[發明專利]一種超氧化物歧化酶的提取方法有效
| 申請號: | 201410357344.8 | 申請日: | 2014-07-24 |
| 公開(公告)號: | CN104087562B | 公開(公告)日: | 2016-08-24 |
| 發明(設計)人: | 黃海軍;王若林 | 申請(專利權)人: | 北京翰若生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/02 | 分類號: | C12N9/02 |
| 代理公司: | 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 吳開磊 |
| 地址: | 100125 北京市朝陽區*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 超氧化物歧化酶 提取 方法 | ||
技術領域
本發明涉及生物提取技術領域,具體而言,涉及一種超氧化物歧化酶的提取方法。
背景技術
超氧化物歧化酶(SOD,super?oxide?dismutase)是一種源于生命體的活性物質,能消除生物體在新陳代謝過程中產生的有害物質,具有抗衰老的特殊功效。它在大自然中普遍存在,不僅在需氧代謝細胞中存在,甚至在厭氧細菌中也有發現。SOD是人體內最重要的酶之一,它是一種極其有效的抗氧化劑,能抵御超氧陰離子自由基對細胞的破壞,能有效控制超氧陰離子自由基,保持人體細胞膜處于年青、柔軟和健康的狀態。但是,SOD也像其它存在于人體內的保護性成分一樣,隨著年齡的增加而減少,這樣就使細胞更易受到氧化劑的攻擊,從而引起老化和疾病。
銀杏葉中富含SOD,能催化超氧負離子發生歧化反應,是一種具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、抗輻射和消炎作用的金屬酶,在臨床醫學、藥學等領域得到廣泛應用。
目前,銀杏葉中SOD采用有機溶劑進行提取,工藝生產過程中需要用到蒸煮、二次濃縮和烘干共計四道耗汽單元操作,整體能源消耗高,工藝生產流程復雜;有機溶劑使用種類和數量較大,有乙醇、正己烷等,容易在終產品中殘留,影響產品質量;并且制得的產品成本較高,不利于產品推廣與發展。
發明內容
本發明的目的在于提供一種超氧化物歧化酶的提取方法,以解決上述的問題。
在本發明的實施例中提供了一種超氧化物歧化酶的提取方法,包括以下步驟:
(a)、取新鮮葉子,打漿破碎得到葉子漿料;
(b)、所述葉子漿料采用緩沖溶液KH2PO4-K2HPO4浸泡,所述葉子漿料與所述緩沖溶液的質量比為1:6-10,浸泡液pH為7.3-7.8,浸泡溫度為45-55℃;
(c)、浸泡36-40h后,將浸泡物離心,得到上清液;
(d)、將所述上清液濃縮,干燥,得到超氧化物歧化酶產品。
優選地,所述新鮮葉子包括甘薯葉、山楂葉、銀杏葉、串葉松香草葉、北海道黃楊葉、大葉黃楊葉、金心黃楊葉中的任意一種或多種。
優選地,所述新鮮葉子為新鮮嫩葉。
優選地,在所述步驟(a)中,破碎的粒度大于4目。
優選地,在所述步驟(b)中,所述緩沖溶液KH2PO4-K2HPO4的質量濃度為30%-40%,KH2PO4與K2HPO4的摩爾數比為0.8-1.2:0.8-1.2。
優選地,在所述步驟(b)中,浸泡罐內含有的物質占其體積的1/3-2/3。
優選地,在所述步驟(b)中,浸泡過程中進行攪拌,攪拌速度為25-30轉/分鐘。
優選地,在所述步驟(c)中,離心速度為3000-3500轉/分鐘。
優選地,在所述步驟(c)中,所述上清液的濁度小于8NTU。
優選地,在所述步驟(d)中,濃縮的倍數為4-4.5倍,干燥至所述超氧化物歧化酶產品的水分含量為3-4%。
優選地,在所述步驟(d)中,采用四效真空降膜錯流蒸發對所述上清液濃縮,采用噴霧干燥進行干燥。
本發明實施例提供的超氧化物歧化酶的提取方法,是將新鮮葉子破碎后浸泡,然后離心得到上清液,對上清液進行濃縮和干燥,得到固態超氧化物歧化酶,整個提取過程簡單易行,能耗低,且得到的超氧化物歧化酶無任何有機溶劑,品質高;降低了20-30%的成本。
具體實施方式
下面通過具體的實施例子對本發明做進一步的詳細描述。
本發明的實施例中提供了一種超氧化物歧化酶的提取方法,包括以下步驟:
(a)、取新鮮葉子,打漿破碎得到葉子漿料;
(b)、所述葉子漿料采用緩沖溶液KH2PO4-K2HPO4浸泡,所述葉子漿料與所述緩沖溶液的質量比為1:6-10,浸泡液pH為7.3-7.8,浸泡溫度為45-55℃;
(c)、浸泡36-40h后,將浸泡物離心,得到上清液;
(d)、將所述上清液濃縮,干燥,得到超氧化物歧化酶產品。
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