[發(fā)明專利]一種利用四倍體植株與二倍體植株雜交育種法培育三倍體霍山石斛的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410343441.1
• 申請日: 2014-07-18
• 公開（公告）號: CN104396722B
• 公開（公告）日: 2017-03-08
• 發(fā)明（設計）人: 鄧輝;陳存武;陳乃富;張莉;戴軍
• 申請（專利權）人: 皖西學院
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02
• 代理公司: 合肥市浩智運專利代理事務所(普通合伙)34124
• 代理人: 丁瑞瑞

1.一種利用四倍體植株與二倍體植株雜交育種法培育三倍體霍山石斛的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)優(yōu)選出抗逆性好、生長快、莖稈粗、莖高長、分蘗多、纖維含量低、藥效成分含量高的不同產(chǎn)地的霍山石斛品種作為多倍體培育的源植株親本；

(2)對不同品種源植株種子在固體培養(yǎng)基中進行無菌播種，獲得2倍體原球莖；

(3)制備不同品種2倍體原球莖的原生質(zhì)體，進行細胞原生質(zhì)體融合，并培養(yǎng)成愈傷組織；

(4)對檢測出的四倍體愈傷組織進行誘導分化，獲得四倍體植株幼苗；

(5)對四倍體植株幼苗進行常規(guī)煉苗馴化和栽培至開花；

(6)把四倍體植株與二倍體植株人工授粉雜交，結(jié)實，即得三倍體霍山石斛種子；(7)對三倍體種子無菌播種、培養(yǎng)，獲得大量三倍體幼苗。

2.根據(jù)權利要求1所述的利用四倍體植株與二倍體植株雜交育種法培育三倍體霍山石斛的方法，其特征在于：步驟(1)中所述霍山石斛為分布在大別山山系的不同產(chǎn)地具有優(yōu)良性狀的品種，其中高緯度、高海拔地區(qū)的品種具有抗逆性強、莖稈粗、藥效成分含量高的特點，低緯度、低海拔地區(qū)的品種具有生長速度快、莖高長、分蘗多、纖維含量低的特點。

3.根據(jù)權利要求1所述的利用四倍體植株與二倍體植株雜交育種法培育三倍體霍山石斛的方法，其特征在于：步驟(2)中所述培養(yǎng)為在固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，適合誘導愈傷組織的培養(yǎng)基均可，優(yōu)選大量元素減半的1/2MS培養(yǎng)基，調(diào)整蔗糖濃度為5%-8%，優(yōu)選添加10-15%的椰乳，2,4-D?0.2-2.0?mg/L,?NAA?0.2-2.0?mg/L；培養(yǎng)溫度在25-18℃的晝夜溫差范圍內(nèi)，光照時間10-12小時，光照強度2000-3000Lux，色溫在4500-5500k。

4.根據(jù)權利要求1所述的利用四倍體植株與二倍體植株雜交育種法培育三倍體霍山石斛的方法，其特征在于：步驟(3)中所述原生質(zhì)體的制備方法優(yōu)選酶解法制備，原生質(zhì)體融合辦法優(yōu)選電擊融合法。

5.根據(jù)權利要求1所述的利用四倍體植株與二倍體植株雜交育種法培育三倍體霍山石斛的方法，其特征在于：步驟(4)中所述四倍體為異源雙二倍體或同源雙二倍體；所述檢測染色體倍數(shù)為常規(guī)染色鏡檢辦法，選取染色體數(shù)目2n=4x=76的幼苗，是培育成功的四倍體。

6.根據(jù)權利要求1所述的利用四倍體植株與二倍體植株雜交育種法培育三倍體霍山石斛的方法，其特征在于：步驟(6)中所述四倍體植株與二倍體植株在花期人工授粉雜交，四倍體植株與二倍體植株可以互為父本和母本。

7.權利要求1-6中任何一項所述培育方法得到的三倍體霍山石斛。