[發明專利]一種分離測定卡格列凈及其有關物質的方法

有效

• 申請號: 201410394363.8
• 申請日: 2014-08-12
• 公開（公告）號: CN105319294B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 陳皓;劉澤榮;張道林;唐遠富;付曉泰
• 申請（專利權）人: 重慶醫藥工業研究院有限責任公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種分離測定卡格列凈及其有關物質的方法，該方法采用高效液相色譜法，以丁烷基硅烷鍵合硅膠填料為色譜柱，以磷酸溶液與乙腈組成流動相，進行梯度洗脫。該方法可以將卡格列凈及其有關物質很好分離，檢測的重現性好、靈敏度高、專屬性強、操作簡便，有助于控制卡格列凈的質量和用藥安全。

技術領域

本發明屬于藥物分析方法領域，具體涉及一種采用高效液相色譜法分離測定降糖藥卡格列凈及其有關物質的方法。

背景技術

卡格列凈為一種選擇性鈉-葡萄糖協同轉運蛋白(SGLT)抑制劑，用于治療成人II型糖尿病。卡格列凈通過對鈉-葡萄糖協同轉運蛋白選擇性抑制作用，限制了大部分葡萄糖在體內的重吸收，促使葡糖大量從尿中排出達到控制血糖水平的目的。由于尿糖增多，體內減少了熱卡，因而有明顯減重作用。由于排鈉增加使收縮壓稍降，但血鈉無明顯改變。

卡格列凈的化學結構式如下：

其化學名為：（1S）-1,5-脫水-1-[3-[[5-(4-氟苯基)-2-噻吩基]甲基]-4-甲基苯基]- D-葡萄糖醇。

卡格列凈為全合成化學藥，反應過程中可能產生的副產物或殘留的中間體會影響其純度和質量；在其儲存過程中，也可能會因為溫度、光照等環境因素而產生降解產物，也會影響其純度和質量，這些殘留的中間體、副反應產物、降解產物就是通常藥物質量控制中所說的有關物質。

卡格列凈有兩個結構已知有關物質，分別為雜質A和雜質B，它們的化學結構如下：

目前，有關卡格列凈及其組合物的有關物質測定方法未見報道，為保證卡格列凈原料藥及其藥物組合物的質量可控，以確保其有效性和安全性，亟需一種有效的檢測方法，能夠分離測定卡格列凈及其有關物質。本發明人經過大量的科學試驗和測試條件的篩選，發現一種快速分離測定卡格列凈及其有關物質的方法，該方法可以有效控制了卡格列凈的工藝雜質和降解產物，保證了卡格列凈原料藥及其藥物組合物的質量可控，從而完成了本發明。

本發明人發現，已上市的卡格列凈片劑，其藥用輔料微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂等在本發明的方法中不會干擾測定卡格列凈及其有關物質的測定。

發明內容

本發明的目的在于提供一種分離測定卡格列凈及其有關物質的方法，該方法能將卡格列凈與其有關物質有效分離，準確檢測卡格列凈原料藥和其藥物組合物中有關物質，從而保證卡格列凈的質量控制，從而也確保了卡格列凈藥品的有效性和安全性。

為實現本發明的目的，提供如下實施方案。

在一實施方案中，本發明的一種分離測定卡格列凈及其有關物質的方法，該方法包括采用高效液相色譜法，以丁烷基硅烷鍵合硅膠填料柱為色譜柱，以乙腈為有機相與以磷酸溶液或磷酸緩沖液為水相混合作為流動相，進行梯度洗脫，以紫外檢測器進行檢測。

在上述實施方案中，本發明的方法，所述磷酸溶液或磷酸緩沖液的pH值為2～6，優選為3.5，其中，所述磷酸緩沖液為選自磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀和磷酸二氫銨中的磷酸鹽，用磷酸溶液調節pH值，水相中磷酸鹽濃度為0～0.005mol/L。

在上述實施方案中，本發明的方法，水相與有機相的洗脫初始體積比為70∶30～50∶50，優選70∶30，水相與有機相的洗脫終止體積比為30∶70～15∶85，優選30∶70。

在上述實施方案中，本發明的方法，紫外檢測波長為210nm～215nm或287nm～297nm，優選為210 nm。

在上述實施方案中，本發明的方法，進一步包括以下步驟：

（1）取卡格列凈原料藥或其藥物組合物，加70%乙腈溶液使卡格列凈完全溶解并稀釋定容，配制成每1ml溶液中含卡格列凈0.3～0.7mg，優選0.5mg,濾過，作為供試品溶液；