[發明專利]大黃梔子素A及其制備方法和在藥物上的應用

有效

• 申請號: 201410335802.8
• 申請日: 2014-07-15
• 公開（公告）號: CN104610207B
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 高原;程學蓮;魏國柱;任福才;海萍;王飛
• 申請（專利權）人: 云南西力生物技術股份有限公司
• 主分類號: C07D307/77
• 分類號: C07D307/77;A61K31/365;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種新的化合物大黃梔子素A，其制備方法，以該化合物為活性成分的藥物組合物，以及該化合物及其藥物組合物在制備治療和預防腫瘤的藥物方面的應用。

背景技術

所有腫瘤的形成都是從機體的基本單元細胞開始的。機體由各種類型的細胞構成，細胞通過受控的生長和分裂來維持機體的正常功能，當正常細胞衰老或功能受損時，就會誘發死亡并被新生細胞替代。一旦細胞內的遺傳物質遭到破壞或發生改變，形成基因突變，就可能影響正常細胞的生長、分裂和凋亡程序，導致異常細胞在機體所不需要的地方持續生長，形成腫瘤。

對腫瘤的治療手段主要包括外科手術、放射療法、化學療法。近年隨著納米分子醫學和分子生物學技術的突飛猛進，腫瘤發生機制的闡述、抗腫瘤靶點的尋找、新型抗腫瘤藥物的開發以及治療手段的創新和綜合運用都有了長足的進步，腫瘤患者生存時間明顯延長。但是，嚴重威脅人類生命健康的占惡性腫瘤90％以上的實體瘤的治療尚未達到滿意的療效，仍有大量腫瘤患者因對治療無反應或耐藥而最終導致治療失敗。因此，發現并開發新型抗腫瘤藥物仍然是人類長期必須面對的重要問題。

迄今，現有技術中沒有含有式(I)化合物大黃梔子素A作為有效成分在治療和預防腫瘤方面的報道，也沒有該化合物具有抗腫瘤活性的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新的具有藥用價值的大黃梔子素A。

本發明的另一目的是提供一種從大黃梔子(Gardenia sootepensis)植物莖葉中提取本發明化合物的方法。

本發明的進一步目的是提供一種以式(I)化合物為活性成分的用于治療和預防腫瘤的藥物組合物，及該化合物和組合物在制備治療和預防腫瘤的藥物方面的應用。

為了實現上述目的，本發明提供了如下技術方案：

用于治療和預防腫瘤的藥物，其中含有治療和預防腫瘤有效量的式(I)化合物及可藥用載體和/或賦形劑。

本發明化合物大黃梔子素A可以轉化為藥學上可接受的衍生物，如雙鍵可以采用文獻方法還原，也可進行氫鹵化。α,β-不飽和酮可通過麥克爾加成反應(Michael reaction)引入含4～10個碳的鏈。

本發明化合物用作藥物上時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。該藥物組合物含有0.1～99％，優選為0.5～90％的本發明化合物，其余為藥物學上可接受的鹽，或對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。

所述的藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料以及藥物制品輔劑。將所述的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發明的藥物可經口服和注射(靜注、肌注)兩種形式給藥。

口服可用其固體或液體制劑，如粉劑、片劑、糖衣劑、膠囊、溶液、糖漿、滴丸劑等。

注射可用其固體或液體制劑，如粉針劑、溶液形注射劑等。

為了更好地理解本發明的實質，下面將用本發明的式(I)化合物的生物活性結果來說明它在醫藥領域中的應用。

MTT法細胞活性檢測：

MTT全稱為3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide，是一種黃顏色的染料。活細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶能夠代謝還原MTT，同時在細胞色素C的作用下，生成藍色(或藍紫色)不溶于水的甲臜(Formazan)，甲臜的含量可以用酶標儀在570nm處進行測定。在通常情況下，甲臜生成量與活細胞數成正比，因此可根據光密度OD值推測出活細胞的數目。

實驗方法：

1.接種細胞：用含10％胎牛血清的培養液(DMEM或者RMPI1640)配成單個細胞懸液，以每孔10000-20000個細胞接種到96孔板，每孔體積100μl，貼壁細胞提前12小時接種培養。

2.加入待測化合物溶液(固定濃度40μM初篩，在該濃度對腫瘤細胞生長抑制在50％附近的化合物設5個濃度進入梯度復篩)，每孔終體積200μl，每種處理均設3個復孔。

3.顯色：37攝氏度培養48小時后，每孔加MTT溶液20μl。繼續孵育4小時，終止培養，小心吸棄孔內培養上清液100μl以避免細胞丟失，每孔加20％的SDS100μl，過夜孵育(溫度37℃)，使結晶物充分融解。