[發明專利]一種青霉素類化合物化學篩選去重復方法

有效

• 申請號: 201410362421.9
• 申請日: 2014-07-28
• 公開（公告）號: CN104156573B
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 劉衛紅;楊建芳;宋艷秋;劉歆;高鵬飛;張成桂
• 申請（專利權）人: 大理學院
• 主分類號: G06F19/00
• 分類號: G06F19/00
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙)11350
• 代理人: 湯東鳳

技術領域

本發明屬于天然藥物分離篩選去重復技術領域，尤其涉及一種青霉素類化合物化學篩選去重復方法。

背景技術

當前天然藥物創新遭遇瓶頸：重復發現率達99.9％，去重復顯得尤為重要。LC-MS等前景好的去重復方法須借助昂貴的儀器，專業性強，常獨立于具體天然產物分離之外。

薄層色譜(Thin Layer Chromatography，TLC)，又稱薄層層析，是一種微量、快速而簡單的色譜法，它兼有柱色譜和紙色譜的優點，具有設備和操作簡單、花費最低、展開時間短、檢驗靈敏度高、多通道多維檢測、可不連續的離線操作、能衍生化、結果直觀等優點，主要用于微量樣品快速分離和定性分析。

現行TCL定性必須隨行對照品，經過兩種以上不同組成的展開劑展開，Rf均與對照品一致時，才可以認定該斑點與對照品是同一化合物。這些定性鑒定過程仍處于經驗過程中，而且隨行對照品經常不可得，最終的定性鑒定效果不理想。

德國HKI研究所利用TLC數據庫，對8000個微生物來源的粗提物進行篩選，從中篩選分離出259個化合物，其中129個為新結構化合物，但其排重方法和數據庫未見報道。在沒有隨行對照的情況下，如果建立一定標準化操作(SOP),原則上，每增加一組展開劑或增加一種衍生化檢測方法，就增加一些鑒定的比對信息，展開劑越多，比對信息越多，鑒定越準確。

發明內容

本發明的目的在于提供一種青霉素類化合物化學篩選去重復方法，旨在解決目前青霉素類化合物去重復定性鑒定效果不理想的問題。

本發明是這樣實現的，一種青霉素類化合物化學篩選去重復方法，包括以下步驟：

S1、在標準化操作程序SOP下，建立已知青霉素類化合物的展開數據庫，在SOP下展開未知樣品；

S2、計算未知樣品在展開劑下，含有所有已知化合物的最大概率，然后計算所有展開條件下含有已知化合物的最小的最大概率；

S3、將所述最小的最大概率分別和閾值進行比較，判斷是否含有未知化合物。

優選地，在步驟S1中，已知青霉素(β-內酰胺)化合物在標準化操作程序SOP操作下展開，R_f及其分布規律包含：9種青霉素(β-內酰胺)13種展開劑展開R_f值，其中，每種青霉素在不同展開劑(zkj)下R_f值，服從N(R_f，0.05²)分布，各個展開劑下R_f值相互獨立。

優選地，在步驟S2中，在步驟S2中，所述已知化合物的最小的最大概率計算過程包括以下具體步驟：

1)在SOP下按多種展開劑展開，記錄條帶數及每個條帶的R_f值；

2)分別計算TLC每個條帶屬于所有已知化合物的概率；

3)分別找出屬于所有已知化合物最大概率的條帶，并記錄該最大概率值；

4)重復步驟1)、2)，計算所有展開劑展開下屬于所有已知化合物最大概率的條帶，并記錄該最大概率值；

5)分別取各個展開劑各個已知化合物概率最小值；

6)計算包含所有物質(X1,X2,…,Xi,…,Xb)最小(Min(g1)，Min(g2)，…，Min(gj)，…，Min(gb))的最大概率值Minmax。

相比與現有技術的缺點和不足，本發明具有以下有益效果：本發明基于TLC去青霉素化合物重復，不僅具有設備和操作簡單、花費最低、展開時間短、檢驗靈敏度高、多通道多維檢測、可不連續的離線操作、能衍生化、結果直觀等優點，而且去重復定性鑒定效果良好。

附圖說明

圖1是本發明青霉素類化合物化學篩選去重復方法一實施例的步驟流程圖；

圖2是本發明青霉素類化合物化學篩選去重復方法用Matlab編寫的腳本表示的去重復過程示意圖。

具體實施方式

為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合附圖及實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。

一種青霉素類化合物化學篩選去重復方法，如圖1所示，包括以下步驟：

S1、在標準化操作程序SOP下，建立已知青霉素類化合物的展開數據庫，在SOP下展開未知樣品

在步驟S1中，建立數據庫及SOP，如下表所示：

表1