[發明專利]一種RGD標記的熒光金納米簇的制備方法

在審

• 申請號: 201410389874.0
• 申請日: 2014-08-08
• 公開（公告）號: CN105363043A
• 公開（公告）日: 2016-03-02
• 發明（設計）人: 屈曉超;李奕辰;李蕾;王彥然;梁敬寧;梁繼民
• 申請（專利權）人: 屈曉超
• 主分類號: A61K49/04
• 分類號: A61K49/04;A61K47/48;A61K49/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種RGD標記的熒光金納米簇的制備方法，其特征在于，所 述方法包括如下步驟：

步驟1,金納米簇(AuNCs@BSA)的制備方法：

步驟1.1，量取質量分數為1％的氯金酸溶液1.7mL，加入3.3mL 去離子水，得到5mL，10mM氯金酸溶液，劇烈攪拌；

步驟1.2，稱取250mgBSA，溶解在5mL去離子水中，得到5mL， 50mgmL^-1BSA溶液；

步驟1.3，稱取20mgNaOH，溶解在0.5mL去離子水中，得到 1MNaOH水溶液；

步驟1.4，將BSA溶液加入劇烈攪拌的氯金酸溶液，控溫37℃， 持續攪拌30分鐘；

步驟1.5，將NaOH水溶液(1M，0.5-5mL)加入上述混合液中；

步驟1.6，持續劇烈攪拌上述反應物，控溫37℃，持續時間 12-24h；

步驟1.7，將得到的產物冷卻至室溫，裝進再生纖維透析袋中， 透析外液用水，放置在4℃冰箱中透析12-48h；

步驟1.8，透析后的溶液用10kDa的超濾管離心 (3000×g,20min)，得到4mL熒光金納米簇；

步驟2，RGD-AuNCs@BSA的制備方法：

步驟2.1，取2mL超濾離心后的金納米簇加到8mLPBS緩沖液 (PH＝7.4，20mM)中，加入40-60mgEDC，避光條件室溫下反應 20min；

步驟2.2，加入30-50mg的NHS，在黑暗中劇烈攪拌1h；

步驟2.3，向混合液中倒入c(RGDfk)溶液(1-10mL，4mg·mL^-1)， 室溫下攪拌反應12-24h；

步驟2.4，反應后產物用截留量為10kDa的超濾管離心 (3000×g,20min)，去除過量反應物，得到的產物溶于2mLPBS緩 沖液(PH7.4，10mM)中。

2.根據權利要求1所述的金納米簇(AuNCs@BSA)的制備方 法，其特征在于，步驟1.5中所述NaOH溶液的體積為0.5-5mL。

3.根據權利要求1所述的金納米簇(AuNCs@BSA)制備方法， 其特征在于，步驟1.6所述的攪拌持續時間12-24h。

4.根據權利要求1所述的金納米簇(AuNCs@BSA)的制備方 法，其特征在于，步驟1.7中所述透析時長為12-48h。

5.根據權利要求1所述的RGD-AuNCs@BSA的制備方法，其 特征在于，步驟2.1中所述的活化AuNCs所用的EDC為40-60mg。

6.根據權利要求1所述的RGD-AuNCs@BSA的制備方法，其 特征在于，步驟2.2中所述的活化AuNCs所用的NHS為30-50mg。

7.根據權利要求1所述的RGD-AuNCs@BSA的制備方法，其 特征在于，步驟2.3中所述的c(RGDyK)溶液加入量為1-10mL。

8.根據權利要求1所述的RGD-AuNCs@BSA的制備方法，其 特征在于，步驟2.3中所述的活化后AuNCs和RGD反應時間為 12-24h。

9.根據權利要求1所述的RGD-AuNCs@BSA的制備方法，其特 征在于，步驟2中金納米簇表面的RGD靶向腫瘤血管的α_vβ₃受體， 對腫瘤進行特異性結合。