[發(fā)明專利]一種翅柄鐵線蕨快速繁殖的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410318402.6
• 申請日: 2014-07-04
• 公開（公告）號: CN104082145A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發(fā)明（設計）人: 戴勤;王冬梅;李慧珍
• 申請（專利權）人: 蕪湖歐標農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G1/00;C12N5/04
• 代理公司: 北京科億知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術領域

本發(fā)明涉及植物快速繁殖技術領域，尤其是翅柄鐵線蕨快速繁殖技術領域。

背景技術

蕨類植物是介于苔蘚植物和種子植物之間的一大類群植物，具有獨特的生活史。全世界蕨類植物約有12000多種，我國是世界上蕨類植物資源最豐富的地區(qū)之一，約有2000余種。蕨類植物分布很廣，從高山到海濱，從寒帶到熱帶都有生長，生態(tài)類型也極其多樣，主要為土生、石生或附生，少數(shù)為水生或沼生。

蕨類植物在經(jīng)濟有著一定的重要性，常常被用作藥物、食物、指示植物、工農(nóng)業(yè)的原料。

大多數(shù)蕨類植物具有較高的觀賞價值，它們雖然沒有鮮艷奪目的花與果實，然而它們以千姿百態(tài)奇特的葉形、葉姿和青翠碧綠的色彩，使人賞心悅目，在觀賞植物中占有重要地位。

翅柄鐵線蕨(學名：Adiantum?subliferum(Wall.)ex?Hook.)是蕨類植物，多年生草本。植株高約30厘米。根狀莖短而直立，被棕褐色披針形鱗片。葉簇生；栗黑色，有光澤，葉片披針形，互生，頂生羽片為扇形，外緣具有3-6缺刻，基部楔形。葉脈多回二歧分叉，葉干后厚紙質，淡褐綠色，有光澤，能著地生根，行無性繁殖。孢子囊群每羽片3-7枚；囊群蓋橢圓形或腎形，染色體2n＝120。生林下潮濕的地方；分布于中國、越南、印度、尼泊爾、印度尼西亞、菲律賓及非洲西部熱帶地區(qū)。

翅柄鐵線蕨烏黑發(fā)亮的細長葉柄兩側,裝點著淺綠色的翡翠膜帶,宛若信鴿的雙翼,翩然飛致,因此得名。叢生葉翠綠,由二排對開近半月狀的羽片組成,羽片粉紅色,十分艷麗。長大的葉自然分披,像少女的披肩長發(fā),洋氣灑脫,給人以美感,楚楚動人,別開生面。翠綠色的羽片,先端變窄,有時延長為鞭狀,落地生根,根莖繁衍形成新植株。枝芳菲的翅柄鐵線蕨,向四周平展的綠葉,簇擁著微紅色的幼葉,酷似一叢待放的花朵,嫵媚動人,供游人大飽眼富,使觀者留戀往返。

目前，翅柄鐵線蕨多采用孢子繁育來進行生產(chǎn)栽培，這繁育技術提高品種的純度，保持了品種特性，但成活率較低及繁殖速度較慢，制約了翅柄鐵線蕨產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。而組織培養(yǎng)育苗技術既可以保持種的純度和特性，也可以降低生產(chǎn)成本，提高繁殖速度和成活率。

現(xiàn)有技術中尚無經(jīng)愈傷組織途徑獲得翅柄鐵線蕨再生植株的報道。

發(fā)明內容

本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種翅柄鐵線蕨快速繁殖的方法，經(jīng)愈傷組織途徑獲得翅柄鐵線蕨叢生芽，誘導生根，可實現(xiàn)翅柄鐵線蕨組培苗的大量快速繁殖。

為了解決上述技術問題，本發(fā)明提出下列技術方案：

一種翅柄鐵線蕨快速繁殖的方法，其特征在于所述的方法包括以下步驟：

1)外植體的選取：取2cm長的根狀莖莖尖，去掉雜質及莖尖周圍的絨毛等附屬物；

2)外植體消毒：將上述莖尖放入盛有自來水的20-25KHz超聲波清洗機中保持溫度30-35℃處理30-45min，然后以自來水沖洗10-20min；隨后在超凈工作臺上以70-75％的酒精消毒25-35秒，0.02％升汞溶液中處理5-7分鐘，然后以無菌水沖洗4-5遍，置于無菌培養(yǎng)皿備用；

3)初始誘導培養(yǎng)：將滅菌后外植體兩端各剪去2-3mm，莖尖按末端向下插入初始誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為光強1000-2500Lx、光周期5-8h/d,溫度25℃±2℃；培養(yǎng)4-6d后將其中未污染的外植體莖尖轉接到新的初始誘導培養(yǎng)基中，并繼續(xù)培養(yǎng)12-18d至新芽長出；所述的初始誘導培養(yǎng)基組成為：MS+6-BA0.1-0.2mg/L+NAA0.01-0.02mg/L；

4)愈傷組織誘導：取初始誘導培養(yǎng)中的芽，放入愈傷組織誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)15-20d，條件為暗培養(yǎng)，溫度20℃±2℃；所述愈傷組織培養(yǎng)基為：MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.02-0.5mg/L+PVP5-10mg/L；

5)分化和增殖培養(yǎng)：將透明無色的愈傷組織塊放入分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)20-25d，增殖產(chǎn)生大量叢生苗，培養(yǎng)條件為光強1800-2500Lx、光周期8-10h/d,溫度25℃±2℃；所述分化和增殖培養(yǎng)用培養(yǎng)基為：WPM+6-BA0.1-0.5mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+PVP5-10mg/L；

6)生根培養(yǎng)：將5)步驟中的叢生苗切割成單個，轉移至生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)15-20d后生根，培養(yǎng)條件為光強1800-2500Lx、光周期8-10h/d,溫度25℃±2℃；所述生根用培養(yǎng)基為：1/2MS+IBA0.1-0.5mg/L+PVP5-10mg/L；