[發明專利]一種昆侖雪菊原花青素的提取方法及在延緩衰老中的應用

有效

• 申請號: 201410365439.4
• 申請日: 2014-07-29
• 公開（公告）號: CN104173401B
• 公開（公告）日: 2017-04-19
• 發明（設計）人: 敬思群;柴文杰
• 申請（專利權）人: 新疆大學;敬思群
• 主分類號: A61K36/28
• 分類號: A61K36/28;A61P39/06;C07D311/62;A61K31/352
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技術領域

本發明涉及原花青素的提取制備的技術領域。具體的說，本發明涉及一種從昆侖雪菊原花青素的提取方法及其應用的制備技術領域。

背景技術

新疆昆侖雪菊，學名為兩色金雞菊(Coreopsis tinctoria)是菊科金雞菊屬一年生草本植物的干燥頭狀花序．在新疆主要分布于和田地區海拔高3000米左右的昆侖山區，有較豐富的野生資源。長期以來，昆侖雪菊被當地居民當花茶飲用，新疆維吾爾醫院也作為一種維藥材應用．具有清熱解毒、活血化瘀、和胃健脾之功，用花泡茶飲，可治療燥熱煩渴、高血壓、心慌、胃腸不適、食欲不振、痢疾及瘡癤腫毒，是具有廣闊前景和研究價值的新品種。作為藥食兩用資源，昆侖雪菊在近幾年已經成為市場的賣點，已成為人們的高檔饋贈禮品。關于昆侖雪菊黃酮研究較多，而對昆侖雪菊原花青素的研究鮮見報道。

原花青素(Procyanidins，PC)是一種黃烷-3-醇或黃烷-3,4-二醇聚合而成的一大類多酚化合物的總稱，是目前國際上公認的清除人體內自由基最有效的天然抗氧化劑。原花青素還具有保護心血管、預防高血壓、抗腫瘤、抗輻射、抗突變、美容等，并具有改善人體微循環的功能。原花青素作為植物中一類普遍的次級代謝產物同花色素、生物黃酮等物質一樣廣泛分布于各種植物的種子、葉子、果實、花和皮、殼等處，目前國內外多從葡萄籽中提取原花青素，其次是從松樹皮中提取。而以昆侖雪菊花作為提取原花青素原料，研究其提取方法和含量的文章還未見報道。

動態超高壓微射流（DHPM）是一種特殊形式的高壓均質技術，它利用高壓使液體物料高速流過狹窄的縫隙時受到強大的剪切力、撞擊力以及空穴爆炸力等綜合作用，使細胞破碎、促進細胞內容物溢出，從而提高有效成分的提取率的過程。目前已有學者研究了DHPM在提取和大分子改性方面的應用，如對馬鈴薯葉中總黃酮提取及活性影響、木瓜蛋白酶活性的影響、脂肪酸脂質體的制備、對胰蛋白酶的活性、穩定性和構象的影響等，但尚無關于將DHPM技術運用于雪菊原花青素提取的相關研究報道。

發明內容

針對現有技術中未見有關將DHPM技術運用于雪菊原花青素提取的研究和報道，本發明需要解決的技術問題就在于克服現有技術的缺陷，旨在提供一種昆侖雪菊原花青素的提取方法及在延緩衰老中的應用，制備的原花青素的總抗氧化活性也比抗壞血酸高，結合果蠅生存實驗和體內生化指標測定結果說明原花青素具有延緩果蠅衰老功效，具有廣泛的應用價值。

本發明提供的技術方案：

本發明以生長在海拔2600米以上的昆侖雪菊花為原料，采用動態超高壓微射流輔助提取技術從中提取出雪菊原花青素，優化提取工藝，并對提取物進行抗氧化、延緩果蠅衰老作用及對CCl4誘導的小鼠急性肝損傷的保護作用的研究，確定了從昆侖雪菊中提取原花青素在延緩衰老中的應用具有良好的效果；制備的原花青素的總抗氧化活性也比抗壞血酸高，是一種天然的抗氧化劑，結合果蠅生存實驗和體內生化指標測定結果說明原花青素具有延緩果蠅衰老功效；通過小鼠肝損傷實驗表明，從從昆侖雪菊中提取原花青素可降低血清ALT和AST活性，對CCl4致小鼠肝損傷有一定的保護作用，應用從從昆侖雪菊中提取原花青素具有良好的延緩衰老功效，具有廣泛的應用價值。

本發明具體提供一種昆侖雪菊原花青素的提取方法，%按照重量百分比計，具體提取方法步驟如下：

（1）生長在海拔2600米以上的昆侖雪菊花為原料，將烘干后的雪菊粉在粉碎機中粉碎后過40目篩。

（2）用石油醚對雪菊粉脫脂8小時并在50℃烘干2h。

（3）乙醇浸潤：料液比按重量比1:40配置的70%乙醇提取液放置于4℃冰箱中靜置過夜。

（4）預均質：使用均質壓力為30MPa,均質2次。

（5）動態超高壓微射流處理：采用一定微射流壓力處理2次；提取壓力120MPa，提取溫度50℃，乙醇濃度70%，提取時間30min。

（6）乙醇回流：以60%乙醇濃度，提取時間2.5 h，提取溫度60 ℃，回流提取2次，離心并合并濾液，經過旋轉蒸發工藝，蒸發溫度30℃，轉速40rpm。

（7）大孔樹脂純化：AB-8大孔樹脂純化最優條件為原花青素上樣濃度為1.06mg/mL、上樣pH=6、上樣流速為2BV/h，用4倍柱床體積70%的乙醇以流速為2BV/h洗脫；經過旋轉蒸發工藝，蒸發溫度30℃，轉速40rpm；純化后昆侖雪菊原花青素的純度為66.76%。

（8）采用真空冷凍干燥，冷凝溫度－50℃，真空度<20Pa條件下制備獲得昆侖雪菊原花青素濃縮粉。