[發明專利]一種用于檢測HE4的酶聯免疫試劑盒

有效

• 申請號: 201410348798.9
• 申請日: 2014-07-21
• 公開（公告）號: CN105277711B
• 公開（公告）日: 2017-11-21
• 發明（設計）人: 黃若磐;羅樹紅;呂志強;張玉明;方建民
• 申請（專利權）人: 廣州瑞博奧生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司44202
• 代理人: 劉宇峰

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種用于檢測HE4(人附睪蛋白4)的酶聯免疫試劑盒。

背景技術

卵巢癌是婦科常見的惡性腫瘤，也是婦科腫瘤死亡率最高的腫瘤類型，每年約為25％即每四個卵巢癌患者中就有一人死亡。據估計，中國每年每10萬人中就有五人被診斷為新發卵巢癌。卵巢癌通常表現為附件腫塊，因臨床癥狀不明顯，容易造成漏診與誤診。因此，超過70-75％的卵巢癌患者確診時已處于癌癥晚期，并已擴散到其他器官，錯過了最佳治療時機。在女性的一生中，每五位女性就會有一位出現盆腔腫塊，需要接受檢查來排除惡性腫瘤的可能性。近20年來，卵巢癌的5年生存率一直徘徊在較低水平，5年內的復發率高達80％，且復發時間主要集中在治療期的3年內。盡管卵巢癌的預后較差，但如果卵巢癌能被盡早診斷，癌細胞僅在于卵巢內，患者的存活率可以提高到75-95％，極有可能被治愈。因此，卵巢癌的早期診斷和治療監測尤為重要。

目前，卵巢癌的診斷主要依據兩種檢測手段。一種是經陰道超聲檢查(TUV)。這種成像方法可用于檢查女性的生殖器官，包括子宮、卵巢、宮頸及陰道。盡管其應用較為普遍，但是這種方法并不能準確檢測出該腫塊是良性還是惡性。此外，該方法還需要經驗豐富的臨床技師對檢測結果進行解讀。另一種常規檢測方法是檢測生物標志物CA125，這種方法被視為卵巢癌診斷的“金標準”。但是，CA125的特異性及敏感度較低，容易出現假陰性或假陽性。大約50％的卵巢癌I期患者并沒有CA125水平升高的現象，也就是說有一半的卵巢癌患者可能被漏診。某些良性卵巢疾病也會導致CA125水平升高，造成假陽性。因此，在臨床診斷上亟需一種更好的診斷工具以盡早診斷卵巢癌。

人附睪蛋白4，即HE4是1991年在人的附睪中被偶然發現的。1999年，發 現HE4在卵巢癌組織中呈過度表達。2002年，證實HE4可以作為卵巢癌的血清標志物，2007年通過了試劑研發。2008年研究證明HE4可以作為卵巢癌的檢測，并在同年通過了美國FDA的批準。2011年，FDA通過批準了ROMA(惡性風險計算方法)指數，用來分析卵巢癌的風險評估。HE4水平與年齡有關，年齡越大它的水平就越高。健康女性的HE4在140以下，大約98％的女性HE4水平是低于140的。HE4在卵巢癌病例中是高水平表達，顯著升高者80％以上都是卵巢癌。HE4水平與疾病進展有關。如果HE4指標明顯增加，說明這個疾病有進展。HE4水平還可反映化療效果。HE4指標增加，顯示疾病進展，如果指標下降了，說明疾病在緩解，治療產生了效果。HE4也可以反映手術效果。絕大部分患者術后HE4都下降了，有一些人甚至下降90％以上。如果術后隨訪中發現HE4水平下降以后再上升，則提示腫瘤可能復發，所以說HE4也是腫瘤早期復發的一個檢測指標。

人附睪蛋白4(HE4)是一種新的腫瘤標志物。正常生理情況下，HE4在人體中有非常低水平的表達，但在卵巢癌組織和患者血清中均高度表達，可用于卵巢癌的早期診斷、鑒別、治療監測及預后評估。88％的卵巢癌患者都會出現HE4升高的現象。與CA125相比，HE4的敏感度更高、特異性更強，尤其是在疾病初期無癥狀表現的階段。疾病早期HE4診斷的敏感度是82.7％，而CA125卻僅有45.9％。與CA125僅20％的特異性相比，HE4的特異性高達99％。這意味著，臨床醫生對HE4的檢測結果更具信心。僅僅憑借CA125的檢測結果診斷卵巢癌時，10位女性中可能有8位會被誤診。HE4與CA125是相互補充的標志物，兩者聯合應用，敏感性可增加到92％，能將假陰性結果減少30％，大大增加了卵巢癌診斷的準確性。此外，對卵巢癌患者進行HE4定量檢測，還可幫助監測疾病狀態、反映治療療效并早期發現癌癥復發，有重要的參考價值。多數卵巢癌HE4和CA125會同時升高，但有些卵巢癌只出現單一腫瘤標志物的升高。因此，兩者聯合使用，可避免單一應用的陰性結果造成疾病復發監測的漏診。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于檢測HE4(人附睪蛋白4)的酶聯免疫試劑盒。

本發明所述的一種用于檢測HE4的酶聯免疫試劑盒，包括酶標板、標本稀釋液、包被抗體、檢測抗體、檢測抗體稀釋液、標準品、洗滌液、底物、終止液；其中，包被抗體為由保藏編號為CCTCC NO:C201472的雜交瘤細胞株HE4-2B8分泌的抗HE4單克隆抗體；檢測抗體為已標記HRP的抗HE4多克隆抗體。