[發(fā)明專利]在固體表面保存核酸的方法及其保存液

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201410328898.5
• 申請日: 2014-07-10
• 公開（公告）號(hào): CN105255855A
• 公開（公告）日: 2016-01-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳堅(jiān);黎颯
• 申請（專利權(quán)）人: 上海艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/10
• 分類號(hào): C12N15/10
• 代理公司: 上海航天局專利中心 31107
• 代理人: 馮和純

1.一種在固體表面保存核酸的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（a）制備保存液；

（b）設(shè)置固相載體，并將所述保存液放置在所述固相載體上；

（c）使得所述保存液干燥，以形成固相保存介質(zhì)；

（d）使得核糖核酸與所述固相保存介質(zhì)混合，以形成保存混合物；及

（e）使得所述保存混合物干燥，從而在所述固相載體上保存所述核酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相載體為金屬，并且所述金屬固相載體的表面形成有多個(gè)圓形槽。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，在所述圓形槽的內(nèi)周壁涂覆所述保存液，并且在所述孔的底部涂覆纖維素膜。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（c）中，對所述保存液進(jìn)行凍干，以形成所述固相保存介質(zhì)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（d）中，所述核糖核酸為液相核糖核酸，并且沿所述內(nèi)周壁將所述液相核糖核酸滴入所述圓形槽。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟（e）中，使得所述混合物自然風(fēng)干。

7.一種在固體表面保存核酸的保存液，其特征在于，包括：

液相保存基質(zhì)；及

金屬螯合劑。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的保存液，其特征在于，所述液相保存基質(zhì)包括2-氨基-2-羥甲基丙烷-1,3-二醇液（Tris），檸檬酸鹽緩沖液，或磷酸鹽緩沖液，或者它們的組合。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的保存液，其特征在于，所述液相保存基質(zhì)還包括2-（N-嗎啉代）乙磺酸（MES），3，（N-嗎啉代）丙磺酸（MOPS），或4-（2-羥乙基）-1-哌嗪乙磺酸（HEPES），或者它們的組合。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的保存液，其特征在于，還包括紫外保護(hù)劑,所述紫外線保護(hù)劑為氫醌單甲醚（MEHQ），氫醌（HQ），甲基氫醌（THQ），抗壞血酸，或者它們的組合。

11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的保存液，其特征在于，還包括蛋白質(zhì)變性劑，所述蛋白質(zhì)變性劑為鹽酸胍，異硫氰酸胍（GITC），精氨酸鈉，十二烷基硫酸鈉（SDS），或尿素，或者它們的組合。

12.根據(jù)權(quán)利要求7所述的保存液，其特征在于，還包括還原劑，所述還原劑為二硫蘇糖醇（DTT），2-巰基乙醇（2-ME），或三（2-羧乙基）膦（TCEP），或者它們的組合。

13.根據(jù)權(quán)利要求7所述的保存液，其特征在于，還包括RNA酶抑制劑，所述RNA酶抑制劑為氧釩核糖核苷復(fù)合物（VRC）的核苷酸類似物，或市售的RNA酶抑制劑。