[發(fā)明專(zhuān)利]癌細(xì)胞的檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410318211.X
• 申請(qǐng)日: 2011-12-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104152530B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高木英紀(jì);伊藤博史;小塚昌弘
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 愛(ài)科來(lái)株式會(huì)社
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/04
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/04;G01N33/569
• 代理公司: 中原信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司11219
• 代理人: 金龍河,穆德駿

本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2011年12月22日、申請(qǐng)?zhí)枮?01180061918.1(國(guó)際申請(qǐng)?zhí)枮镻CT/JP2011/079912)、發(fā)明名稱(chēng)為“癌細(xì)胞的檢測(cè)方法”的發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及癌細(xì)胞的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

日本專(zhuān)利第3834326號(hào)公報(bào)中公開(kāi)了使用免疫微珠回收癌細(xì)胞后用抗體進(jìn)行免疫染色等來(lái)檢測(cè)的方法。日本特開(kāi)2001-41959號(hào)公報(bào)中公開(kāi)了通過(guò)使固定有特異性地結(jié)合癌細(xì)胞的配體的載體與含有癌細(xì)胞的液體接觸而對(duì)載體上結(jié)合的癌細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記來(lái)檢測(cè)癌細(xì)胞的方法。此外，還有利用細(xì)胞的大小與正常細(xì)胞分離后通過(guò)免疫染色進(jìn)行檢測(cè)的方法、通過(guò)密度梯度離心分離后進(jìn)行免疫染色的方法等。另外，作為血液中含有的癌細(xì)胞的檢測(cè)方法，例如，日本專(zhuān)利第3867968號(hào)公報(bào)中公開(kāi)了使用腺病毒感染癌細(xì)胞使其表達(dá)熒光蛋白質(zhì)而進(jìn)行檢測(cè)的方法。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明所要解決的問(wèn)題

但是，對(duì)于日本專(zhuān)利第3834326號(hào)公報(bào)中記載的技術(shù)和其他使用免疫染色的方法而言，如果不表達(dá)抗原則無(wú)法進(jìn)行檢測(cè)，即使是檢測(cè)時(shí)也需要預(yù)先確定靶抗原，并且只能檢測(cè)帶有該標(biāo)靶的細(xì)胞。對(duì)于日本特開(kāi)2001-41959號(hào)公報(bào)中公開(kāi)的技術(shù)那樣利用固定有特異性地結(jié)合癌細(xì)胞的配體的載體的方法而言，需要預(yù)先制備這樣的載體。另外，對(duì)于日本專(zhuān)利第3867968號(hào)公報(bào)中記載的技術(shù)而言，為了感染病毒而需要進(jìn)行培養(yǎng)，在熒光測(cè)定之前需要約24小時(shí)的時(shí)間。

因此，本發(fā)明的目的在于提供能夠在短時(shí)間內(nèi)簡(jiǎn)便地檢測(cè)末梢血中的癌細(xì)胞的癌細(xì)胞檢測(cè)方法。

用于解決問(wèn)題的手段

本發(fā)明如下所述。

[1]一種癌細(xì)胞的檢測(cè)方法，包括如下步驟：使含有被檢細(xì)胞的含末梢血試樣與標(biāo)記用物質(zhì)在體外接觸，使所述標(biāo)記用物質(zhì)攝入到所述被檢細(xì)胞內(nèi)而對(duì)所述被檢細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記、以及從所述被檢細(xì)胞中檢測(cè)出由所述標(biāo)記用物質(zhì)標(biāo)記的程度強(qiáng)于含末梢血試樣中的正常細(xì)胞的標(biāo)記程度的細(xì)胞作為癌細(xì)胞。

[2]如[1]所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為用熒光物質(zhì)標(biāo)記的物質(zhì)或熒光物質(zhì)的前體物質(zhì)，所述檢測(cè)得到由所述熒光物質(zhì)標(biāo)記的所述被檢細(xì)胞的熒光強(qiáng)度。

[3]如[1]或[2]所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為用熒光物質(zhì)標(biāo)記的物質(zhì)或熒光物質(zhì)的前體物質(zhì)，所述檢測(cè)得到選自由由所述熒光物質(zhì)標(biāo)記的所述被檢細(xì)胞的平均熒光強(qiáng)度和總熒光強(qiáng)度組成的組中的至少一種熒光強(qiáng)度。

[4]如[1]～[3]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，所述檢測(cè)還基于由所述熒光物質(zhì)標(biāo)記的所述被檢細(xì)胞的大小來(lái)進(jìn)行。

[5]如[1]～[4]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為選自由標(biāo)記化的糖、標(biāo)記化的氨基酸和攝入到細(xì)胞內(nèi)后代謝成原卟啉9的物質(zhì)組成的組中的至少一種物質(zhì)。

[6]如[1]～[5]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為標(biāo)記化的糖和標(biāo)記化的氨基酸。

[7]如[1]～[6]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為所述標(biāo)記化的糖，所述標(biāo)記化的糖為標(biāo)記化的單糖。

[8]如[1]～[7]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為所述標(biāo)記化的糖，所述標(biāo)記化的糖為熒光標(biāo)記的葡萄糖衍生物。

[9]如[1]～[8]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為標(biāo)記化的氨基酸，所述氨基酸為選自由天然氨基酸和非天然氨基酸組成的組中的至少一種氨基酸。

[10]如[1]～[9]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為標(biāo)記化的氨基酸，所述氨基酸為選自由中性氨基酸和酸性氨基酸組成的組中的至少一種氨基酸。

[11]如[1]～[10]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為攝入到細(xì)胞內(nèi)后代謝成原卟啉9的物質(zhì)，所述物質(zhì)為選自由氨基乙酰丙酸及其衍生物組成的組中的至少一種物質(zhì)。

[12]如[1]～[11]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，所述標(biāo)記用物質(zhì)為攝入到細(xì)胞內(nèi)后代謝成原卟啉9的物質(zhì)，所述物質(zhì)為氨基乙酰丙酸及其衍生物，所述氨基乙酰丙酸及其衍生物為選自由它們的鹽、它們的酯和它們的酯的鹽組成的組中的至少一種物質(zhì)。

[13]如[1]～[12]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，含有所述被檢細(xì)胞的所述含末梢血試樣進(jìn)行了溶血處理。

[14]如[1]～[13]中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其中，包括使細(xì)胞種類(lèi)識(shí)別用抗體與含有所述被檢細(xì)胞的所述含末梢血試樣在體外接觸的步驟。