[發(fā)明專利]多組分嵌段親水共聚物?硅膠雜化色譜填料的制備及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410360419.8
• 申請(qǐng)日: 2014-07-28
• 公開（公告）號(hào): CN105289558B
• 公開（公告）日: 2018-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 錢小紅;秦偉捷;潘一廷;張萬軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京蛋白質(zhì)組研究中心
• 主分類號(hào): B01J20/283
• 分類號(hào): B01J20/283;B01J20/286;B01J20/30;C08F293/00;C07K1/14;C07K1/16;C07H3/06;C07H1/06
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1.一種多組分嵌段共聚物-硅膠雜化色譜填料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)在氮?dú)饣驓鍤鈿夥罩校瑢⒐柰榕悸?lián)劑和縛酸劑于冰浴中反應(yīng)30min后，再加入ATRP引發(fā)劑混勻于25-80℃進(jìn)行反應(yīng)30min-8小時(shí)，反應(yīng)完畢得到SI-ATRP引發(fā)劑；

2)利用SI-ATRP引發(fā)劑上的硅烷偶聯(lián)劑與硅膠填料表面的硅羥基發(fā)生脫水反應(yīng)生成硅氧鍵共價(jià)連接，從而將SI-ATRP引發(fā)劑固定在硅膠填料表面上；

3)以2-甲基丙烯酸3-甘露糖氨基丙酯為聚合單體，氯化亞銅為催化劑，1，1，4，7，7-五甲基二亞乙基三胺為配體按照摩爾比400-100：1：1-3的比例與固定了SI-ATRP引發(fā)劑的硅膠填料加入有機(jī)溶劑中，超聲處理使其溶解并混合均勻，將反應(yīng)液與表面已固定了SI-ATRP引發(fā)劑的硅膠填料混合，在氮?dú)饣驓鍤鈿夥障掠谑覝卦诠枘z填料的表面原位引發(fā)SI-ATRP反應(yīng)0.5-24小時(shí)；反應(yīng)完成后用有機(jī)溶劑清洗2-3次去除剩余反應(yīng)物，通過離心方式回收得到共聚物1-硅膠雜化填料；

4)以2-甲基丙烯酸3-葡萄糖氨基丙酯為聚合單體，氯化亞銅為催化劑，1，1，4，7，7-五甲基二亞乙基三胺為配體按照摩爾比400-100：1：1-3的比例與上一步制備的共聚物1-硅膠雜化填料混合均勻，繼續(xù)進(jìn)行SI-ATRP反應(yīng)，反應(yīng)完成后用有機(jī)溶劑清洗2-3次去除剩余反應(yīng)物，通過離心方式回收得到共聚物2-共聚物1-硅膠雜化填料；

其中2-甲基丙烯酸3-甘露糖氨基丙酯和2-甲基丙烯酸3-葡萄糖氨基丙酯是按照如下步驟制備而得：

將甲基丙烯酸縮水甘油酯與0.2M的硫酸于50℃進(jìn)行氧化反應(yīng)4小時(shí)后，將氧化所得產(chǎn)物與氨基甘露糖或氨基葡萄糖的甲醇溶液混勻，其中甲基丙烯酸縮水甘油酯、硫酸和氨基甘露糖或氨基葡萄糖的摩爾比1：0.25-1：0.5-2；

室溫下進(jìn)行schiff堿反應(yīng)4-12小時(shí)，反應(yīng)完畢得到所述2-甲基丙烯酸3-甘露糖氨基丙酯或2-甲基丙烯酸3-葡萄糖氨基丙酯；

5)以[2-(甲基丙烯酰基氧基)乙基]二甲基-(3-磺酸丙基)氫氧化銨為聚合單體，氯化亞銅為催化劑，1，1，4，7，7-五甲基二亞乙基三胺為配體按照摩爾比400-100：1：1-3的比例與上一步制備的共聚物2-共聚物1-硅膠雜化填料混合均勻，繼續(xù)進(jìn)行SI-ATRP反應(yīng)，反應(yīng)完成后用有機(jī)溶劑清洗2-3次去除剩余反應(yīng)物，通過離心方式回收得到共聚物3-共聚物2-共聚物1-硅膠雜化填料，即得到多組分嵌段親水共聚物-硅膠雜化色譜填料。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多組分嵌段共聚物-硅膠雜化色譜填料的制備方法，其特征在于：所述步驟1)中的硅烷偶聯(lián)劑為3-氨基丙基三乙氧基硅烷、3-氨丙基三甲氧基硅烷和γ-巰丙基三乙氧基硅烷中的至少一種，ATRP引發(fā)劑為2-溴異丁酰溴、α-溴代異戊酰溴和α-溴丙酰溴中的至少一種，縛酸劑為三乙胺或吡啶，硅烷偶聯(lián)劑、ATRP引發(fā)劑和縛酸劑的摩爾比為0.5-1：1：1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多組分嵌段共聚物-硅膠雜化色譜填料的制備方法，其特征在于：所述步驟2)將SI-ATRP引發(fā)劑固定在硅膠填料表面的步驟如下：

(1)將硅膠填料進(jìn)行酸堿處理：用0.1M的HCl溶液浸泡硅膠填料，30分鐘后離心去除上清，用水清洗硅膠填料至上清液中pH值為7，再使用0.1M的NaOH溶液浸泡硅膠填料，30分鐘后離心將上清液去除，用水清洗硅膠填料至上清液的pH值為7；

(2)將酸堿處理后的硅膠填料與SI-ATRP引發(fā)劑按質(zhì)量比1：0.37-7.4的比例于甲醇、乙醇和環(huán)己醇中的至少一種溶液中混合均勻，室溫下進(jìn)行脫水反應(yīng)1-24小時(shí)后，去除剩余SI-ATRP引發(fā)劑，并用甲醇、乙醇和環(huán)己醇中的至少一種溶液清洗硅膠顆粒，氮?dú)獯蹈伞?/p>

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多組分嵌段共聚物-硅膠雜化色譜填料的制備方法，其特征在于：所述步驟3)、4)、5)中的有機(jī)溶劑為甲醇、四氫呋喃、乙醇和環(huán)己醇中的至少一種。

5.一種如權(quán)利要求1所述的制備方法得到的多組分嵌段共聚物-硅膠雜化色譜填料的應(yīng)用，其特征在于：所述的多組分嵌段共聚物-硅膠雜化色譜填料用于糖肽的混合物或糖鏈的混合物的富集和/或分離。