[發明專利]一種葉酸定量檢測裝置及其制備方法和其在葉酸定量檢測中的應用

有效

• 申請號: 201410335047.3
• 申請日: 2014-07-15
• 公開（公告）號: CN104198565B
• 公開（公告）日: 2017-01-04
• 發明（設計）人: 江旭恒;陳勇;高逵;胡道盼;王蒙;周敏;王歡歡;周潔
• 申請（專利權）人: 上海應用技術學院
• 主分類號: G01N27/416
• 分類號: G01N27/416;G01N1/28;B01J41/10;C08J3/09;C08L27/06
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司31001
• 代理人: 吳寶根,馬文峰

技術領域

本發明涉及一種葉酸定量檢測裝置及其制備方法和其在葉酸定量檢測中的應用，屬液/液界面電化學領域和電化學膜傳感器裝置應用領域。

背景技術

葉酸（folic?acid,?FA）為蝶呤衍生物，屬于水溶性B族維生素。亦稱蝶酰谷氨酸，是機體細胞生長和繁殖的必需物質，其分子式為C₁₉H₁₉N₇O₆，分子量為441.40。葉酸對人體的精神健康有重要作用，作為主要一碳單位供體，葉酸參與核酸、氨基酸、蛋白質的生物合成。葉酸主要用于各種原因引起的葉酸缺乏以及葉酸缺乏引起的巨幼紅細胞性貧血的治療，惡性貧血的輔助治療，以及妊娠期、哺乳期婦女的預防給藥。由于葉酸具有這些特殊的生理功能，特別是對妊娠期、哺乳期婦女和胎兒，葉酸經常作為營養強化劑用于保健藥品中，因此，如何測定這些藥品中的葉酸含量，以監控這些藥品的質量就變得尤為重要。

目前，國內外關于葉酸檢測的裝置和方法都比較復雜，主要分為電化學方法和非電化學方法。非電化學方法一般有微生物法、高效液相色譜法、酶聯免疫法法和熒光分光光度法。微生物法操作繁瑣，容易造成交叉感染，重現性不好。高效液相色譜不僅儀器昂貴而且管路容易腐蝕，長期測定容易造成設備的損壞。酶聯免疫法檢測結果與實際數值出入較大，而且長期使用成本較高。熒光分光光度法回收率低于規定范圍，不能用于實際檢測。電化學方法主要集中于利用修飾電極的固∕液界面電化學，但是這些修飾電極制作過程往往涉及一些劇毒性物質或貴重金屬，而且多次使用修飾電極容易損耗，具有不利于人體健康，成本較高和不能重復利用等缺點。基于上述問題，開發一種制備簡單、操作易行和成本低廉的葉酸定量檢測裝置，同時利用該葉酸定量檢測裝置對于葉酸定量檢測結果重現性好、靈敏度高、回收率高的葉酸檢測方法就尤為重要。

發明內容

本發明的目的之一是為了解決現有技術中葉酸定量檢測裝置中所存在的操作繁瑣、容易損壞、成本較高等技術問題而提供一種葉酸定量檢測裝置，該裝置具有制備簡單、操作易行和成本低廉等特性。

本發明的目的之二在于提供上述的一種葉酸定量檢測裝置的制備方法。

本發明的目的之三在于提供一種利用上述的葉酸定量檢測裝置進行葉酸定量檢測的方法，該檢測方法具有很高的靈敏度、精密度、準確度和回收率而且使用壽命長，重現性好。

本發明的技術原理

多孔膜支撐的液/液界面電化學因其有增強傳質，擴大電化學信號和提高電分析化學靈敏度等優點，近幾年廣泛用于生物大分子和藥物分子檢測。液/液界面上有機凝膠結合溶出伏安技術的使用，使得一些生物大分子和藥物分子的檢測限大大降低至亞微摩爾級別。根據多孔膜支撐的液/液界面電化學方法檢測葉酸。針對現有技術中存在的問題，利用含有離子型表面活性劑（CTAB）的MCM-41型有機/無機復合介孔膜對陰離子具有離子交換功能結合有機凝膠的預富集功能大大提高了葉酸的檢測限，實現了葉酸的痕量分析與檢測。

本發明的技術方案

一種葉酸定量檢測的裝置，包括水相池和油相池；油相池置于水相池的中上部，水相池可以通過升降裝置上下移動；

所述的水相池包括上端開口的容器、水相鉑絲對電極Ⅱ，水相參比電極Ag/AgCl;

所述的油相池包括有機凝膠電化學傳感器、油相鉑絲對電極Ⅰ，油相參比電極Ag/AgCl；

所述的有機凝膠電化學傳感器為底部粘有MCM-41型有機/無機復合介孔膜而上部開口的中空管，且中空管中自底向上依次裝有有機凝膠、混合溶液；

所述的上部開口的中空管的材質為石英；

有機凝膠的體積占整個中空管體積的10-20％，混合溶液的體積占中空管體積的30-80％;

所述的混合溶液為濃度為10mol﹒L^-1的雙（三苯基膦）氯化銨)水溶液和濃度為0.1mol﹒L^-1的NaCl水溶液按體積比計算，即10mol﹒L^-1的雙（三苯基膦）氯化銨)水溶液：0.1mol﹒L^-1?的NaCl水溶液為5:6的比例混合而成；

所述的有機凝膠通過如下步驟的方法制備而成：

將1,6-二氯己烷和有機相支持電解質于40-60℃油浴中加熱10-50min，然后加入平均分子量為22000的聚氯乙烯，緩慢升溫至70-90℃,待溶液呈透明狀態后，控制溫度為65-85℃，恒溫攪拌10-50min，即得有機凝膠；