[發明專利]人附睪蛋白4在制備系統性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應用

有效

• 申請號: 201410383959.8
• 申請日: 2014-08-06
• 公開（公告）號: CN104166003A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 梁艷;楊再興;仲人前;樊笑霞;王皓;葉偉民
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: G01N33/96
• 分類號: G01N33/96;G01N33/535
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 趙青

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種人附睪蛋白4(HE4)的新的用途，具體地說，涉及HE4蛋白在制備系統性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應用。

背景技術

系統性紅斑狼瘡(systemic?lupus?erythematosus，簡稱SLE)是一種常見的系統性自身免疫性疾病，可累及全身多個臟器。腎臟是SLE最常累及的內臟器官，而且預后常比較嚴重。多數SLE患者會發生慢性腎臟疾病(chronic?kidney?disease，簡稱CKD)，如不及時診斷并進行有針對性的治療，最終會發展為腎衰竭而威脅生命。目前估算腎小球濾過率(eGFR)是CKD早期診斷和嚴重程度判斷的最好指標，但該指標涉及專業計算公式，比較麻煩。

SLE患者的CKD大多由狼瘡性腎炎(lupus?nephritis，簡稱LN)發展而來，能夠早期診斷并及時治療LN，對于預防CKD的發生具有極為重要的意義。但目前，LN的診斷主要依賴于腎組織學檢測，這種損傷性檢查患者不愿接受。

綜上所述，本領域迫切需要尋找能對SLE患者的LN和CKD進行早期診斷的操作簡單便捷的無創性指標。這方面研究對于在SLE患者中早發現、早治療LN和CKD，從而預防慢性腎衰，減少患者死亡具有重要意義。

人附睪蛋白4(HE4)屬于乳清酸性4-二硫化中心(WFDC)蛋白家族，是一種分泌型的糖蛋白，由一個約25kD的天然N端糖基化蛋白和一個10-12kD的核心蛋白構成，GENBANK號為NP_006094。HE4首先發現于附睪遠端上皮，與精子成熟有關。后來研究報道，HE4可以表達于呼吸道、生殖道、卵巢癌等多種組織細胞中。除了在細胞水平有表達外，大量研究還發現，卵巢癌患者血清HE4的水平亦明顯增高，而且對卵巢癌具有重要的診斷價值。目前，該分子已經作為卵巢癌的標志物廣泛應用于臨床檢測(參見文獻：Drapkin?R,von?Horsten?HH,Lin?Y,Mok?SC,Crum?CP,Welch?WR,Hecht?JL.Human?epididymis?protein?4(HE4)is?a?secreted?glycoprotein?that?is?overexpressed?by?serous?and?endometrioid?ovarian?carcinomas.Cancer?Res?2005；65:2162-2169.Hellstrom?I,Raycraft?J,et?al.The?HE4(WFDC2)protein?is?a?biomarker?for?ovarian?cancer.Cancer?Res?2003；63:3695-3700.)

迄今為止，國內外尚無文獻報道HE4蛋白在SLE患者血清中的表達水平以及HE4蛋白對SLE患者并發LN和CKD有無診斷價值。

發明內容

本發明的目的在于提供人附睪蛋白4的新的用途，特別是人附睪蛋白4在制備系統性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應用。

本發明人經過廣泛而深入的研究，首次發現，采用酶聯免疫吸附試驗檢測SLE患者血清中的HE4蛋白的表達量，能夠比較準確地對LN和CKD進行診斷評估。基于HE4蛋白在血清中的表達量與LN及CKD的這種相關性，以該蛋白作為生物標志物對其表達量進行檢測可以用于指導SLE患者中LN和CKD的早期診斷。即HE4蛋白可用于制備SLE患者LN和CKD診斷試劑或試劑盒。

本發明提供了人附睪蛋白4在制備系統性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應用。

所述的系統性紅斑狼瘡性腎病是指狼瘡性腎炎(LN)和/或系統性紅斑狼瘡患者慢性腎臟疾病(CKD)。

本發明還提供了HE4蛋白用于制備SLE患者LN和CKD診斷標志物。

優選的，HE4蛋白在制備系統性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應用，該應用是指建立HE4蛋白定量檢測的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑或試劑盒。

所述的應用，是指將HE4蛋白作為生物標志物，利用其ELISA檢測試劑盒，分析HE4蛋白在SLE并發LN和CKD患者血清中的表達量。

利用特異性抗HE4蛋白的抗體，用于制備SLE患者LN和CKD診斷的ELISA制劑或試劑盒，這對于本領域技術人員來說是顯而易見的。

所述的抗體可以是單克隆抗體或多克隆抗體。

所述的應用，配套的試劑包括HE4標準品、質控品、鏈霉親和素包被的微孔板、生物素標記的HE4抗體、辣根過氧化物酶標記的HE4抗體、稀釋緩沖液、底物液、終止液和清洗緩沖液。