[發(fā)明專利]一種制備抗病毒藥物連翹脂素的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410387568.3
• 申請(qǐng)日: 2014-08-07
• 公開（公告）號(hào): CN105331653B
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 樊宏宇;富力
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 富力
• 主分類號(hào): C12P17/18
• 分類號(hào): C12P17/18
• 代理公司: 北京元本知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 11308
• 代理人: 喻蓉

本發(fā)明涉及一種制備抗病毒天然產(chǎn)物連翹脂素的方法，包括對(duì)連翹苷進(jìn)行酶水解處理。本發(fā)明方法制備的具有抗病毒功能的連翹脂素的得率相比于從連翹等植物中分離得到的天然存在的連翹脂素的含量提高25倍以上，顯著降低了連翹脂素的生產(chǎn)成本，克服了現(xiàn)有提取分離技術(shù)對(duì)連翹苷破壞性大，污染嚴(yán)重，雜質(zhì)較多等缺點(diǎn)，本發(fā)明的制備方法的轉(zhuǎn)化率高，適用于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及連一種抗病毒化合物連翹脂素的制備新方法。

背景技術(shù)

連翹脂素，為連翹苷的糖配基部分，又稱作連翹苷元，為木犀科連翹屬植物連翹的主要活性成分，其結(jié)構(gòu)如下式所示，現(xiàn)代藥理研究表明，連翹脂素有抗病毒、抗氧化、降低血脂、清除自由基、抑菌、抗腫瘤、抗炎等作用。

連翹脂素結(jié)構(gòu)式

連翹為木犀科(Oleaceae)連翹屬(Forsythia)植物連翹(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)的干燥果實(shí)，主要分布于我國河南、山西、陜西、山東等地，此外，湖北、河北、四川、甘肅亦有分布。常用于治療急性風(fēng)熱感冒、癰腫瘡毒、淋巴結(jié)結(jié)核、尿路感染等癥[1]。連翹的主要成分為連翹苷(phill-yrin)，具有抗病毒、抗菌、抗氧化、清除自由基、抗腫瘤等藥理作用[2-5]，同時(shí)含有少量連翹脂素((+)-phillygeninin)。從天然連翹中提取連翹苷的研究已有大量研究報(bào)道，但由于連翹脂素在連翹中含量較低，因此用提取分離的方法收率較低。

在用人肝癌細(xì)胞(SMMC-7721)進(jìn)行體外活性研究中，連翹苷沒有活性，連翹脂素具有活性；在用小鼠黑色素肉瘤細(xì)胞B16對(duì)連翹脂素和連翹苷抗癌活性研究中，連翹苷沒有效果，而連翹脂素對(duì)小鼠黑色素肉瘤細(xì)胞B16有較強(qiáng)的抑制活性，甚至強(qiáng)于陽性對(duì)照的長(zhǎng)春新堿。可見，連翹苷和連翹脂素在抗病毒、抗腫瘤等方面的藥理作用，具有明顯差異。研究表明，連翹苷在體內(nèi)迅速代謝成連翹脂素后發(fā)揮藥理作用。因此，連翹脂素有可能是連翹苷的前體物質(zhì)。所以研究如何將連翹苷轉(zhuǎn)化為連翹脂素，對(duì)連翹資源深度開發(fā)具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對(duì)連翹脂素提取分離的現(xiàn)有技術(shù)中存在的連翹脂素得率低，生產(chǎn)成本包等技術(shù)問題，提供一種連翹脂素的制備方法，本發(fā)明方法克服現(xiàn)有技術(shù)不足，利用商品化酶對(duì)連翹苷進(jìn)行酶解反應(yīng)制備具有抗病毒功能的天然產(chǎn)物連翹脂素，本發(fā)明方法操作工藝過程簡(jiǎn)單，生產(chǎn)周期短。制備得到的連翹脂素含量高，產(chǎn)率高，顯著降低了連翹脂素的生產(chǎn)成本，適宜批量制備和工業(yè)化生產(chǎn)。

為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明一方面提供一種制備連翹脂素的方法，包括對(duì)連翹苷進(jìn)行酶水解處理。

其中，所述酶水解處理過程中的酶選擇纖維素酶、蝸牛酶、β-葡萄糖苷酶、苦杏仁酶或果膠酶，優(yōu)選為纖維素酶、蝸牛酶、β-葡萄糖苷酶。

特別是，所述酶與連翹苷的質(zhì)量比為1-10∶1，優(yōu)選為1-5∶1。

其中，所述酶水解處理是將連翹苷和酶與緩沖溶液混合均勻后，于37～50℃溫度下，反應(yīng)12～48小時(shí)。

特別是，所述酶水解處理的溫度優(yōu)選為40-50℃；反應(yīng)時(shí)間優(yōu)選為24-36h。

其中，所述緩沖液選擇醋酸鹽緩沖溶液；緩沖液的pH值為5-6.5，優(yōu)選為5.2-6.0。

特別是，所述醋酸鹽緩沖溶液為醋酸-醋酸鈉緩沖溶液。

特別是，所述醋酸鹽緩沖溶液的pH值為5-6.5，優(yōu)選為5.2-6.0。

尤其是，所述醋酸鹽緩沖溶液的用量為每1g連翹苷溶于20-30ml的醋酸鹽緩沖溶液，優(yōu)選為25ml所述醋酸鹽緩沖溶液。

特別是，還包括終止酶水解處理步驟，向酶水解處理后的混合物中醇-水溶液。

其中，所述醇-水溶液選擇甲醇水溶液或乙醇水溶液。