[發明專利]一種加拿大深度抽吸條件下煙草特有亞硝胺的檢測方法

在審

• 申請號: 201410348978.7
• 申請日: 2014-07-22
• 公開（公告）號: CN104122357A
• 公開（公告）日: 2014-10-29
• 發明（設計）人: 張鳳梅;朱瑞芝;司曉喜;何沛;張濤;劉春波;向能軍;申欽鵬;王昆淼;楊光宇;劉志華
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 金耀生

技術領域

本發明屬于分析化學技術領域，涉及一種簡單高效靈敏的煙草特有亞硝胺檢測方法，具體涉及一種加拿大深度抽吸條件下煙草特有亞硝胺的檢測方法。

背景技術

煙草特有亞硝胺(TSNAs)是煙草中N-亞硝胺含量最豐富的一類亞硝胺物質，只存在于煙草、煙草制品和卷煙煙氣中，TSNAs的含量對正確評價吸煙對健康的危害具有重要意義。國際癌癥研究署(IARC)對加拿大政府名單中有害成分的毒性評價結果表明，4-(N-甲基-N-亞硝胺)-1-(3-吡啶基)-丁酮(NNK)和N-亞硝基去甲基煙堿(NNN)純化學成分為可疑的人體致癌成分。為了減少煙草特有亞硝胺對吸煙者和被動吸煙者健康可能的傷害，控制它們在煙草及煙草制品中的含量，已成為一項重要的課題。因此，準確測定煙草及煙草制品中的TSNAs，有助于為正確評價吸煙對健康的危害、推動低危害卷煙的研發提供可靠的依據。目前研究較為深入的TSNAs是N-亞硝基去甲基煙堿(NNN)、N-亞硝基假木賊堿(NAB)、N-亞硝基新煙草堿(NAT)和4-(N-甲基-N-亞硝胺)-1-(3-吡啶基)-丁酮(NNK)。

氣相色譜法1973年就被應用于煙草特有亞硝胺的分析，目前使用的TSNAs測試方法主要依據GB/T23228-2008規定的GC-TEA法，該方法規定了卷煙主流煙氣總粒相物中煙草特有亞硝胺的測定。其主要特點是每個樣品需要捕集20支卷煙的總粒相物，分3次萃取，裝填活化的堿性氧化鋁柱，每個樣品分析時間近30min，每日進樣量不能超過8個。因此，存在前處理復雜、溶劑消耗量大、分析時間長、TEA檢測器不能區分TSNAs和共流出的亞硝胺類化合物、死體積大、檢出限高等問題，不適于大批量樣品的準確測試。

毛友安等在中國專利文獻CN1616962A中提到一種液相色譜-串聯質譜檢測煙草特有亞硝胺的方法。該方法的主要特點是捕集20支卷煙的總粒相物，使用三甲基¹³C₃標記咔啡因作內標，用檸檬酸-磷酸鹽緩沖溶液和環己烷對濾片振蕩共提取，N₂保護下濃縮有機相提取液，加鹽酸酸化，相分離后往水相加堿溶液中和，將水相過反相鍵合固相萃取柱，最后濃縮。該方法因采用三甲基¹³C₃標記咔啡因作內標，故對檢測的目標化合物選擇性不強；有機相和水相萃取溶劑各需30mL，溶劑消耗大；用有機相和水相振蕩共提取，反萃過程的泡沫形成會引起損失和誤差；鹽酸酸化、氫氧化鈉中和、相分離、濃縮等導致前處理復雜；每個樣品分析時間近30min，每日進樣量受到限制。

用機器抽吸測試煙氣釋放量始于20世紀30年代，1936年Bradford首次提出35mL/puff的抽吸容量。1969年，在德國標準局(DIN)的倡議下成立了煙草及煙草制品國際標準化組織，該組織最早開展的工作之一就是建議使用“抽吸容量為35mL，抽吸持續時間為2s，抽吸頻率為1min”的抽吸參數。

1988年，ISO提議制定全球統一的抽吸模式，并委托CORESTA開展必要的研究。CORESTA先后開展了一系列全面的研究，并于1991提出了ISO模式修訂。目前世界各國廣泛使用的ISO4387:2000是ISO4387:1991的修訂版本，是各地區和國家制定相關政策和法規的基礎，但也有個別國家和地區使用其它抽吸模式，比加拿大抽吸模式，具體參數見表1。

表1?ISO和加拿大抽吸模式參數