[發明專利]針對TGFβ的抗體

有效

• 申請號: 201410331821.3
• 申請日: 2006-02-08
• 公開（公告）號: CN104177497B
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: 史蒂文·R·萊德貝特;西莉亞·P·哈特;羅伯特·G·霍爾蓋特;盧茨·U·杰爾穆圖斯;卡特里昂納·L·布坎南;亞歷山大·R·鄧肯;唐訥·K·芬奇
• 申請（專利權）人: 根茨美公司;奧普泰恩公司
• 主分類號: C07K16/22
• 分類號: C07K16/22;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00;C12N5/0783;A61P13/12;A61P1/16
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所11038
• 代理人: 傅宇昌

本申請是申請日為2006年2月8日、申請號為200680008838.9、發明名稱為“針對TGFβ的抗體”的發明專利申請的分案申請。

技術領域

本發明涉及抗體分子，特別是結合轉化生長因子β(TGFβ)的抗體分子，及其用途。更具體而言，本發明涉及結合且優選中和TGFβ1、TGFβ2和TGFβ3的抗體分子，即所謂的“泛特異性”抗體分子，以及此類抗體分子的用途。

背景

TGFβ在1981年首次被鑒別(Roberts等人，1981)。在人類中存在3種同種型：TGFβ1、TGFβ2和TGFβ3(Swiss Prot登錄號分別為P01137、P08112和P10600)，在其生物活性狀態下，它們是25kDa同型二聚體，包括兩個通過鏈間二硫橋連接的具有112個氨基酸的單體。TGFβ1與TGFβ2的不同在于27，并且與TGFβ3的不同在于22，主要是保守性氨基酸改變。這些差異已在通過X射線晶體學測定的TGFβ3D結構上作圖(Schlunegger等人，1992；Peer等人，1996)，并且已確定受體結合區域(Griffith等人，1996；Qian等人，1996)。

人TGFβs非常類似于小鼠TGFβs：人TGFβ1與小鼠TGFβ1只有1個氨基酸的差異，人TGFβ2與小鼠TGFβ2只有3個氨基酸的差異，并且人TGFβ3與小鼠TGFβ3相同。因此，在小鼠(包括轉基因小鼠)中生產針對人TGFβs的抗體是困難的。

TGFβs是參與細胞增殖和分化、胚胎發育、細胞外基質形成、骨發育、傷口愈合、血細胞生成以及免疫和炎癥應答的多功能細胞因子(Border等人，1995a)。TGFβs的失調導致病理過程，這些病理過程在人中已牽涉眾多病狀，例如出生缺陷、癌癥、慢性炎癥、自身免疫和纖維化疾病(Border等人，1994；Border等人，1995b)。

在許多纖維化動物模型中已使用中和抗體作為拮抗劑進行了研究(Border等人，1995b；Border等人，1994)，例如腎小球腎炎(Border等人，1990)、神經瘢痕化(Logan等人，1994)、皮膚瘢痕化(Shah等人，1994)和肺纖維化(Giri等人，1993)。這些模型代表的所有疾病代表了未滿足的對新型治療產品的需要(Bonewald，1999；Jackson，1998)。然而，在這些及其他動物研究中使用的抗體已在動物中產生，并且它們在人中的治療益處可能是有限的，因為其具有誘導免疫原性應答的可能性以及其具有快速的藥物代謝動力學清除(Vaughan等人，1998)。對于治療TGFβ介導的疾病，人抗體是更希望的。

已知各種抗體片段能夠特異地并且以良好的親和力結合靶蛋白。例如，只包含通過短肽連接體連接在一起的重鏈可變結構域(VH)和輕鏈可變結構域(VL)的抗體片段，稱為單鏈Fv(scFv)，已被廣泛使用。中和TGFβ1(CAT-192)或TGFβ2(CAT-152或Trabio^TM)的人抗體以前已產生(EP 0 945 464，EP 0 853 661，Thompson等人1999)。然而，本領域中可獲得的大多數TGFβ抗體是非人的。此外，在本發明之前唯一針對TGFβ的泛特異性(pan-specific)單克隆抗體是嚙齒類動物的。

與人TGFβ1和人TGFβ2結合的針對中和性和非中和性表位的多克隆抗體已在兔(Danielpour等人，1989b；Roberts等人，1990)、雞(R&D Systems，Minneapolis)和火雞(Danielpour等人，1989c)中產生。代表了部分TGFβ序列的肽也已用作免疫原來在兔中產生中和性多克隆抗血清(Border等人，1990；Flanders等人，1988)。此類非人多克隆抗體不適合于人治療用途。

1D11.16是鼠類泛特異性抗TGFβ抗體，其在廣泛范圍的體外測定法中中和人和小鼠TGFβ1、TGFβ2和TGFβ3(Dasch等人，1989；Dasch等人，1996；R&D System關于MAB1835的產品頁)，并且于在纖維化動物模型中的原理驗證研究之中是有效的(Ling等人，2003；Miyajima等人，2000；Schneider等人，1999；Khanna等人，1999；Shenkar等人，1994)。然而，因為1D11.16是鼠類單克隆抗體(Dasch等人，1989；Dasch等人，1996)，所以它不適合在人中的治療用途。

附圖簡述