[發明專利]以牛糞浸出液為主要原料的旋鏈角毛藻培養基及其應用

在審

• 申請號: 201410382184.2
• 申請日: 2014-08-06
• 公開（公告）號: CN104099250A
• 公開（公告）日: 2014-10-15
• 發明（設計）人: 王培磊
• 申請（專利權）人: 臨沂大學
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種以牛糞浸出液為主要原料的旋鏈角毛藻培養基，其特征在于配方如下：?

牛糞浸出液150毫升，硝酸銨4毫升，人尿1毫升，尿素2毫克，硅酸鉀0.5毫克，磷酸二氫鉀5毫克，魚粉4毫克，三十烷醇0.2毫克，硫酸軟骨素2毫克，海洋酵母0.5毫克，面包鮮酵母1毫克，酪氨酸0.8毫克，羥丙基甲基纖維素0.6毫克，L-精氨酸1毫克，麥飯石粉6毫克，920植物生長刺激素4國際單位，維生素S-3溶液1毫升，M-F微量元素溶液1毫升，土壤浸出液1.2毫升，海泥浸出液1.2毫升，胰蛋白6毫克，三羥甲基氨基甲烷0.5毫克，羥基乙酸1毫升，臭氧消毒的純凈海水1000毫升。?

2.一種利用奶牛場糞便浸出液為主要原料養殖旋鏈角毛藻方法，其特征在于具體步驟如下：?

培養容器為容積3m³貯水桶，市場有售，食品級高密度聚乙烯材料制成，加厚，無縫一體式結構，堅固耐用，抗沖擊，無色透明，有良好透光性，以利旋鏈角毛藻進行光合作用，靠近底部有一水龍頭，水桶頂部有一圓形蓋子，上有旋絲，可旋轉而密封，蓋子打上3個孔，一個孔插入充氣管，另一個孔插入排氣管，充氣管和排氣管都是玻璃管，內徑6毫米，還有一個孔穿入一根金屬導線，導線末端接一個40w節能燈，因水桶較高，水桶旁邊有一梯子，方便上下操作，將貯水桶洗刷干凈，后用蒸餾水潤洗3遍，裝入權利要求1所述的培養基2噸，充氣混合5分鐘，選擇生命力旺盛、無污染的旋鏈角毛藻接種，接種密度4×10⁴cell/mL，蓋子上插入兩根干凈玻璃管，一根較長，100厘米，頂端露出蓋子15厘米，下端通過料管與散氣石連接，用以充氣，散氣石的作用是形成很小的氣泡，避免大氣泡或翻滾的波浪打碎藻細胞，另一根較短，35厘米，兩端露出蓋子即可，用以排氣，兩根玻璃管同樣粗細，用干凈的透明膠帶將兩根玻璃管固定，長的玻璃管上端用料管與充氣泵相連，充入混合氣體，混合氣體成分和體積比例是空氣∶純二氧化碳∶臭氧∶氨氣＝92％∶6％∶1％∶1％；連續充氣，充氣量不宜太大，以藻細胞浮起不下沉即可，室外培養，太陽光照射，最佳溫度25±2℃，最佳光照強度4000-8000Lux；夜間打開節能燈進行照明，培養的前5天，水桶上方搭建一簡易棚，上放置簾子遮擋光線，使光照強度維持在200-4500Lux，避免強烈陽光對細胞造成的光傷害，第6天撤掉簾子，較強的光照有利于細胞的生長繁殖和高不飽和脂肪酸的合成，培養至第7天，停止充氣，拿開蓋子，補充新鮮培養基100升，以彌補蒸發掉的水分，蓋上蓋子，充氣，繼續培養，至第9天，旋鏈角毛藻密度增加至600×10⁴cell/mL，停止培養，從底部的水龍頭放出藻液，將培養容器洗刷干凈后，加入中藥消毒液消毒30分鐘，后進入下一輪培養；?

所述中藥消毒液由以下重量比的物質組成：每100份85％乙醇中加入以下重量份的中藥材：板藍根30～50份、柴胡15～25份、薄荷15～25份、梔子5～15份、艾葉5～15份，中藥消?毒液制作方法：將新鮮板藍根、柴胡、薄荷葉、艾葉、山梔果切碎，于60-70℃下烘干，再用中藥材粉碎機分別粉碎至70目備用，用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的板藍根120克，柴胡60克，薄荷葉60克，艾葉30克，山梔果30克，置于三角燒瓶中充分混合后，加入1000毫升85％乙醇，浸泡48小時，200篩絹過濾，將清液靜置沉淀36小時，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為復方中藥消毒液，密封于黑色試劑瓶中，貼上標簽，置于4℃冰箱備用。?

3.根據權利要求2所述的一種利用磷肥廠廢水養殖半裸舟形藻方法，其特征在于，對選用的所述的反應器，洗刷干凈后進行消毒，使用紫外燈消毒，消毒10-20分鐘。?

4.根據權利要求2所述的一種利用磷肥廠廢水養殖半裸舟形藻方法，其特征在于，對選用的所述的反應器，洗刷干凈后進行消毒，使用高壓氮氣噴射消毒，消毒5-10分鐘。?

5.根據權利要求2所述的一種利用磷肥廠廢水養殖半裸舟形藻方法，其特征在于，對選用的所述的反應器，洗刷干凈后進行消毒，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒5-6分鐘。?

6.根據權利要求2所述的一種利用磷肥廠廢水養殖半裸舟形藻方法，其特征在于，對選用的所述的反應器，洗刷干凈后分兩個階段消毒，先使用高壓氮氣噴射消毒，消毒2-3分鐘，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒2-3分鐘，消毒完畢后再進行藻類培養。?