[發(fā)明專(zhuān)利]AMZ1基因在制備診斷試劑盒中的用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410389636.X
• 申請(qǐng)日: 2014-08-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104131103A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-11-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖文華;屈雪玲;王碩;李小梅;董偉偉;趙慧霞
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 北京中譽(yù)威圣知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11279
• 代理人: 叢芳

1.AMZ1基因在制備結(jié)腸癌診斷試劑盒中的用途，其特征在于，所述診斷試劑盒包含SYBR?Green聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體系、用于擴(kuò)增AMZ1基因和管家基因的引物對(duì)；所述SYBR?Green聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體系包含：PCR緩沖液、dNTPs、SYBR?Green熒光染料。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述擴(kuò)增AMZ1基因的引物對(duì)的序列如下：正向引物序列為5’-AAGAACAACAAGCCAGGGGACG-3’，反向引物序列為5’-CTGGAAGGAACTTGCTGAAGGTGA-3’；所述管家基因是GAPDH，擴(kuò)增GAPDH基因的正向引物序列為5’-TTTAACTCTGGTAAAGTGGATAT-3’，反向引物序列為5’-GGTGGAATCATATTGGAACA-3’。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述PCR緩沖液包含：25mM?KCL、2.5mM?MgCL₂、200mM(NH₄)₂SO₄。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述診斷試劑盒還包含M-MLV逆轉(zhuǎn)錄體系或RNA提取試劑；所述逆轉(zhuǎn)錄體系包含T重復(fù)寡核苷酸Oligo?dT、逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液、M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶抑制劑、dNTPs；所述RNA提取試劑包含Trizol、氯仿、異丙醇、75％乙醇。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于，所述逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液包含：250mM?PH8.3的Tris-HCL、375mM的KCL、15mM的MgCL₂、50mM的DTT。

6.一種結(jié)腸癌的診斷試劑盒，其特征在于，所述診斷試劑盒包含SYBR?Green聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體系、用于擴(kuò)增AMZ1基因和管家基因的引物對(duì)；所述SYBR?Green聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體系包含：PCR緩沖液、dNTPs、SYBR?Green熒光染料。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的診斷試劑盒，其特征在于，所述擴(kuò)增AMZ1基因的引物對(duì)的序列如下：正向引物序列為5’-AAGAACAACAAGCCAGGGGACG-3’，反向引物序列為5’-CTGGAAGGAACTTGCTGAAGGTGA-3’；所述管家基因是GAPDH，擴(kuò)增GAPDH基因的正向引物序列為5’-TTTAACTCTGGTAAAGTGGATAT-3’，反向引物序列為5’-GGTGGAATCATATTGGAACA-3’。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的診斷試劑盒，其特征在于，所述PCR緩沖液包含：25mM?KCL、2.5mM?MgCL₂、200mM(NH₄)₂SO₄。

9.根據(jù)權(quán)利要求6-8中任一項(xiàng)所述的診斷試劑盒，其特征在于，所述診斷試劑盒還包含M-MLV逆轉(zhuǎn)錄體系或RNA提取試劑；所述逆轉(zhuǎn)錄體系包含T重復(fù)寡核苷酸Oligo?dT、逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液、M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶抑制劑、dNTPs；所述RNA提取試劑包含Trizol、氯仿、異丙醇、75％乙醇。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的診斷試劑盒，其特征在于，所述逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液包含：250mM?PH8.3的Tris-HCL、375mM的KCL、15mM的MgCL₂、50mM的DTT。