已有150多年的歷史。組織石蠟切片是在觀察組織形態和免疫組化等定性分析中最常用的一種切片技術，廣泛應用于臨床病理診斷和實驗研究。組織經固定、脫水后，必須經過一種既能與乙醇相混合，又能溶解石蠟的溶劑，通過其媒介作用，使石蠟浸入組織塊。在此過程中組織中的水分被溶劑取代，其折射指數接近組織蛋白的折射指數，組織塊變得透明。組織經石蠟包埋后制成蠟塊，用切片機制成切片后，需要將切片中的蠟脫去，才能進行染色。在透明和脫蠟這兩個程序中，使用最多的脫蠟透明劑仍在沿用100多年前使用的二甲苯、苯、甲苯。?

苯、甲苯、二甲苯屬于有毒有害化學品，會損傷肝、腎、骨髓和中樞神經系統。具有潛在的致癌性。長期接觸二甲苯對人體機能會產生嚴重的影響，且二甲苯的排放也會對環境造成嚴重污染。實驗和臨床研究都表明吸入二甲苯蒸汽會導致頭痛、頭暈、惡心和嘔吐。醫院病理科大量使用二甲苯，會對醫生和實驗室人員的身體造成傷害。?

???????二甲苯的的替代品用于人體組織標本石蠟切片脫蠟和透明多年來一直是研究的對象。?

???????使用松節油作為透明劑是P.Mayer1910年提出的，由于其揮發慢，使透明后封片的時間延長。松節油還會導致銀染色的褪色。含松節油的透明劑在國外已上市多年，如Baxter公司的AmeriClear。中國發明專利（ZL91108571.8；CN200910050030.2?和CN201110023746.0）配方中皆使用松節油作為組織染色后透明。這些透明劑只有透明作用，無脫蠟作用。?

???????檸檬烯用于脫蠟始于1981年，但檸檬烯是油性的；對某些個體可能會引起極為嚴重的過敏反應。美國專利（USP7,070,951)，?就是采用醇類與檸檬烯的混合物，輔以表面活性劑脫蠟。醇類本身脫蠟效果很差，會造成組織過度脫水，使標本發收縮、硬化、脆裂。?

亦有用短鏈烷烴或支鏈烷烴做脫蠟劑，?如中國專利ZL00122030.6，用的是航空煤油和石油醚（航空煤油和石油醚都是短鏈烷烴的混合物）。短鏈烷烴的缺點是氣味強烈，沸點低，在環境中迅速彌散，使用者難于接受。航空煤油含有不會揮發的多種添加劑，如四乙基鉛，堿性酚，二壬基萘磺酸等，這些添加劑對組織的影響尚待認識。?

目前Merck?公司在國際市場上銷售一種用于組織透明的二甲苯替代品，商品名為NEO-CLEAR(R)?XYLENE?SUBSTITUTE。其成分是一種工業用油漆稀釋劑（bromohexanol?acetate），氣味強烈，有致癌性。對人體和環境均可能造成危害。因此不是理想的二甲苯替代品。?

為使組織達到最佳的透明效果，透明劑的折射指數應盡可能與組織蛋白的折射指數接近。動物組織的折射指數為1.418，而二甲苯的折射指數為1.49，苯、甲苯的折射指數為1.50，并不能達到最佳的透明效果。目前未見既可以使組織透明、又可以脫蠟，完全取代苯類制劑達到最佳效果的產品。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種不含苯，甲苯，二甲苯的生物組織（包括人體組織、動物、植物、昆蟲、微生物及其它標本）的脫蠟、透明劑?？梢杂糜谑炃衅撓?，也可用于組織固定后透明，和染色后封片前透明。?

實現本發明不含苯的組織脫蠟透明劑采用的具體技術方案：脫蠟透明劑主要含有95%－100%脂環烴，余量為輔料，所述的脂環烴為單環脂環烴或二環脂環烴。?

所述輔料為表面活性劑、植物精油及抗氧化劑中的一種或多種；其中表面活性劑濃度為0.0%－0.1%、植物精油濃度為0.0%－5.0%，抗氧化劑濃度為0.01%－0.05％。?

脫蠟透明劑中可以加入抗氧化劑，讓染色的組織透明后長期保持顏色。?

所述脂環烴中的單環脂環烴或二環脂環烴為環戊烷、環已烷、環庚烷、環辛烷、甲基環己烷，二甲基環己烷，二環己烷中的一種或者多種。?

所述的單環脂環烴為環己烷，甲基環己烷；所述的二環脂環烴為二環己烷。?

所述表面活性劑為陽離子表面活性劑、陰離子表面活性劑、非離子表面活性劑或者雙性離子表面活性劑中的一種或者多種。?