[發明專利]一種高效提取深層液態發酵生產安絡小皮傘菌絲體多糖的方法

有效

• 申請號: 201410337924.0
• 申請日: 2014-07-15
• 公開（公告）號: CN104087635B
• 公開（公告）日: 2017-01-04
• 發明（設計）人: 王文風;徐國華;徐玲;王英燕;張芙蓉;楊亞威;高巖
• 申請（專利權）人: 江蘇神華藥業有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/04
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司32218
• 代理人: 徐冬濤,傅婷婷

1.一種安絡小皮傘菌絲體多糖的提取方法，其特征在于該方法包括下述步驟：

1)分離：將安絡小皮傘發酵液經分離，得到安絡小皮傘上清液和濕菌絲體；

2)超聲處理：向步驟1)所得的濕菌絲體中加入步驟1)所得2-5倍質量的安絡小皮傘上清液進行稀釋，攪拌均勻后進行超聲處理10-40min，得到超聲處理液；

3)復合酶解：將步驟2)所得超聲處理液調節pH值為4-7，控制溫度30-70℃，然后向其加入相當于干菌絲體重量0.2-3％的纖維素酶、0.2-3％的蛋白酶，進行酶解1-4h，得到酶解液；

4)分離、濃縮：將步驟3)所得的酶解液進行離心分離，將分離所得到的上清液經低溫濃縮，得到濃縮比重為1.25～1.40的濃縮漿；

5)醇沉、烘干：加入濃縮漿重量3-5倍量的95％酒精，至混合液酒精度為65-80％(v/v)，靜置2-6h，將沉淀物進行真空烘干；烘干至干燥物水分含量為3～8％，即得菌絲體多糖提取物。

2.根據權利要求1所述的安絡小皮傘菌絲體多糖的提取方法，其特征在于所述的分離為離心分離，轉速控制在1500-5000rpm。

3.根據權利要求1所述的安絡小皮傘菌絲體多糖的提取方法，其特征在于所述的纖維素酶酶活為15000μ/g～25000μ/g，所述的蛋白酶的單位酶活為47000μ/g～53000μ/g。

4.根據權利要求1所述的安絡小皮傘菌絲體多糖的提取方法，其特征在于步驟4)所述的低溫濃縮過程均要求控制溫度不高于75℃，真空度不低于0.085Mpa。

5.根據權利要求1所述的安絡小皮傘菌絲體多糖的提取方法，其特征在于步驟5)所述的真空烘干的溫度控制在50-75℃，真空度不低于0.085Mpa。