[發明專利]Mini-X-STR和Amelogenin基因座熒光標記復合擴增試劑盒無效
| 申請號: | 201410359425.1 | 申請日: | 2014-07-25 |
| 公開(公告)號: | CN104120183A | 公開(公告)日: | 2014-10-29 |
| 發明(設計)人: | 吳微微;郝宏蕾;呂德堅;周懷谷;蘇艷佳;任文彥 | 申請(專利權)人: | 浙江省公安物證鑒定中心 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人: | 鄧唯 |
| 地址: | 310009 浙*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | mini str amelogenin 基因 熒光 標記 復合 擴增 試劑盒 | ||
1.Mini-X-STR和Amelogenin基因座熒光標記擴增試劑盒,其特征在于,包括有用于擴增如下13個基因座的引物:DXS7133、DXS8378、DXS981、DXS7424、DXS6789、DXS10159、GATA165B12、DXS101、DXS7423、GATA31E08、DXS10164、DXS10162、Amelogenin。
2.根據權利要求1所述的Mini-X-STR和Amelogenin基因座熒光標記擴增試劑盒,其特征在于:上述的試劑盒中的引物是在同一個擴增體系中進行復合擴增的。
3.根據權利要求2所述的Mini-X-STR和Amelogenin基因座熒光標記擴增試劑盒,其特征在于:所述的引物的序列如下所示:DXS7133,SEQ?ID?NO.1~2;DXS8378,SEQ?ID?NO.?3~4;DXS981,SEQ?ID?NO.?5~6;DXS7424,SEQ?ID?NO.?7~8;DXS6789,SEQ?ID?NO.?9~10;DXS10159,SEQ?ID?NO.?11~12;GATA165B12,SEQ?ID?NO.?13~14;DXS101,SEQ?ID?NO.?15~16;DXS7423,SEQ?ID?NO.?17~18;DATA31E08,SEQ?ID?NO.?19~20;DXS10164,SEQ?ID?NO.?21~22;DXS10162,SEQ?ID?NO.?23~24;Amelogenin,SEQ?ID?NO.?25~26。
4.根據權利要求2所述的Mini-X-STR和Amelogenin基因座熒光標記擴增試劑盒,其特征在于:擴增體系的組成如下所示:Buffer,11?μL;基因組DNA,0.1~10μl,DNA的含量為0.04~5ng;引物混合物,5.0?μL;sdH2O,補足至25.0μL;其中,所述的Buffer的組成是:MgCl2?7.5mM、Tris-HCl?buffer?125mM、KCl?125mM、dNTPs?7.5m?M、BSA?2mg/ml、Taq酶0.5μL,其余為水。
5.根據權利要求2所述的Mini-X-STR和Amelogenin基因座熒光標記擴增試劑盒,其特征在于:每個基因座對應的引物中至少有一個引物的5’端進行熒光染料標記。
6.根據權利要求5所述的Mini-X-STR和Amelogenin基因座熒光標記擴增試劑盒,其特征在于:每個基因座對應的引物之間為分組標記的,分組是:DXS7133、DXS8378、DXS981為第一組;DXS7424、DXS6789、DXS10159為第二組;GATA165B12、DXS101、DXS7423為第三組;GATA31E08、DXS10164和DXS10162為第四組。
7.根據權利要求6所述的Mini-X-STR和Amelogenin基因座熒光標記擴增試劑盒,其特征在于:各組采用的熒光染料標記物選自6-FAM、HEX、TAMRA或ROX,且每組的標記色都不相同。
8.根據權利要求2所述的Mini-X-STR和Amelogenin基因座熒光標記擴增試劑盒,其特征在于:所述的試劑盒的擴增程序如下:初始變性,95℃,2分鐘;熱循環,94℃?5秒,60℃?15秒,72℃?10秒,共27~30個循環;終延伸,72℃,6分鐘;保溫,4℃。
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