[發明專利]一種基于G四聚體的熒光法檢測納米銀顆粒的方法

有效

• 申請號: 201410371127.4
• 申請日: 2014-07-30
• 公開（公告）號: CN104132919A
• 公開（公告）日: 2014-11-05
• 發明（設計）人: 徐升敏;陳少鵬;吳李君
• 申請（專利權）人: 中國科學院合肥物質科學研究院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 安徽匯樸律師事務所 34116
• 代理人: 汪蕙

1.一種基于G四聚體的熒光法檢測納米銀顆粒的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)配置待檢測的樣品溶液：在納米銀水溶液中加入一定量的磷酸，調成酸性環境，然后加入雙氧水混合均勻，將納米銀水溶液中的納米銀顆粒完全轉化成銀離子，得到待檢測的樣品溶液；

(2)配置多種標準品溶液：分別配置一定范圍內不同濃度的多種銀離子溶液，作為標準品溶液以便繪制標準曲線；

(3)取多份含G堿基重復序列的單鏈DNA(G-DNA)配置G-DNA溶液，所述G-DNA序列為TGGGTAGGGCGGGTTGGGAAA，加熱變性后，分別與等體積的樣品溶液、多種標準品溶液混合并冷卻至室溫，得到多份混合溶液一；

(4)分別在多份混合溶液一中加入KAC、Triton?X-100溶液得到多份混合溶液二，使G-DNA折疊形成G四聚體結構；

(5)在多份混合溶液二中，分別加入N-甲基卟啉二丙酸IX(NMM)得到多份混合溶液三，使NMM與G-DNA相互作用形成穩定的復合體；

(6)通過熒光光譜儀測定多份混合溶液三的熒光光譜，根據多種標準品溶液濃度與其相對應的最大熒光吸收值繪制標準曲線，通過標準曲線即可推算樣品溶液中納米銀顆粒的含量。

2.如權利要求1所述的一種基于G四聚體的熒光法檢測納米銀顆粒的方法，其特征在于，

所述步驟(1)中，樣品溶液的體積為0.25～1mL，樣品溶液中磷酸終濃度為1μM、雙氧水的終濃度為2mM；

所述步驟(2)中，分別配置0.5～10μM范圍內不同濃度的多種銀離子溶液，作為標準品溶液；

所述步驟(3)中，配置0.25～1mL?0.2-1μM?G-DNA溶液，并加入EDTA螯合去除其中存在干擾的其他二價金屬離子，加熱變性后，分別與等體積的樣品溶液、多種標準品溶液混合并冷卻至室溫，得到多份混合溶液一；

所述步驟(4)中，多份混合溶液二中KAC終濃度為1mM，Triton?X-100終濃度為0.05％；

所述步驟(5)中，多份混合溶液三中NMM的終濃度為1μM。