[發明專利]人工構建的雜種泛素結合結構域多肽及其應用

有效

• 申請號: 201410323921.1
• 申請日: 2014-07-08
• 公開（公告）號: CN104072618B
• 公開（公告）日: 2018-04-27
• 發明（設計）人: 徐平;高媛;李衍常;趙明治;王京偉;常蕾;武軍駐;賀福初
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N9/10;C07K1/16
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司11245
• 代理人: 關暢

1.人工構建的雜種泛素結合結構域多肽1，為如下(a)或(b)：

(a)由至少兩個互不相同的泛素結合結構域串聯而成；

(b)由至少兩個相同的或彼此不同的雜種泛素結合結構域單元串聯而成；所述雜種泛素結合結構域單元由至少兩個互不相同的泛素結合結構域串聯而成；

所述泛素結合結構域選自如下：UBA結構域和ZnF-A20結構域。

2.根據權利要求1所述的人工構建的雜種泛素結合結構域多肽1，其特征在于：所述人工構建的雜種泛素結合結構域多肽1為如下(a)或(b)或(c)或(d)：

(a)由如下兩個泛素結合結構域的氨基酸序列串聯組成：來自于酵母的DSK2p蛋白的UBA結構域，以及來自于人類的RABGEF1蛋白的ZnF-A20結構域；

(b)由n個相同的雜種泛素結合結構域單元串聯而成；所述雜種泛素結合結構域單元由如下兩個泛素結合結構域串聯而成：來自于酵母的DSK2p蛋白的UBA結構域，以及來自于人類的RABGEF1蛋白的ZnF-A20結構域；

n為大于等于2的整數；

(c)由如下兩個泛素結合結構域的氨基酸序列串聯組成：來自于酵母的DSK2p蛋白的UBA結構域，以及來自于人類的UBQLN2蛋白UBA結構域；

(d)由n個相同的雜種泛素結合結構域單元串聯而成；所述雜種泛素結合結構域單元由如下兩個泛素結合結構域串聯而成：來自于酵母的DSK2p蛋白的UBA結構域，以及來自于人類的UBQLN2蛋白UBA結構域；

n為大于等于2的整數。

3.根據權利要求2所述的人工構建的雜種泛素結合結構域多肽1，其特征在于：所述來自于酵母的DSK2p蛋白的UBA結構域的氨基酸序列如序列表中序列1的第237-281位所示。

4.根據權利要求2所述的人工構建的雜種泛素結合結構域多肽1，其特征在于：所述來自于人類的RABGEF1蛋白的ZnF-A20結構域的氨基酸序列如序列表中序列1的第287-351位所示。

5.根據權利要求2所述的人工構建的雜種泛素結合結構域多肽1，其特征在于：所述來自于人類的UBQLN2蛋白UBA結構域的氨基酸序列如序列表中序列2的第287-336位所示。

6.根據權利要求1-5中任一所述的人工構建的雜種泛素結合結構域多肽1，其特征在于：所述雜種泛素結合結構域多肽1的氨基酸序列為如下(a1)-(a5)中任一種：

(a1)序列表中序列1的第237-351位；

(a2)序列表中序列1的第237-471位；

(a3)序列表中序列1的第237-711位；

(a4)序列表中序列2的第237-336位；

(a5)序列表中序列2的第237-651位。

7.人工構建的雜種泛素結合結構域多肽2，為在權利要求1-6任一所述的人工構建的雜種泛素結合結構域多肽1上連接標簽蛋白后得到的多肽；

所述標簽蛋白為能夠進行親和純化的標簽蛋白。

8.根據權利要求7所述的人工構建的雜種泛素結合結構域多肽2，其特征在于：所述標簽蛋白選自如下：谷胱甘肽-S-轉移酶標簽、His標簽、Flag標簽、HA標簽、Myc標簽、麥芽糖結合蛋白標簽、T7標簽、纖維素結合域標簽、鈣調蛋白標簽。

9.根據權利要求8所述的人工構建的雜種泛素結合結構域多肽2，其特征在于：所述標簽蛋白為谷胱甘肽-S-轉移酶標簽；

所述谷胱甘肽-S-轉移酶標簽的核苷酸序列為序列表中序列1的第1-231位。

10.根據權利要求7-9任一所述的人工構建的雜種泛素結合結構域多肽2，其特征在于：所述人工構建的雜種泛素結合結構域多肽2的氨基酸序列為如下(b1)-(b5)中任一種：

(b1)序列表中序列1的第1-351位；

(b2)序列表中序列1的第1-471位；

(b3)序列表中序列1的第1-711位；

(b4)序列表中序列2的第1-336位；

(b5)序列表中序列2的第1-651位。