[發(fā)明專利]一種氧化石墨烯混合材料的基質(zhì)固相分散劑及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410329163.4
• 申請日: 2014-07-10
• 公開（公告）號: CN104090057A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發(fā)明（設計）人: 王峰;張征;張紅娟;倉義鵬
• 申請（專利權）人: 江蘇省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102
• 代理人: 何朝旭

技術領域

本發(fā)明涉及一種基質(zhì)固相分散劑及其應用，尤其是一種以氧化石墨烯的混合材料作為基質(zhì)固相分散劑及其應用，屬于化學技術領域。

背景技術

真菌毒素(mycotoxin)是真菌在生長繁殖過程中產(chǎn)生的次生有毒代謝產(chǎn)物。目前常見的真菌毒素有：黃曲霉毒素類(AFs)、赭曲霉毒素類(OTs)、伏馬毒素類(FBs)和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)等毒素。真菌毒素廣泛污染農(nóng)作物、食品及飼料等植物源性食品，研究證實，部分真菌毒素可引起人類和動物急性或慢性中毒，損害機體的肝臟、腎臟、神經(jīng)組織、造血組織及皮膚組織等，因而國內(nèi)外對真菌毒素有嚴格的限量規(guī)定。

由于食品中真菌毒素含量較低，樣品基質(zhì)復雜，因而目標分析物的分離富集方法成為制約檢測時間和回收率的瓶頸技術。目前，常見的樣品前處理技術有免疫親和柱、固相萃取(SPE)、QuEChERS、液液萃取和基質(zhì)固相分散法(MSPD)等。其中，免疫親和柱采用特異性免疫反應作為分離手段，但由于各種毒素的分子結(jié)構和性質(zhì)差異很大，免疫親和柱只能針對某種或某類結(jié)構的毒素，而不適用于多種真菌毒素的分離富集。QuEChERS有操作簡單、快速和經(jīng)濟的優(yōu)勢，但對于基質(zhì)中含有較多淀粉、蛋白和脂肪的樣品的凈化效果不是非常理想。液液萃取是利用化合物在兩種互不相溶(或微溶)的溶劑中溶解度或的不同，使化合物從一種溶劑轉(zhuǎn)到另一種溶劑。例如申請人檢索到的一篇公開的中國發(fā)明專利申請就采用了液液萃取，申請?zhí)枮?01410005346.0，名稱為“一種同時檢測多種真菌毒素的方法”，公開了利用高效液相色譜-串聯(lián)三重四級桿法達到同時檢測33種真菌毒素的方法。該專利先用水萃取，再用相同體積的酸性乙腈萃取，以無水氯化鈉和硫酸鎂進行鹽析，取上層的乙腈層。由于伏馬毒素B1、B2等毒素在水和乙腈中的溶解度都比較大，僅收集乙腈層會造成這些毒素的大量損失。研究表明，提取大多數(shù)真菌毒素時，采用體積比為80～90％的乙腈和20～10％的水，提取效率均達到較高水平，1：1的乙腈水對大多數(shù)真菌毒素并不適合。因而，采用該液液提取方法，沒有進行凈化，直接進樣，樣品基質(zhì)效應明顯，容易造成回收率低，出現(xiàn)假陰性的結(jié)果。

由此可見，目前真菌毒素的提取方法雖然較多,存在提取方法通用性不強，樣品的基質(zhì)效應影響較大，結(jié)果回收率較低，存在假陰性問題，采用了納米材料作吸附劑的MSPD技術有助于顯著改善樣品的萃取效率，非常適合固體小麥粉中真菌毒素的快檢和確證工作。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有真菌毒素提取技術存在的缺陷，提出一種以氧化石墨烯和弗羅里硅土作為基質(zhì)固相分散劑，快速準確檢測小麥粉中真菌毒素的方法。

本發(fā)明通過以下技術方案解決技術問題：一種氧化石墨烯混合材料的基質(zhì)固相分散劑，由氧化石墨烯和弗羅里硅土組成，所述弗羅里硅土的質(zhì)量為氧化石墨烯的8-40倍。

氧化石墨烯混合材料的基質(zhì)固相分散劑的應用，包括以下步驟：

步驟一、制備樣品，將氧化石墨烯混合材料的基質(zhì)固相分散劑和小麥粉按比例用漩渦混勻器混合3-5min，其中小麥粉的質(zhì)量為氧化石墨烯的2-10倍；混合物轉(zhuǎn)移于研缽中，研磨5-10min；

步驟二、小麥粉樣品的提取凈化，混合物用甲醇溶液淋洗樣品，再用含1％-3％濃鹽酸的甲醇溶液洗脫目標分析物，收集洗脫液,30℃-50℃下氮氣吹近干，加入乙腈，過濾后待測；

步驟三、以高效液相色譜-串聯(lián)三重四級桿法的正離子模式測定小麥粉樣品中的18種真菌毒素。

18種真菌毒素分別為青霉酸、黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2、雜色曲霉毒素、伏馬毒素B1、伏馬毒素B2、二乙酰鑣草鐮刀菌烯醇、桔青霉毒素、赭曲霉毒素、煙曲霉素、玉米赤霉烯酮、3-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、15-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、雪腐鐮刀菌烯醇和展青霉毒素。

色譜條件：色譜柱：美國Thermo公司Hypersil?ODS?C18柱(150mm×2.1mm，3.5μm)；柱溫25℃；進樣量1μL；流速0.3mL/min；流動相：采用梯度洗脫程序：A：10mmol/L醋酸銨+0.1％甲酸水溶液，B甲醇作流動相進行梯度洗脫：0-3min，90％B；3-6min，60-55％B；6-12min，55-5％B；12-14min，5％B；14-15min，90％B。

質(zhì)譜條件：離子源：電噴霧離子源；電離方式：ESI+；檢測方式：多反應監(jiān)測(MRM)；毛細管電壓:3.5kV；霧化氣壓力：40psi；干燥氣流速：10L/min；干燥氣溫度：350℃。MRM參數(shù)見表1。