[發明專利]一種蛋白質分子印跡聚離子液體膜電化學傳感器

有效

• 申請號: 201410378151.0
• 申請日: 2014-07-31
• 公開（公告）號: CN104142361A
• 公開（公告）日: 2014-11-12
• 發明（設計）人: 李春涯;韓苗;王炎英
• 申請（專利權）人: 中南民族大學
• 主分類號: G01N27/333
• 分類號: G01N27/333;C08F222/38;C08J9/28
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 余曉雪;王敏鋒

1.1-乙烯基-3-氨丙基咪唑四氟硼酸鹽離子液體，其合成方法如下：

將3-溴丙基胺氫溴酸鹽按照固液比4.4?g：30?mL溶于無水乙腈，N₂保護，升溫至55℃，然后將含有N-乙烯基咪唑的無水乙腈溶液在2?h滴加完畢，然后繼續反應12?h，移除溶劑，同時加二次水和甲苯洗滌，分液后水層溶于甲醇，滴加Na₂CO₃飽和甲醇溶液至pH為9；蒸發溶劑，產物溶于四氟硼酸鈉飽和溶液，攪拌1?h，蒸發除水，甲醇離心洗滌，蒸發甲醇，得到淺黃色的1-乙烯基-3-氨丙基咪唑四氟硼酸鹽離子液體；

所述無水乙腈與含有N-乙烯基咪唑的無水乙腈溶液的體積比為1?:?1；

所述3-溴丙基胺氫溴酸鹽與N-乙烯基咪唑的質量比為4.4?:?2.8。

2.一種利用權利要求1所述的離子液體作為功能單體制備蛋白質分子印跡電化學傳感器的方法，包括以下步驟：

(1)將多壁碳納米管進行羧基化修飾得羧基化多壁碳納米管MWCNT-COOH；

(2)用羧基化多壁碳納米管對玻碳電極進行表面修飾得羧基化多壁碳納米管修飾玻碳電極；

(3)利用步驟(2)制備的羧基化多壁碳納米管修飾玻碳電極、利用權利要求1所述的離子液體作為功能單體制備蛋白質分子印跡電化學傳感器。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述蛋白質為牛血清白蛋白。

4.一種利用權利要求1所述的離子液體作為功能單體制備蛋白質分子印跡電化學傳感器的方法，包括以下步驟：

（1）制備羧基化多壁碳納米管：

多壁碳納米管溶于4?mol·L^-1的硝酸中，加熱回流，反應24?h，待反應結束，用乙腈離心洗滌酸化產物，至pH?7，再用乙醇洗滌，于25℃下烘干；

所述多壁碳納米管與4?mol·L^-1的硝酸的固液比為50?mg?:?6?mL；

（2）制備羧基化多壁碳納米管修飾玻碳電極MWCNT-COOH?/CGE：

將直徑為3?mm的玻碳電極用粒徑為0.05?μm的氧化鋁粉在拋光布上打磨至光亮鏡面，用二次水沖洗干凈，再依次用硝酸、無水乙醇和二次水清洗，最后用N₂吹干備用；稱取一定量步驟(1)制備的羧基化多壁碳納米管，加入到二次水中，超聲分散均勻得羧基化多壁碳納米管溶液，其中羧基化多壁碳納米管濃度為0.5?mg·mL^-1，取6.0?μL羧基化多壁碳納米管溶液滴涂于玻碳電極表面，室溫下晾干，即得羧基化多壁碳納米管修飾玻碳電極MWCNT-COOH?/GCE；

(3)制備蛋白質分子印跡電化學傳感器：

480?μL的0.1?mol·L^-1、pH?7.4?Tris-HCl緩沖溶液中，加入4.8?mg牛血清白蛋白使其完全溶解，再依次加入0.028?g權利要求1所述的離子液體、0.002?g?N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺、15?μL?10wt%過硫酸銨-5wt%四甲基乙二胺溶液，混勻得混合溶液，取6.0?μL混合溶液滴涂在MWCNT-COOH?/GCE表面，35℃下聚合成膜，洗脫牛血清白蛋白、晾干，得蛋白質分子印跡電化學傳感器。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述洗脫牛血清白蛋白的步驟為依次用10v/v%?HAc-10m/v%?SDS溶液、0.1?mol·L^-1的pH?7.4?Tris-HCl緩沖溶液、二次水洗滌。

6.根據權利要求3或4或5所述的方法制備的蛋白質分子印跡電化學傳感器在定性或者定量檢測牛血清白蛋白中的應用。