[發(fā)明專利]一種紫花苜蓿綠肥增效的生物添加劑制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410392731.5
• 申請(qǐng)日: 2014-08-11
• 公開（公告）號(hào): CN104193548A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 安淵;周鵬;劉丹陽;李強(qiáng);蘇連泰;呂愛敏;張菁
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號(hào): C05G3/04
• 分類號(hào): C05G3/04
• 代理公司: 上海漢聲知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31236
• 代理人: 徐紅銀;郭國(guó)中

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域的綠肥增效劑，具體地，涉及一種紫花苜蓿綠肥增效的生物添加劑制備方法。

背景技術(shù)

磷對(duì)農(nóng)作物生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的促進(jìn)作用,是農(nóng)作物生長(zhǎng)發(fā)育的重要營(yíng)養(yǎng)元素之一，但是土壤中的大部分有機(jī)磷和無機(jī)磷不能直接被農(nóng)作物吸收利用，與土壤中的Ca²⁺、Fe³⁺、Al³⁺等離子結(jié)合，形成難溶性磷酸鹽，固定在土壤中，從而導(dǎo)致土壤中的磷元素利用效率下降，影響農(nóng)作物產(chǎn)量。綠肥是改良農(nóng)田，提高農(nóng)田土壤有機(jī)質(zhì)，減少化肥使用，增加作物產(chǎn)量的有效農(nóng)藝措施，在農(nóng)業(yè)面源污染日益嚴(yán)重的今天，利用綠肥部分替代化肥已經(jīng)受到廣泛的重視。紫花苜蓿是近年來我國(guó)南方引進(jìn)的優(yōu)質(zhì)牧草新品種，現(xiàn)已被逐漸開發(fā)成為新型的綠肥植物，鮮草產(chǎn)量高、品質(zhì)好，改良土壤效果顯著。

目前，有關(guān)紫花苜蓿作為綠肥在我國(guó)南方應(yīng)用的報(bào)道非常少，而有關(guān)促進(jìn)紫花苜蓿綠肥增加作物產(chǎn)量的研究尚未見報(bào)道。經(jīng)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，趙魯?shù)?2012)在《草業(yè)學(xué)報(bào)》第29卷7期(1142-1147頁)報(bào)道了紫花苜蓿綠肥具有明顯改良稻田土壤，促進(jìn)水稻生長(zhǎng)和增加產(chǎn)量的作用；李海云等(2013)在《生物學(xué)通報(bào)》第48卷7期(1-5頁)的綜述文章中報(bào)道了土壤溶磷微生物的類型和作用，提出土壤溶磷微生物能夠提高土壤中固化磷的釋放，但針對(duì)如何促進(jìn)綠肥中有機(jī)磷轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷，提高綠肥增產(chǎn)的措施研究尚未涉及。稻田長(zhǎng)期處于水淹狀態(tài)，綠肥分解相對(duì)緩慢，綠肥有機(jī)磷的釋放是制約綠肥增效的關(guān)鍵，目前尚未發(fā)現(xiàn)一種能夠有效促進(jìn)稻田綠肥有機(jī)磷釋放，增加水稻產(chǎn)量的技術(shù)措施。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，本發(fā)明的目的在于提供一種紫花苜蓿綠肥增效的生物添加劑制備方法，通過本發(fā)明方法制備的生物添加劑能夠有效促進(jìn)紫花苜蓿綠肥中有機(jī)磷的分解和土壤有機(jī)磷的釋放，增加水稻對(duì)磷的吸收，從而增加水稻產(chǎn)量。

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明提供一種紫花苜蓿綠肥增效的生物添加劑制備方法，所述生物添加劑由微生物菌劑、紫花苜蓿漿糖液和清水混合、發(fā)酵而成，每升生物添加劑含保存有微生物菌劑的液體培養(yǎng)基10-30ml、紫花苜蓿漿糖液200-400ml，清水為余量，其中：所述的微生物菌劑由巨大芽孢桿菌(Bacillus?megaterium)和蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)組成；

所述的生物添加劑制備方法包括如下步驟：

步驟1)微生物菌劑的制備

將巨大芽孢桿菌和蠟狀芽孢桿菌接種在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)與活化，形成所述的微生物菌劑；

步驟2)紫花苜蓿漿糖液的制備

(1)分別稱取新鮮的全株紫花苜蓿和蔗糖；

(2)將蔗糖溶解在清水中得到蔗糖溶液；

(3)將所述全株紫花苜蓿和所述蔗糖溶液充分混合，搗碎，用清水定容至1升，制成所述的紫花苜蓿漿糖液；

步驟3)生物添加劑的制備

分別取所述微生物菌劑和所述紫花苜蓿漿糖液，將其按比例混合，用清水定容到1L，28-30℃放置24小時(shí)，雙層紗布過濾，并用清水定容到1L，形成所述的紫花苜蓿綠肥增效的生物添加劑。

優(yōu)選地，所述的步驟1)，具體為：

將巨大芽孢桿菌和蠟狀芽孢桿菌接種在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)與活化，溫度28-30℃，125r.min^-1振動(dòng)培養(yǎng)48-72小時(shí)，形成所述的微生物菌劑。

更優(yōu)選地，所述微生物菌劑保存在液體培養(yǎng)基中，每ml所述液體培養(yǎng)基中含有的巨大芽孢桿菌和蠟狀芽孢桿菌合計(jì)不少于10⁸cfu。

所述液體培養(yǎng)基優(yōu)選MRS液體培養(yǎng)基。更優(yōu)選地，所述的MRS液體培養(yǎng)基(g/L)配方為：蛋白胨1g，牛肉膏1g，酵母膏0.5g，K₂HPO₄0.2g，檸檬酸二銨0.2g,乙酸鈉0.5g，葡萄糖2g，土溫800.1％，MgSO₄.7H₂O0.058g，MnSO₄.4H₂O0.025g，瓊脂1.5g，pH＝6.2，121℃滅菌15min。

優(yōu)選地，所述的步驟2)，具體為：

(1)稱取300g新鮮的全株紫花苜蓿為原材料，并切碎，其中所述全株紫花苜蓿包括紫花苜蓿的枝葉和根；

(2)按紫花苜蓿：蔗糖＝100：5的重量比稱取蔗糖或相當(dāng)蔗糖量的糖漿；

(3)按紫花苜蓿(g)和水(ml)＝1：2的比例量取清水；