[發明專利]一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法

有效

• 申請號: 201410341978.4
• 申請日: 2014-07-18
• 公開（公告）號: CN104177506A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 龐小博;史先敏
• 申請（專利權）人: 上海天嵩生物科技有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P37/04;A61P35/00
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明涉及一種生物領域中的一種菌絲體多糖，具體涉及一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法。

背景技術

中華被毛孢發酵菌絲又稱為蟲草發酵菌絲Cs-C-Q80或蝙蝠蛾被毛孢菌絲體，為真正冬蟲夏草菌。其菌絲體含有較高含量的多糖，此多糖在保健食品、醫藥等領域具有重要的作用，但目前對該蝙蝠蛾中華被毛孢菌絲體中的多糖提取方法存在不足使得多糖的提取率較低。

發明內容

本發明的目的是提供一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，該方法是一種簡便、高效、成本低、多糖得率及含量高，且適合規模化生產的方法，克服了現有技術中的一些不足。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現：

一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

S1：中華被毛孢菌絲體多糖的提取：步驟S1中，中華被毛孢菌絲體多糖的提取的具體方法為：以中華被毛孢菌絲體為原料，超微粉碎為粉末，加入到15-20倍原料重量的水中，常溫浸泡30-60分鐘，再加熱至沸騰，保持微沸60-120分鐘后離心；分離沉淀和上清液，取沉淀并按上述步驟重復再提取1～2次，取每次離心分離后的上清液并合并，即為中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液；

S2：濃縮：將步驟S1中中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液進行減壓蒸餾，濃縮至液體和原料的比例(質量/體積)為4∶1～2∶1時為止，得到濃縮液；

S3：沉淀：向步驟S2中所述的濃縮液中緩慢加入乙醇，邊加邊攪拌，所述乙醇加至乙醇含量達到70％-80％時停止，然后室溫靜置12-18小時，離心，棄上清液，收集沉淀；

S4：干燥：向步驟S3中所述的沉淀中加水溶解，加熱除去乙醇，然后進行冷凍干燥，即得中華被毛孢菌絲體多糖，得率大于20％。

進一步優選地，步驟S1中，將所述中華被毛孢菌絲體超微粉碎至粒徑為10μm的超細粉末。

進一步優選地，步驟S1中，常溫浸泡后再加熱至沸騰，保持微沸90-105分鐘。

進一步優選地，步驟S1中，所述離心的時間為20min。

進一步地，步驟S2中，將中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液濃縮至液體和原料的比例(質量/體積)為2∶1時為止。

進一步地，步驟S3中，所述乙醇為無水乙醇。

本發明提供了一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，其主要具有的有益效果為：該制備方法通過超微粉碎來破壞細胞壁再經過一些列的提取過程，得到的粗多糖得率高，且純多糖的得率超過20％；該多糖對RAW264.7巨噬細胞株釋放NO有明顯的促進作用；此外，該方法是一種簡便、高效、成本低且適合規模化生產的方法。

附圖說明

下面根據附圖對本發明作進一步詳細說明。

圖1是本發明實施例所述的中華被毛孢菌絲體多糖的高效液相色譜圖。

具體實施方式

本發明實施例所述的一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，下面以具體實驗案例為例來說明具體實施方式，應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明，此外，本發明所述的中華被毛孢菌絲體多糖均指蝙蝠蛾中華被毛孢菌絲體多糖。

實施例1

中華被毛孢菌絲體多糖的提取：以中華被毛孢菌絲體為原料，通過超微粉碎將顆粒細度粉碎為粒徑10μm的超細粉末，通過超微粉碎后，稱取50g超微粉碎后的粉末，再加入1000mL蒸餾水，常溫浸泡60分鐘，加熱至沸騰，保持微沸120分鐘，8000g離心20min；分離沉淀和上清液，取沉淀并按上述步驟重復再提取1次，即在該沉淀中加蒸餾水、常溫浸泡、加熱至沸騰，保持微沸后離心，取上清液，合并兩次離心所得的上清液，即為中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液。

中華被毛孢菌絲體多糖粗提液的濃縮：將上述的中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液于旋轉蒸發儀中減壓濃縮至100mL，得濃縮液。

乙醇沉淀：向上述濃縮液中緩慢加入無水乙醇，邊加邊攪拌，至乙醇含量達到70％時，室溫靜置12小時，離心除去乙醇上清液，收集沉淀。

干燥：沉淀加70mL水溶解，水浴鍋上揮去乙醇，置于-20℃冰箱中凍存12h后放入冷凍干燥機中冷凍干燥，即得中華被毛孢菌絲體多糖，該多糖為含有微量雜質的粗多糖；中華被毛孢菌絲體多糖的得率為20.91％。

實施例2