[發明專利]BMPR-1B或PRLR基因SNP位點預測小尾寒羊泌乳量的方法

有效

• 申請號: 201410351937.3
• 申請日: 2014-07-22
• 公開（公告）號: CN104087677A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發明（設計）人: 史洪才;牛志剛;李曉林;袁燕;張寧;賀三剛;張雪梅;黃俊成
• 申請（專利權）人: 新疆維吾爾自治區畜牧科學院中國-澳大利亞綿羊育種研究中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 馮瓊

技術領域

本發明涉及畜牧領域，具體涉及BMPR-1B或PRLR基因SNP位點預測小尾寒羊泌乳量的方法。

背景技術

小尾寒羊是肉裘兼用型綿羊品種，長發育快、早熟、繁殖力強、性能遺傳穩定、適應性強，早熟、多胎、多羔：生長快、體格大肉多、肉質好：小尾寒羊4月齡即可育肥出欄，年出欄率400％以上；體重6月齡可達50千克，周歲時可達100千克，成年羊可達130～190千克。周歲育肥羊屠宰率55.6％，凈肉率45.89％。

小尾寒羊繁殖力極強，兩年三產，不少是一年兩產。據統計小尾寒羊平均產羔率為281.9％，最多一胎可產9羔。由于產羔較多，存在因母乳不夠或者質量較差，造成羔羊死亡，成活率很低的問題，造成較大損失；同時，母羊的泌乳存在個體差異，同樣飼養條件下，同一群體中，同樣的產羔數，有的母羊泌乳量很多，羔羊全部成活，有的母羊泌乳量較少，造成羔羊因饑餓，營養不良、抗病力下降，進而造成死亡或者發育緩慢，達不到斷奶體重，造成羔羊斷奶后營養缺乏死亡，造成較大的經濟損失，在飼養管理水平較低的羊場損失更加嚴重。

在斷奶前三個月，由于產羔較多，母羊的泌乳量成為羔羊成活的最為重要的因素之一。關于家畜的泌乳量的測定及預測，傳統的方法是通過母畜產仔后，通過1-2個泌乳期泌乳量測定和后裔測定來實現的，如奶牛和奶山羊的泌乳測定，通過一個泌乳期每天的泌乳量測定來確定其泌乳能力，以及通過女兒的泌乳量的測定來預測父本的泌乳能力大小。但傳統的方法測定泌乳量，費時費力，只能對過去的選育進行評價，不能很好地預測未來或者剛出生的家畜。

發明內容

本發明的發明目的是提供一種BMPR-1B或PRLR基因SNP位點預測小尾寒羊泌乳量的方法，包括以下步驟：抽提小尾寒羊基因組DNA；擴增含SNP位點BMPR-IB?A746G的序列或含SNP位點PRLR基因E2-C34T的序列；判定BMPR-IB?A746G或PRLR基因E2-C34T突變基因型。

BMPR-IB基因(bone?morphogenetic?protein?receptor1B?BMPR-1B)骨形態蛋白受體1B基因是屬于BMP家族的Ⅰ型受體,存在于許多細胞類型中,主要調節細胞生長和分化。BMPR-1B蛋白首先合成無生物活性的前體蛋白，蛋白水解后形成活性二聚體。活性二聚體再與受體復合物結合導致I型受體磷酸化，I型受體再作用于受體細胞內的Smad1和Smad5并使其磷酸化。Smad1和Smad5被激活后再結合Smad4，該復合物進入細胞核后與PDRII-BF1結合形成一個有活性的轉錄調節復合體，其與特異的啟動基元結合，再作用于下游的因子，從而影響特定基因的轉錄，進而達到參與細胞生理活動的目的。

催乳素受體(prolactin?receptor，PRLR)是催乳素行使功能所必需的。催乳素基因的主要功能是促進哺乳動物個體的乳腺發育、乳汁生成、發動和維持泌乳方面發揮重要作用。例如，PRLR在垂體PRL與乳蛋白基因的信號轉導過程中起核心作用。兩分子PRLR與一分子PRL結合，啟動JAK2/STAT5信號傳導途徑，最終激活反式作用因子STAT5，使其作用于乳蛋白基因啟動子區的靶序列，啟動或增強以乳蛋白基因啟動子為作用元件的靶基因的表達。

發明人對小尾寒羊的BMPR-1B基因研究表明，小尾寒羊中存在BMPR-1B基因A746G突變，并與2個月抽樣8次的泌乳量關聯性研究表明，該突變與小尾寒羊的泌乳量密切相關，小尾寒羊泌乳量呈AA>AG>GG。

對小尾寒羊PRLR基因的研究表明，小尾寒羊PRLR基因第二外顯子34位存在一個C-T突變(記為E2-C34T)，與2個月抽樣8次的泌乳量進行相關性分析，表明該突變與小尾寒羊的泌乳量密切相關，泌乳量呈CT>TT。

同樣飼養條件下，個體泌乳量分泌的差異從根本上講是由控制泌乳的基因造成的，因此，通過我們通過基因與泌乳性能相關性的研究，確定BMPR-1B基因A746G突變和PRLR基因E2-C34T位點與泌乳量大小密切相關，本發明可通過兩個基因兩個SNP檢測就可以預測小尾寒羊的泌乳量大小，從而為生產和育種提供技術支撐。

本發明還提供一種預測小尾寒羊泌乳量的方法，包括以下步驟：抽提小尾寒羊基因組DNA；分別擴增含SNP位點PRLR基因E2-C34T和PRLR基因E2-C34T的序列；判定PRLR基因E2-C34T及PRLR基因E2-C34T突變基因型。