[發(fā)明專利]人附睪蛋白4在制備系統(tǒng)性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410383959.8
• 申請(qǐng)日: 2014-08-06
• 公開（公告）號(hào): CN104166003A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁艷;楊再興;仲人前;樊笑霞;王皓;葉偉民
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/96
• 分類號(hào): G01N33/96;G01N33/535
• 代理公司: 上海元一成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31268
• 代理人: 趙青

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種人附睪蛋白4(HE4)的新的用途，具體地說，涉及HE4蛋白在制備系統(tǒng)性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic?lupus?erythematosus，簡(jiǎn)稱SLE)是一種常見的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，可累及全身多個(gè)臟器。腎臟是SLE最常累及的內(nèi)臟器官，而且預(yù)后常比較嚴(yán)重。多數(shù)SLE患者會(huì)發(fā)生慢性腎臟疾病(chronic?kidney?disease，簡(jiǎn)稱CKD)，如不及時(shí)診斷并進(jìn)行有針對(duì)性的治療，最終會(huì)發(fā)展為腎衰竭而威脅生命。目前估算腎小球?yàn)V過率(eGFR)是CKD早期診斷和嚴(yán)重程度判斷的最好指標(biāo)，但該指標(biāo)涉及專業(yè)計(jì)算公式，比較麻煩。

SLE患者的CKD大多由狼瘡性腎炎(lupus?nephritis，簡(jiǎn)稱LN)發(fā)展而來，能夠早期診斷并及時(shí)治療LN，對(duì)于預(yù)防CKD的發(fā)生具有極為重要的意義。但目前，LN的診斷主要依賴于腎組織學(xué)檢測(cè)，這種損傷性檢查患者不愿接受。

綜上所述，本領(lǐng)域迫切需要尋找能對(duì)SLE患者的LN和CKD進(jìn)行早期診斷的操作簡(jiǎn)單便捷的無創(chuàng)性指標(biāo)。這方面研究對(duì)于在SLE患者中早發(fā)現(xiàn)、早治療LN和CKD，從而預(yù)防慢性腎衰，減少患者死亡具有重要意義。

人附睪蛋白4(HE4)屬于乳清酸性4-二硫化中心(WFDC)蛋白家族，是一種分泌型的糖蛋白，由一個(gè)約25kD的天然N端糖基化蛋白和一個(gè)10-12kD的核心蛋白構(gòu)成，GENBANK號(hào)為NP_006094。HE4首先發(fā)現(xiàn)于附睪遠(yuǎn)端上皮，與精子成熟有關(guān)。后來研究報(bào)道，HE4可以表達(dá)于呼吸道、生殖道、卵巢癌等多種組織細(xì)胞中。除了在細(xì)胞水平有表達(dá)外，大量研究還發(fā)現(xiàn)，卵巢癌患者血清HE4的水平亦明顯增高，而且對(duì)卵巢癌具有重要的診斷價(jià)值。目前，該分子已經(jīng)作為卵巢癌的標(biāo)志物廣泛應(yīng)用于臨床檢測(cè)(參見文獻(xiàn)：Drapkin?R,von?Horsten?HH,Lin?Y,Mok?SC,Crum?CP,Welch?WR,Hecht?JL.Human?epididymis?protein?4(HE4)is?a?secreted?glycoprotein?that?is?overexpressed?by?serous?and?endometrioid?ovarian?carcinomas.Cancer?Res?2005；65:2162-2169.Hellstrom?I,Raycraft?J,et?al.The?HE4(WFDC2)protein?is?a?biomarker?for?ovarian?cancer.Cancer?Res?2003；63:3695-3700.)

迄今為止，國內(nèi)外尚無文獻(xiàn)報(bào)道HE4蛋白在SLE患者血清中的表達(dá)水平以及HE4蛋白對(duì)SLE患者并發(fā)LN和CKD有無診斷價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供人附睪蛋白4的新的用途，特別是人附睪蛋白4在制備系統(tǒng)性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應(yīng)用。

本發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究，首次發(fā)現(xiàn)，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)SLE患者血清中的HE4蛋白的表達(dá)量，能夠比較準(zhǔn)確地對(duì)LN和CKD進(jìn)行診斷評(píng)估。基于HE4蛋白在血清中的表達(dá)量與LN及CKD的這種相關(guān)性，以該蛋白作為生物標(biāo)志物對(duì)其表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)可以用于指導(dǎo)SLE患者中LN和CKD的早期診斷。即HE4蛋白可用于制備SLE患者LN和CKD診斷試劑或試劑盒。

本發(fā)明提供了人附睪蛋白4在制備系統(tǒng)性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應(yīng)用。

所述的系統(tǒng)性紅斑狼瘡性腎病是指狼瘡性腎炎(LN)和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者慢性腎臟疾病(CKD)。

本發(fā)明還提供了HE4蛋白用于制備SLE患者LN和CKD診斷標(biāo)志物。

優(yōu)選的，HE4蛋白在制備系統(tǒng)性紅斑狼瘡性腎病診斷試劑或試劑盒中的應(yīng)用，該應(yīng)用是指建立HE4蛋白定量檢測(cè)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑或試劑盒。

所述的應(yīng)用，是指將HE4蛋白作為生物標(biāo)志物，利用其ELISA檢測(cè)試劑盒，分析HE4蛋白在SLE并發(fā)LN和CKD患者血清中的表達(dá)量。

利用特異性抗HE4蛋白的抗體，用于制備SLE患者LN和CKD診斷的ELISA制劑或試劑盒，這對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。

所述的抗體可以是單克隆抗體或多克隆抗體。

所述的應(yīng)用，配套的試劑包括HE4標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、鏈霉親和素包被的微孔板、生物素標(biāo)記的HE4抗體、辣根過氧化物酶標(biāo)記的HE4抗體、稀釋緩沖液、底物液、終止液和清洗緩沖液。