[發明專利]糞便樣品穩定液及制備方法與應用有效
| 申請號: | 201410334771.4 | 申請日: | 2014-07-15 |
| 公開(公告)號: | CN104073564B | 公開(公告)日: | 2020-07-10 |
| 發明(設計)人: | 岳漢軍;陳一友;呂寧 | 申請(專利權)人: | 杭州諾輝健康科技有限公司 |
| 主分類號: | A01N1/02 | 分類號: | A01N1/02;C12Q1/6806;C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京坤瑞律師事務所 11494 | 代理人: | 封新琴 |
| 地址: | 310000 浙江省杭州市濱江*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 糞便 樣品 穩定 制備 方法 應用 | ||
本發明涉及分子生物學領域,公開了一種糞便樣品穩定液,穩定液中成分如下:0.02M?4M硫氰酸胍(Guanidine thiocyanate)、pH=5?10且濃度為2?20M的Tris?HCI、0.05?0.1mM NaCI、1?15mM EDTA。本發明可有效保持糞便樣品中被檢測成分的穩定性,使病人在家中自助樣品提取成為可能,該糞便穩定液不會有礙下游檢測(核酸提取和檢測),糞便和穩定液的混合物可以直接進入檢測流程,極大地方便了糞便樣品的后續處理流程靈活性,有助于消化系統疾病的檢測和治療。
技術領域
本發明涉及分子生物學領域,尤其涉及了一種糞便樣品穩定液。
背景技術
目前,醫院或體檢中心的糞便化驗,樣品因不穩定而不能保存,必須立即送檢。這給病人造成了一定的不便,給醫護人員增加了工作負擔,同時,也給檢測實驗室也增加了運作和及時提供結果的難度。因此病人配合提供樣品的比例下降,使后續相關的醫療手段的有效性也受到影響。
發明內容
本發明的目的是提供一種能夠有效保持糞便樣品中被檢測成分的穩定性,無毒或腐蝕成分,不妨礙下游檢測,操作安全方便的糞便樣品穩定液。
為了解決上述技術問題,本發明通過下述技術方案得以解決:
一種糞便樣品穩定液,所述的穩定液由Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硫氰酸胍(Guanidine thiocyanate)、乙二胺四乙酸(EDTA)、氯化鈉及水組成;所述硫氰酸胍的終濃度為0.02M-4M,Tris的終濃度為2-20mM,氯化鈉的終濃度為0.05-0.1mM、乙二胺四乙酸的終濃度為1-15mM。
上述糞便樣品穩定液的制備方法如下:
將Tris溶于水中,用鹽酸調節pH為5-10,制得Tris-HCI溶液;將乙二胺四乙酸溶于水,用鹽酸調節pH為5-10,制得EDTA溶液;將氯化鈉溶于水中,并加入硫氰酸胍、Tris-HCI溶液、EDTA溶液混合后,殺菌,得到糞便樣品穩定液。
取按照上述配比配制的糞便樣品穩定液,加入與穩定液等體積的糞便樣品,混勻;控制溫度在50攝氏度以內,保存。
本發明由于采用了以上技術方案,具有顯著的技術效果:
本發明可有效保持糞便樣品中被檢測成分的穩定性,使病人在家中自助樣品提取成為可能,該糞便穩定液不會有礙下游檢測(核酸提取和檢測),糞便和穩定液的混合物可以直接進入檢測流程,極大地方便了糞便樣品的后續處理流程靈活性,有助于消化系統疾病的檢測和治療。
附圖說明
圖1是實施例1糞便樣品與穩定液混合并提取核酸后,熒光實時PCR檢測其中肌動蛋白基因(Actin)的曲線圖。
具體實施方式
下面結合附圖1與實施例對本發明作進一步詳細描述:
實施例1
配制糞便樣品穩定液,配方如下:
0.02-4M硫氰酸胍(Guanidine thiocyanate),2-20mM Tris-HCI(pH=5-10),0.05-0.1mMNaCI,1-15mM EDTA。
其制備方法如下:
將Tris溶于水中,用鹽酸調節pH為5-10,制得Tris-HCI溶液;將乙二胺四乙酸溶于水,用鹽酸調節pH為5-10,制得EDTA溶液;將氯化鈉溶于水中,并加入硫氰酸胍、Tris-HCI溶液、EDTA溶液混合后,殺菌,得到糞便樣品穩定液。
取配制好的糞便樣品穩定液,加入與穩定液等體積的糞便樣品,混勻;控制溫度在50攝氏度以內,保存。
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