[發明專利]一種文冠果的無性快繁方法

無效

• 申請號: 201410355211.7
• 申請日: 2014-07-25
• 公開（公告）號: CN104160957A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 吳義師
• 申請（專利權）人: 合肥德美畜牧技術有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種文冠果的無性快繁方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)合子胚的誘導接種：將文冠果果實先用洗衣粉水清洗表面，多次噴洗和擦拭，用滅菌解剖刀將其切開，取出種子放在無菌培養皿內(墊有無菌濾紙)；用滅菌鑷子和解剖刀去除種皮，取出其中的合子胚，切成0.3cm³小塊，接種到含有不同植物生長調節劑6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L的MS培養基中，暗培養；

(2)體細胞胚的繼代與增殖培養：將上述誘導的體細胞胚按照體細胞胚的發育情況，分別進行繼代培養：體細胞胚發育良好的，切離外植體，繼代在不含任何生長調節劑的MS培養基中；體細胞胚不易剝離的，連同外植體一起繼代在其誘導率較高的新鮮培養中；暗培養28d，觀察統計體細胞胚的繼代生長情況；

(3)不定芽的繼代培養：將誘導培養獲得的不定芽按照發育生長情況，分別進行繼代培養：不定芽長勢較好的連同外植體切成5cm³塊小，轉移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鮮培養基中；不定芽長勢較弱的連同外植體切成5cm³小塊，轉移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培養基中；僅有芽點狀突起的外植體，直接轉入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鮮培養基中，繼續進行誘導；

(4)體細胞胚的萌發培養：將外觀形態發育成熟的了葉胚，轉入不加任何植物生長調節劑的1/2MS和MS培養基中進行萌發；

(5)不定芽旳生根培養：選取生長較整齊一致的不定芽，切取2.5cm，接種在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA(0.2-0.4mg/L)和2％蔗糖的1/2MS培養基中誘導生根；

(6)煉苗：選取生根的不定芽，在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的條件下，暗培養。