[發明專利]一種整合素avβ3靶向給藥載體及其制備方法

有效

• 申請號: 201410325384.4
• 申請日: 2014-08-18
• 公開（公告）號: CN104107435A
• 公開（公告）日: 2014-10-22
• 發明（設計）人: 程亮;胡文;程麗芳;陳大為
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;A61P35/00;C08G81/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 曹毅

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技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，涉及一種靶向給藥載體及其制備方法，具體涉及一種基于PAMAM的整合素a_vβ₃靶向給藥載體及其制備方法。

背景技術

據2014年全國腫瘤登記中心發布的《2013中國腫瘤登記年報》顯示，我國每一年新發腫瘤病例約為312萬例，平均每天有8550人患病，即：每分鐘就有6人被診斷為癌癥，有5人死于癌癥，癌癥已成為除心腦血管病外的第二大嚴重威脅人類健康的疾病。目前臨床上仍然采用化學治療作為癌癥治療的主要方法之一，但是由于藥物本身的毒害作用，體內細胞無論是否惡性腫瘤細胞，都會受到破壞。且隨著治療時間的不斷延長，化療藥物的毒副作用日益明顯，使患者在治療癌癥的同時，也承受著一定程度的痛苦，最終導致部分患者放棄治療。因此，提高藥物的靶向性，增加藥物在腫瘤細胞中的富集，減少對正常細胞組織的損傷，減輕患者的痛苦，有著重要的現實意義與臨床價值。

納米載體可通過腫瘤組織特有的增強滲透及滯留效應（Enhanced?permeability?and?retention?effect，EPR）被動富集于腫瘤部位，成為癌癥治療最具潛力的藥物遞送系統。聚酰胺-胺樹枝狀大分子?(polyamidoamine?dendrimer，PAMAM?dendrimer)是一類目前得到廣泛應用的樹枝狀聚合物材料，在其作為靶向遞藥系統載體時體現出獨特的優越性，如：其內部結構的疏水性空腔，可以物理包埋疏水性藥物；其表面有許多活性較強的氨基，可以連接機體中某些器官、組織和細胞特異性識別的靶向配基等。但由于高代數PAMAM會引起一定的細胞毒性和溶血毒性,?所以通常在PAMAM表面對其進行PEG化的修飾，一方面可以減少其毒副作用，另一方面可進一步提高該載藥系統的親水性，從而延長藥物在血液中的循環時間，有助于藥物被動靶向于腫瘤組織,?從而提高藥物治療效果。但是，經PEG化修飾后載體在一定程度上會降低藥物的釋放，這將大大降低藥物的抗腫瘤效果。因此，我們設計一種可剪切的聚合物載體，而腫瘤部位特定的生理環境為實現這個目標提供了有利條件。研究表明，腫瘤細胞內的細胞質和細胞核中存在大量的還原性谷胱甘肽（GSH），它可以對二硫鍵進行剪切，使二硫鍵發生斷裂。而且腫瘤細胞內的GSH濃度（10-20?mM）明顯高于血漿中的GSH濃度(10?μM），這足以保證可剪切的二硫鍵聚合物在血液循環時二硫鍵不發生斷裂，藥物緩慢釋放，而當被腫瘤細胞攝取后，在腫瘤細胞內高濃度的GSH刺激下，二硫鍵發生斷裂，從而快速的釋放被包載的藥物，達到治療腫瘤的目的。除此之外，PAMAM本身還具有pH敏感性，即在腫瘤組織低pH的條件下，PAMAM的構象會發生變化，其疏水性的內核會打開，這將進一步加快藥物的釋放速度及增加釋放量，從而達到還原及pH雙重釋藥的目的。為了提高聚合物的靶向效率，增加聚合物的攝取量，目前研究最常用的方法是在PAMAM的表面連接上能與腫瘤細胞內特定受體結合的配體，從而實現主動靶向和被動靶向相結合，最大程度的提高聚合物的靶向效率。RGD肽是一類含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp）序列的短肽，廣泛存在于生物體內，是整合素與其配體蛋白的識別位點。整合素為細胞黏附分子重要組成成分之一,?主要介導細胞與細胞，細胞與細胞外基質(Extracenularmatrix,?ECM)之間的相互黏附，并介導細胞與ECM之間的雙向信號傳導。整合素α_vβ₃在多種腫瘤細胞表面和新生血管內皮細胞表面高表達，而在正常成熟組織(靜止型非增殖內皮細胞)表面不表達。研究表明，在腫瘤的生長和轉移過程中，新生血管起著重要作用，若沒有新生血管生成，腫瘤的生長則不會超過1-2?mm。但是，由于大多數線性RGD肽在循環過程中半衰期較短，所以其治療效果不夠理想。為此，研究者將其主體或部分結構改為環形，來增加肽類化合物的穩定性與活性。研究表明，通常情況下，含有兩個二硫鍵的環狀RGD多肽對腫瘤新生血管內皮細胞的抑制力，是線性RGD多肽的20倍。因此,?本發明利用cRGDyK多肽與高表達整合素α_vβ₃的腫瘤細胞和腫瘤血管內皮細胞的高親和力，將RGD連接到PAMAM-SS-PEG載體上，從而實現載藥系統對腫瘤部位的主動靶向作用。

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發明內容

要解決的技術問題：本發明主要解決PAMAM-SS-PEG對腫瘤細胞的靶向性低的問題，設計了一種基于PAMAM的整合素a_vβ₃靶向給藥載體及其制備方法，以此提高藥物的抗腫瘤效果。