[發(fā)明專利]單個(gè)多能干細(xì)胞培養(yǎng)

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410379925.1
• 申請(qǐng)日: 2008-06-30
• 公開（公告）號(hào): CN104250632B
• 公開（公告）日: 2018-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: S.內(nèi)爾遜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 生命掃描有限公司
• 主分類號(hào): C12N5/0735
• 分類號(hào): C12N5/0735
• 代理公司: 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 彭昶;權(quán)陸軍

1.用于維持多能干細(xì)胞的方法，包括下列步驟：

(a) 獲得多能干細(xì)胞簇；

(b) 在MEF條件培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述多能干細(xì)胞簇；

(c) 用TrypLE^TMSELECT或TrypLE^TMEXPRESS釋放該多能干細(xì)胞為單細(xì)胞；和

(d) 平板接種該單個(gè)多能干細(xì)胞到組織培養(yǎng)基質(zhì)上，所述組織培養(yǎng)基質(zhì)包含細(xì)胞外基質(zhì)以及bFGF或者成纖維細(xì)胞條件培養(yǎng)基；

其中所述TrypLE^TMSELECT或TrypLE^TMEXPRESS用于培養(yǎng)細(xì)胞2分鐘，引起最少細(xì)胞損壞，并且以0.5 g/l至2.5 g/l的濃度存在，

其中所述多能干細(xì)胞是已經(jīng)建立的胚胎干細(xì)胞系；并且

其中在釋放細(xì)胞后細(xì)胞成活力增強(qiáng)并且沒有獲得染色體異常。

2.用于維持多能干細(xì)胞的方法，包括下列步驟：

(a) 獲得多能干細(xì)胞簇；

(b) 在MEF條件培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述多能干細(xì)胞簇；

(c) 用TrypLE^TMSELECT或TrypLE^TMEXPRESS釋放該多能干細(xì)胞為單細(xì)胞；和

(d) 平板接種該單個(gè)多能干細(xì)胞到組織培養(yǎng)基質(zhì)上，所述組織培養(yǎng)基質(zhì)包含細(xì)胞外基質(zhì)以及MEF條件培養(yǎng)基；

其中所述TrypLE^TMSELECT或TrypLE^TMEXPRESS用于培養(yǎng)細(xì)胞2-5分鐘，引起最少細(xì)胞損壞，并且以0.5 g/l至2.5 g/l的濃度存在，

其中所述多能干細(xì)胞是已經(jīng)建立的胚胎干細(xì)胞系；并且

其中在釋放細(xì)胞后細(xì)胞成活力增強(qiáng)并且沒有獲得染色體異常。