[發明專利]一種殺線蟲的菌劑

在審

• 申請號: 201410324464.8
• 申請日: 2014-07-09
• 公開（公告）號: CN105309480A
• 公開（公告）日: 2016-02-10
• 發明（設計）人: 馬宗剛
• 申請（專利權）人: 馬宗剛
• 主分類號: A01N63/00
• 分類號: A01N63/00;A01P5/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

發明涉及一種殺線蟲的菌劑，屬微生物農藥技術領域。

背景技術

植物寄生線蟲是一種世界范圍內普遍發生的植物病害，僅根結線蟲已知種類達70多種，為害3000多種植物，每年造成的損失巨大。據聯合國糧農組織統計，每年因線蟲造成損失全球高達1000億美元。在我國，線蟲主要危害煙草、花卉、蔬菜、棉花、大豆、花生、三七、西洋參等主要經濟作物，成為發展這些作物的重要限制因子。據全國煙草病蟲害防治信息中心不完全統計，僅云南省發病面積就達2．7萬公傾，直接經濟損失1．2億元，間接損失更為嚴重。黑龍江省僅大豆胞囊線蟲每年造成的損失達8億元之多。松材線蟲被稱為無煙森林火災，在江蘇、浙江、廣東、山東、安徽、湖北、上海、臺灣、香港等部份地區嚴重發生，有向全國漫延的趨勢。在山東、廣東、海南和云南等蔬菜主產區，蔬菜根結線蟲呈上升趨勢。更嚴重的是由于根結線蟲侵染后，造成作物傷口，致使作物根部病害嚴重發生。云南的三七根腐就是典型例子。化學殺線蟲劑自上個世紀40年代發現以來，在線蟲防治中發揮了重要作用。但是隨著科學技術的進步，發現許多化學殺線蟲劑均有副作用，造成環境污染，危害人體健康。相繼有不少被禁用或即將禁用。特別是植物寄生線蟲發生于作物根部，由于土壤環境的特殊性，必須大劑量施用才能保證其防效。而大劑量化學農藥對地下水污染非常嚴重。因此，研究開發高效低毒低殘留殺線蟲劑已經是農業可持續發展中的重要課題。

發明內容

本發明的目的是通過對一株具有產生酶而分解線蟲功能的嗜麥芽窄食單胞菌研究，開發生物殺線蟲劑。

本發明篩選到的一株對植物寄生線蟲具有很好殺蟲功能的嗜麥芽窄食單胞菌(stenotrophomonasmaltophilia)G6，本發明stenotrophomonasmaltiphiliaG6菌株形態特征為：微彎或直桿狀，典型的細胞長2μm，寬0．5μm。菌落灰色到綠色，圓形，隆起，濕潤有光澤。G6菌株的殺線蟲機制理為先形成粗蛋白分解線蟲體壁，通過體壁侵入線蟲體內，最終將線蟲全部分解。在整個殺線蟲過程中，伴隨著產生蛋白酶、幾丁質酶對線蟲的作用。

本發明是這樣實現的：擴大培養G6菌株，提取殺線蟲有效成分，進行殺線蟲藥效試驗，確定其對線蟲的作用。

G6培養方法(以下為重量百分比)：

1、試管種培養

培養基配方為：卜3％酵母浸膏、0．5—2％蛋白胨、卜4％葡萄糖、1．8—2％瓊脂、余下為水，pH7。將G6菌絲體接種到培養基上，30。C下培養2天，獲得試管種。

2、液體擴大培養：

液體培養基配方為：1-3％酵母粉、10-20％大豆餅粉、0．5-2％魚粉、1-4%葡萄糖，余下為水，pH7。將試管種接種到250ml三角瓶液體培養基中，每瓶裝lOOml，于30。C下搖床培養培養時間2天，轉速為220rpm。

3、試驗方法：

取試驗用藥劑2009l于1．5m1離心管中，加入活松材線蟲150條，離心管平放，置于250C下，松材線蟲分別于24小時、48小時、60小時檢查計算線蟲的死亡率。并在光學顯微鏡下觀察，觀察線蟲體壁變化情況。

鑒定死亡的方法為：在處理離心管中加入1-5滴NaCl溶液，2分鐘后觀察，死蟲僵直，活蟲則卷曲或扭動。

結果表明，從G6菌株液體發酵產物中提取的試驗用藥劑對松材線蟲具有較好的殺蟲效果，線蟲的平均死亡率在95％以上。

具體實施方式

下面是本發明的實施例，但本發明的內容并不局限于此。

將stenotrophomonasmaltophiliaG6菌體接種到試管瓊脂培養基斜面上，培養基配方為：2％酵母浸膏、1．5％蛋白胨、2％葡萄糖、1．8％瓊脂、余下為水，pH為7。將G6菌絲體接種到培養基上，30℃下培養2天，獲得試管種。

將試管種接種到250m1三角瓶液體培養基中(每瓶裝100m1)，液體培養基配方為：

2％酵母粉、15％大豆餅粉、1％魚粉、3％葡萄糖、余下為水，pH7。于30℃下搖床培養培養時間2天，轉速為220rpm。即得殺線蟲藥液。

以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。