[發(fā)明專利]金剛烷胺藥物殘留快速檢測試紙條

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410355196.6
• 申請日: 2014-07-24
• 公開（公告）號: CN105301249A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 杜道林;邢海龍;洪霞
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇維賽科技生物發(fā)展有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種檢測金剛烷胺藥物殘留快速檢測試紙條，屬于食品安全快速檢測領(lǐng)域。

技術(shù)背景

金剛烷胺是最早用于抑制流感病毒的抗病毒藥，美國于亞洲感冒流行的1966年批準其作為預(yù)防藥。并于1976年在預(yù)防藥的基礎(chǔ)上確認其為治療藥。該藥對成年患者的療效及安全性已得到廣泛認同。但治療劑量與產(chǎn)生副作用的劑量很接近，對高齡者及有慢性心肺疾病或腎臟疾病者的劑量和給藥計劃很難確定，因此尚未在臨床上推廣應(yīng)用。在日本,金剛烷胺一直作為帕金森病的治療藥，直到1998年才被批準用于流感病毒A型感染性疾病的治療。

金剛烷胺可用于亞洲甲-Ⅱ型流感的預(yù)防和早期治療，與抗菌素合用可治敗血癥和病毒性肺炎，并有退燒作用。也有抗震顫麻痹的作用。適用于原發(fā)性帕金森病、腦炎后的帕金森綜合征、藥物誘發(fā)的錐體外系反應(yīng)、一氧化碳中毒后帕金森綜合征及老年人合并有腦動脈硬化的帕金森綜合征。

根據(jù)其藥理作用，國內(nèi)現(xiàn)在主要將金剛烷胺用于雞、豬流感的預(yù)防和早期治療，及豬傳染性胃腸炎的防治。為避免影響國家動物疫病強制性免疫政策落實,給重大動物疫病防控工作帶來不良后果,農(nóng)業(yè)部發(fā)布《關(guān)于清查金剛烷胺等抗病毒藥物的緊急通知》,規(guī)定除經(jīng)批準生產(chǎn)、使用的疫苗產(chǎn)品外,禁止使用金剛烷胺防治高致病性禽流感等一類病原微生物引起的病毒性疫病。

2005年農(nóng)業(yè)部《關(guān)于清查金剛烷胺等抗病毒藥物的緊急通知》，已將金剛烷胺、金剛乙胺等列入《獸藥地方標準廢止目錄》，明確要求立即停止生產(chǎn)、經(jīng)營和使用，違者按生產(chǎn)、經(jīng)營假獸藥和使用禁用獸藥處理。

2005年中國政府《農(nóng)業(yè)部公告(第560號)》也明確指出，“金剛烷胺類等人用抗病毒藥移植獸用，缺乏科學(xué)規(guī)范、安全有效實驗數(shù)據(jù)，用于動物病毒性疫病不但給動物疫病控制帶來不良后果，而且影響國家動物疫病防控政策的實施。”

2012年11月底被爆出養(yǎng)殖的一只雞從孵出到端上餐桌，只需要45天，是用飼料和藥物喂養(yǎng)的。其中一些不法商販采用金剛烷胺人用藥物，用于抑制禽類的禽流感等病癥。其原因是價格低廉，但如果用量不當(dāng)會導(dǎo)致其在禽類體內(nèi)殘留或禽流感病毒變異，人體食用后會對人體造成傷害。

我國對于動物源性食品中金剛烷胺殘留含量的相關(guān)研究報道屬于空白，也未曾制定或立項過國家標準、行業(yè)標準，國際上也無特定限量要求及相應(yīng)檢測方法。研究食品中金剛烷胺殘留含量的檢測技術(shù)，對于指導(dǎo)進出口食品中金剛烷胺含量控制，有效應(yīng)對日本肯定列表制度，及時消除潛在的出口貿(mào)易障礙，促進相關(guān)行業(yè)拓展國際市場，具有緊迫的現(xiàn)實意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的:研制出特異、敏感、快速、簡便的金剛烷胺藥物殘留快速檢測試紙條。

本發(fā)明的技術(shù)方案:

一種金剛烷胺藥物殘留快速檢測試紙條，底層為支撐層，中間層吸附層固定在支撐層上，外層保護膜固定在吸附層上，吸附層從測試端依次為纖維層，吸附金標抗體纖維層，纖維素膜層及手柄端的吸水材料層，其中在纖維素膜層上有用偶聯(lián)金剛烷胺藥物的載體蛋白溶液印制的直線式檢測印跡，用羊抗或兔抗小鼠IgG溶液印制的直線式對照印跡，檢測印跡和對照印跡平行組合排列為“Ⅱ”。支撐層是用不吸水的硬質(zhì)塑膠片條或硬紙條制成。測試端纖維層用玻璃棉、或尼龍膜、或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜、或聚酚膜制成，優(yōu)選玻璃棉。吸水材料層用吸水紙制成。纖維素膜層用硝酸纖維素膜、或純纖維素膜，或梭化纖維素膜制成。金標抗體纖維層用吸附金剛烷胺藥物的金標抗體玻璃棉，金剛烷胺藥物金標抗體為膠體金標記金剛烷胺藥物的單克隆抗體或多克隆抗體，偶聯(lián)金剛烷胺藥物的載體蛋白溶液為金剛烷胺藥物與載體蛋白偶聯(lián)的復(fù)合溶液。在測試端吸附纖維層、金標抗體纖維層及吸水材料層上覆蓋有保護膜，在測試端纖維層與金標抗體纖維層交界處對應(yīng)的保護膜上印制有樣品標記線，該標記線偏向測試端纖維層一側(cè)約0.5cm處。偶聯(lián)金剛烷胺藥物的載體蛋白為牛血清白蛋白（BSA），或為雞卵清白蛋白（OVA），或為鐵蛋白，或為血藍蛋白。

本發(fā)明的金剛烷胺藥物殘留快速檢測試紙條具有以下優(yōu)點:

(1)特異性強，敏感性高。該試紙條以膠體金標記高親和力的單克隆抗體為基礎(chǔ)制備而成，金標抗體中金顆粒與抗體分子之間無共價鍵形成，二者通過異性電荷間的范德華力相結(jié)合，膠體金標對單克隆抗體特異性和親和力影響很小，且具有較高的標記率。因此，快速檢測試紙條具有較高的特異性和敏感性。

(2)操作簡便、快速。使用本發(fā)明試紙條時無需任何其它試劑，只需滴加100μl左右待檢樣品于樣品墊上，在5分鐘內(nèi)即可判定檢測結(jié)果。