[發明專利]一種預防禽流感病毒感染的新型血凝素抗原的制備及應用

有效

• 申請號: 201410345277.8
• 申請日: 2014-07-21
• 公開（公告）號: CN104711291B
• 公開（公告）日: 2018-09-11
• 發明（設計）人: 喬素梅
• 申請（專利權）人: 寧波欣安醫療科技有限公司
• 主分類號: C12N15/866
• 分類號: C12N15/866;C12N7/04;A61K39/145;A61P31/16
• 代理公司: 寧波高新區核心力專利代理事務所(普通合伙) 33273
• 代理人: 涂蕭愷

本發明公開了一種預防禽流感病毒感染的新型血凝素抗原的制備及其應用，特點是包括以下步驟：(1)制備含有H10基因的穩定的重組桿狀病毒(rBV)；(2)Sf9細胞表達H10的SVP；(3)SVP的純度和穩定性，該H10重組血凝素可用于預防禽流感H10N8的感染，免疫人或動物以產生抗體和保護作用，與針對H10N8或H10血凝素的抗體發生反應，優點是具有高效、低成本的特點，可用于預防H10N8禽流感病毒的感染，另外此重組血凝素在昆蟲細胞中表達，不依賴于雞胚，很容易進行工藝放大和規模化生產。

技術領域

本發明涉及一種血凝素抗原的制備，尤其是涉及一種預防禽流感病毒感染的新型血凝素抗原的制備及應用。

背景技術

禽流感和季節性流感是困擾世界的問題。最新流行的H10N8禽流感病毒對人的感染是亟待解決的問題。

大流感是比季節性流感更為嚴重的疾病。比如1918年“西班牙”大流感造成了世界范圍內4千萬到1億人的死亡。2009-2010年的H1N1豬流感在世界范圍內迅速蔓延，并被WHO定義為21世紀第一起大流感。高致病禽流感(HPAI)病毒可能造成未來的大流感。比如，逐漸增加的H5N1禽流感病毒感染病例也顯示出了造成大流感的可能。其它潛在的可能造成大流感的還有曾經感染過人的H7N2和H9N2禽流感病毒。2013年3月，華東地區曾爆發了H7N9大流行，造成嚴重的疾病和死亡現象。尚無可預防新型的H10N8禽流感病毒的疫苗。H10N8禽流感病毒，是一種新型的禽流感病毒類型，首次發現病例是在江西省，甲型流感依據流感病毒特征可分為HxNx(H為血凝素蛋白，N為神經氨酸酶蛋白)共140余種亞型，目前，國內外還沒有公開任何關于預防H10N8禽流感病毒感染的新型血凝素抗原的制備及應用的相關研究報道。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種可用于預防H10N8禽流感的預防禽流感病毒感染的新型血凝素抗原的制備及應用

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種預防禽流感病毒感染的新型血凝素抗原的制備，包括以下步驟：

(1)制備含有H10基因的穩定的重組桿狀病毒(rBV)；

(2)從Sf9細胞中分離H10重組血凝素的重組流感亞病毒顆粒SVP；

(3)重組流感亞病毒顆粒經NP40表面活性劑處理后采用離子交換和分子篩層析純化。

上述預防禽流感病毒感染的新型血凝素抗原的應用，該H10重組血凝素可用于預防禽流感H10N8的感染，免疫人或動物以產生抗體和保護作用，與針對H10N8或H10血凝素的抗體發生反應。

與現有技術相比，本發明的優點在于：

本發明首次成功制備了包含潛在的大流感病毒H10N8的血凝素蛋白H10SVP，對于H10N8流感病毒有免疫原性，是由H10凝血素組成的全新重組流感亞病毒顆粒(SVP)疫苗。總地來說，SVP是由細胞培養(昆蟲或其它細胞)中分離出來的納米顆粒，是由血凝素(HA)蛋白分子組成的。與流感類病毒顆粒不同，我們的SVP不含有NA、M1或其它需要用來制備類病毒顆粒的蛋白，由H A組成的多個分子集合。SVP代表球形或多晶結構，僅有脂類和以天然狀態存在的HA分子。SVP能夠誘導和VLP相似的免疫反應。該SVP通過sf9昆蟲細胞膜形成穩定的結構，具有高效、低成本的特點，可用于預防H10N8禽流感病毒的感染。另外此重組血凝素在昆蟲細胞中表達，不依賴于雞胚，很容易進行工藝放大和規模化生產。

附圖說明

圖1為H10重組血凝素組成的亞病毒顆粒示意圖；

圖2為電鏡下的H10重組血凝素的亞病毒顆粒照片。

具體實施方式

以下結合附圖實施例對本發明作進一步詳細描述。

一、具體實施例