[發明專利]氨苯砜在保護血腦屏障完整性中的應用

在審

• 申請號: 201410322969.0
• 申請日: 2014-07-09
• 公開（公告）號: CN104069091A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發明（設計）人: 崔德華;周婷;戰銳;趙磊;王賀成;張韜
• 申請（專利權）人: 崔德華
• 主分類號: A61K31/145
• 分類號: A61K31/145;A61P25/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于藥物領域，涉及氨苯砜在保護血腦屏障完整性中的應用。

背景技術

血腦屏障(blood-brain?barrier，BBB)是由連續的腦血管內皮細胞組成的結構，功能為調控細胞和分子入腦，并阻止神經毒性物質由血入腦。緊密連接蛋白負責維持BBB的完整性。BBB功能失調是許多神經系統疾病發病過程中的早期和重要事件，因此保護BBB完整性在多種神經系統疾病的治療中起重要作用。

許多體內和體外的刺激都會引起BBB損傷，如脂多糖是革蘭氏陰性細菌細胞壁中的一種成分，在感染性腦損傷中引起BBB通透性增加，緊密連接蛋白水平下降。脂多糖致炎因素導致BBB滲漏的機制包括引起促炎細胞因子分泌，上調活性氧(reactive?oxygen?species，ROS)水平，導致氧化應激損傷。而ROS可由NADPH氧化酶(NOX)催化生成，抑制NADPH氧化酶的活性和表達可以減輕脂多糖致炎因素造成的BBB損傷。

氨苯砜目前被用于治療麻風病和部分皮膚病。發明人前期研究已經發現服用氨苯砜的老年麻風病人腦內海馬CA3區的神經元數量則顯著多于未服用氨苯砜的病人(De-Hua?Chui?et?al.Am?J?Pathol1994)，提示氨苯砜對于神經系統的保護作用。在腦缺血/再灌注模型中，氨苯砜能夠減少腦氧化應激和炎癥損傷，抑制神經細胞凋亡，并且可以縮小腦梗塞面積(Diaz-Ruiz?et?al.J?Neurosci?Res.2008)。研究發現：氨苯砜可通過抗氧化作用延長線蟲壽命(Cho?SC?et?al.PNAS2010)。上述研究表明氨苯砜在細胞和動物水平均可抑制ROS水平，并減輕氧化應激造成的損傷，具有較好的抗氧化應激作用，但是氨苯砜對血腦屏障完整性的影響尚無報道。

發明內容

利用炎癥誘導的血腦屏障損傷模型，我們研究了氨苯砜在BBB中的抗氧化作用，及其對血腦屏障完整性的影響。

本發明公開了結構如通式I所示的化合物，在保護血腦屏障完整性中的應用。在給與脂多糖致炎因素刺激的C57/BL6小鼠中，氨苯砜能降低ROS水平，抑制NADPH氧化酶活性以及NOX2表達，同時提高緊密連接蛋白表達水平，減輕脂多糖致炎因素造成的BBB滲漏。

優選的，本發明的化合物對小鼠BBB保護作用的有效濃度為5-10mg/kg體重。

本發明提供的化合物可以和常規藥物賦形劑或輔料形成藥物組合物，可通過口服或者直腸途徑給藥。

本發明通過研究發現了氨苯砜的新用途-可以保護血腦屏障的完整性，對于此類疾病的防治，利用現有藥物提出了新的有效的方法。

附圖說明

圖1為氨苯砜對脂多糖致炎因素引起的BBB滲漏的影響。A圖為雙光子成像結果，B圖為對雙光子成像結果的定量統計。

圖2為不同濃度的氨苯砜對脂多糖致炎因素引起的小鼠腦血管緊密連接蛋白水平降低的改善作用。A圖為蛋白電泳結果，B，C，D圖為對蛋白電泳結果的定量統計。

圖3為不同濃度的氨苯砜對脂多糖致炎因素引起的小鼠腦血管ROS升高的改善作用。

圖4為不同濃度的氨苯砜對小鼠腦血管NADPH氧化酶活性和NOX2水平的影響。A圖為NADPH氧化酶活性測定結果，B圖為蛋白電泳結果，C圖為對蛋白電泳結果的定量統計。

具體實施方式

以下將結合附圖1-4，通過具體實施例對本發明進行描述。

實施例1、動物模型構建及處理。

脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)刺激常引起血管神經炎癥性改變，因此是國際常用的炎癥模型，用于探究藥物對血管神經變化的影響及相關藥理機制。

選取3月齡的C57/BL6小鼠，飼養于北京大學醫學部實驗動物部，自由覓食和飲水，12/12h日照節律。將小鼠作如下分組：溶劑組(Control)；腹腔注射LPS組(LPS)；腹腔注射LPS+0.5mg/kg?DDS組(LPS+0.5mg/kg?DDS)；腹腔注射LPS+2mg/kg?DDS組(LPS+2mg/kg?DDS)；腹腔注射LPS+5mg/kg?DDS組(LPS+5mg/kg?DDS)；腹腔注射LPS+20mg/kg?DDS組(LPS+20mg/kg?DDS)，每組6只。不同濃度的DDS用4.5％的聚乙二醇/水溶液溶解，腹腔注射的體積為每只100ul。24小時后進行后續實驗。

實施例2、氨苯砜對LPS引起的BBB滲漏的影響