[發明專利]一種結核分枝桿菌自然感染非人靈長類動物模型的建立方法及裝置

有效

• 申請號: 201410374917.8
• 申請日: 2014-07-30
• 公開（公告）號: CN104127444B
• 公開（公告）日: 2017-09-22
• 發明（設計）人: 霍文哲;付博文;郭銘;李湘東;王勇
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: A01K1/03
• 分類號: A01K1/03;A01K1/035;A01K1/00;A61K35/74
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙)42222
• 代理人: 張火春

1.一種氣流自循環組合式負壓隔離器，由隔離系統、負壓調節系統、氣流自循環系統組成，其中隔離系統包括兩個或多個由不銹鋼外殼以及玻璃門完整密封拼接之后形成的殼體，其特征在于：所述氣流自循環系統由導流風扇、濾網及導流板、循環風機、管道、氣動閥門、送風風機組成，導流風扇設置在隔離系統相鄰殼體之間，濾網及導流板設置在負壓隔離器右側，管道、循環風機、氣動閥門、送風風機設置在負壓隔離器頂部；所述負壓調節系統包括安裝在負壓隔離器頂部的送風閥、送風口、和氣流自循環系統共用的送風風機、部分管道及安裝在隔離系統相鄰殼體之間的導流風扇、負壓隔離器右側背部的高效過濾器、排風管、排風風機、排風閥，排風口，排風口經過軟管與實驗室排風設備相連接，負壓隔離器左側用于監測過濾器的壓差表；PLC控制單元安裝在負壓隔離器左側,對自循環模式、補新風模式之間的切換進行控制，當切換到補新風模式時，通過負壓調節系統控制送、排風風量，最終達到壓力梯度的控制要求，安裝在殼體頂部的氣動閥門用于切換自循環模式及補新風模式。

2.根據權利要求1所述的負壓隔離器，其特征在于：多個殼體可并排安放，殼體內設置有動物籠，動物籠分為上、下兩層。

3.一種結核分枝桿菌自然感染非人靈長類動物模型的建立方法，其特征在于經過下列步驟：

A、選擇對非人靈長類動物敏感的結核桿菌；

B、活化結核桿菌，并制備成10-20CFU/毫升濃度的菌懸液；

C、用人工感染的方式感染至少2只健康非人靈長類動物；

D、將人工感染的非人靈長類動物在感染結核分支桿菌后當天與健康非人靈長類動物一起放置于權利要求1或2任意一項所述的氣流自循環組合式負壓隔離器內進行飼養；

E、在動物生物安全三級實驗室內飼養與觀察；

F、判定動物結核病陽性模型。

4.根據權利要求3中建立結核分枝桿菌自然感染非人靈長類動物模型的方法，其特征在于：對非人靈長類動物敏感的結核桿菌是人型結核分枝桿菌H37Rv株。

5.根據權利要求3中建立結核分枝桿菌自然感染非人靈長類動物模型的方法，其特征在于：人工感染的方式為通過纖維支氣管鏡將結核桿菌直接接種到健康非人靈長類動物的肺部。

6.根據權利要求3中建立結核分枝桿菌自然感染非人靈長類動物模型的方法，其特征在于：判定動物結核病感染陽性的評價指標是體溫、體重、血沉、C反應蛋白、胸部X光片、舊結核菌素皮膚試驗(Tuberculin skin test，TST)以及特異性免疫反應TB特異性IFN-γ。

7.根據權利要求3中建立結核分枝桿菌自然感染非人靈長類動物模型的方法，其特征在于：非人靈長類動物是中國獼猴。

8.根據權利要求7中建立結核分枝桿菌自然感染非人靈長類動物模型的方法，其特征在于經過下列步驟：

A、選擇對中國獼猴敏感的結核桿菌H37Rv株；

B、活化結核桿菌，并制備成10CFU/毫升濃度的菌懸液；

C、用纖維支氣管鏡將結核桿菌直接接種到2只健康中國獼猴的肺部；

D、將人工感染的中國獼猴在感染結核分支桿菌后當天與健康中國獼猴一起放置于權利要求1或2任意一項所述的氣流自循環組合式負壓隔離器內進行飼養；

E、在動物生物安全三級實驗室內飼養與觀察50周；

F、判定動物結核病陽性模型。

9.根據權利要求3-8任意一項建立的結核分枝桿菌自然感染非人靈長類動物模型用于抗結核分枝桿菌藥物篩選的用途。

10.根據權利要求3-8任意一項建立的結核分枝桿菌自然感染非人靈長類動物模型用于抗結核分枝桿菌疫苗評價中的用途。