[發(fā)明專利]一種原料藥連翹苷的質(zhì)量檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410386728.2
• 申請(qǐng)日: 2014-08-07
• 公開（公告）號(hào): CN105372377B
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魯明明;王碩;付強(qiáng);王凱乾;惠敏;富力;曲洪穎;劉正賢;蓋鑫
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 富力
• 主分類號(hào): G01N30/90
• 分類號(hào): G01N30/90
• 代理公司: 北京元本知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所11308
• 代理人: 喻蓉

1.一種原料藥連翹苷的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征是，包括如下步驟：

1)鑒別連翹苷：

1A)將精密稱定的連翹苷標(biāo)準(zhǔn)品溶于無水甲醇中，配制成連翹苷對(duì)照品溶液；

1B)將精密稱定的原料藥連翹苷溶于無水甲醇中，配制成連翹苷供試品溶液；

1C)吸取連翹苷對(duì)照品溶液、連翹苷供試品溶液、無水甲醇，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇混合溶液為展開劑，展開后，晾干，再噴以顯色劑，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，其中所述三氯甲烷-甲醇混合溶液中三氯甲烷與甲醇的體積之比為8.5:1.5；所述顯色劑為質(zhì)量百分比濃度為10％硫酸乙醇溶液；

2)測(cè)定連翹苷的含量：

2A)將精密稱定的連翹苷標(biāo)準(zhǔn)品溶于質(zhì)量百分比濃度為25％的乙腈水溶液，超聲溶解，配制成連翹苷對(duì)照品母液，然后用質(zhì)量百分比濃度為25％的乙腈水溶液稀釋成每1ml含連翹苷0.1-0.5mg的連翹苷對(duì)照品溶液；

2B)將精密稱定的原料藥連翹苷溶于質(zhì)量百分比濃度為25％的乙腈水溶液中，超聲溶解，配制成原料藥連翹苷供試品母液，然后用質(zhì)量百分比濃度為25％的乙腈水溶液稀釋成每1ml含原料藥連翹苷0.1-0.5mg的原料藥連翹苷供試品溶液；

2C)分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10-50μl，注入液相色譜儀，測(cè)定連翹苷峰面積，按照外標(biāo)法計(jì)算，其中，液相色譜測(cè)定的色譜條件如下：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，規(guī)格為4.6mm×250mm，ODS2，5μm；流動(dòng)相為乙腈/A-水/B；梯度洗脫方式為0min/25％A→12min/25％A→15min/65％A→20min/65％A→25min/25％A→30min/25％A；流速為1.0mL/min；柱溫30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為277nm；理論板數(shù)按連翹苷峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；

3)相關(guān)物質(zhì)檢測(cè)：

使用連翹質(zhì)素對(duì)照品溶液并使用液相色譜方法進(jìn)行檢測(cè)：液相色譜條件包括：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，規(guī)格為4.6mm×250mm，5μm；流動(dòng)相為乙腈/A-水/B；梯度洗脫方式為0min/12％A→5min/15％A→15min/20％A→30min/20％A→60min/25％A→70min/38％A→85min/38％A→90min/12％A→105min/12％A；流速為1.0mL/min；柱溫30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為277nm。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述相關(guān)物質(zhì)檢測(cè)包括如下順序進(jìn)行的步驟：

3A)將精密稱定原料藥連翹苷與質(zhì)量百分比濃度為25％乙腈水溶液混合后，超聲溶解，搖勻，制成每1ml含原料藥連翹苷1-5mg的原料藥連翹苷供試品儲(chǔ)備液；接著精密量取供試品儲(chǔ)備液適量，用質(zhì)量百分比濃度為25％乙腈水溶液定量稀釋，配制成每1ml中含原料藥連翹苷20-100μg的原料藥連翹苷溶液；

3B)將精密稱定的連翹脂素標(biāo)準(zhǔn)品加入到質(zhì)量百分比濃度為25％的乙腈水溶液中，超聲溶解，配制成每1ml含連翹脂素標(biāo)準(zhǔn)品50-250μg的連翹脂素對(duì)照品溶液；

3C)精密量取連翹脂素對(duì)照品溶液10μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分連翹苷的色譜峰的峰高為滿量程的10-30％，再精密量取連翹苷供試品儲(chǔ)備液與連翹苷溶液各10μl，分別注入液相色譜儀。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述原料藥連翹苷按照如下步驟制備而成：

A)采用溶劑對(duì)連翹葉或連翹果實(shí)進(jìn)行加熱回流提取2～3次，每次2～4小時(shí)；

B)提取液濃縮后靜置，析出沉淀，獲得連翹苷沉淀；

C)將連翹苷沉淀采用溶劑溶解后，靜置，析出結(jié)晶，獲得連翹苷粗品；

D)用溶劑對(duì)連翹苷粗品進(jìn)行重結(jié)晶處理，即得原料藥翹苷。