[發明專利]DC靶向肽及其應用

在審

• 申請號: 201410316072.7
• 申請日: 2014-07-04
• 公開（公告）號: CN104277094A
• 公開（公告）日: 2015-01-14
• 發明（設計）人: 瞿明
• 申請（專利權）人: 文康醫療技術（深圳）有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K19/00;C12N15/11;C12N15/63;A61K38/17;A61K47/42;A61P35/00
• 代理公司: 深圳市科吉華烽知識產權事務所(普通合伙) 44248
• 代理人: 胡玉;韓云涵

??

技術領域

????本發明屬于多肽領域，尤其是涉及DC靶向肽及其制備方法和應用。?

背景技術

癌癥是全球導致死亡的主要原因之一，2007年全球死于癌癥的人數達到790萬，約占所有死亡人數的13%，發病率呈逐年上升趨勢。其治療主要以手術、化療和放療為主，但放化療副作用大，療效都不是很理想。目前，免疫細胞治療正在成為一種新的癌癥治療手段。?

隨著分子生物學和免疫學等基礎學科的飛速發展，對腫瘤的研究日益深入，特別是近十幾年來，多種與腫瘤的發生發展密切相關的腫瘤抗原被發現，這些抗原可以作為癌癥免疫治療的靶標。?腫瘤特異性的抗原可以通過DC（dendritic?cells?，樹突狀細胞）細胞遞呈給T細胞，啟動T細胞的特異性殺傷腫瘤的能力。（Banchereau,?J.,?and?Steinman,?R.?M.?(1998)?Dendritic?cells?and?the?control?of?immunity.?Nature?392,?245–2522.?Palucka,?K.,?Banchereau,?J.,?and?Mellman,?I.?(2010)?Designing??vaccines?based?on?biology?of?human?dendritic?cellsubsets.Immunity33,?464–478）。如何讓抗原準確高效的到達DC細胞，是腫瘤免疫治療的關鍵。噬菌體展示技術為我們提供了一種篩選DC靶向分子的方法。?

噬菌體展示技術，在1985?年首次被Smith闡述,原理是通過將外源蛋白或肽段的基因克隆到絲狀噬菌體的基因組DNA中,?與噬菌體的外殼蛋白形成融合蛋白,?從而使該外源分子呈現于噬菌體表面。該技術的主要特點是將特定分子的基因型和表型統一在同一噬菌體顆粒內,?即在噬菌體表面表達特定蛋白,而在噬菌體核心DNA?中含有該蛋白的結構基因,?通過表型篩選就可以獲得其編碼基因,?因此噬菌體展示技術是一種強有力的基因表達篩選技術。噬菌體展示肽庫技術具有高庫容、高效方便及靈活的篩選技術等特點，近幾年已經廣泛用于抗腫瘤疫苗，藥物，及腫瘤診斷標志物的篩選研發（Johnson?DH.Targeted?therapy?in?non-small?cell?lung?cancer.myth?and?reality[J].lung?Cancer,2003,41?(suppl1):S3-S8）?

MUC1又稱附膜蛋白,是由muc1基因表達的一種高分子量,高糖基化蛋白,它一種是跨膜分子。它在上皮更新與分化，維持上皮完整性和癌的發生與轉移等方面都起到重要的作用(Moniaux?N，Escande?F，Porchet?N,et?alStructural?organization?and?classification?of?the?human?mucin?genes〔J〕Front?Biosci，2001；6(1):D1192206)。正常情況下,MUC1?可在多種組織、器官中的上皮細胞如消化道、呼吸道、乳腺、胰腺、生殖道中表達，主要分布于腺細胞頂膜或以分泌形式存在于腺腔內，不被免疫系統識別。而在惡性腫瘤細胞中,?乳腺癌、胃癌、結腸癌等多種癌組織中,?MUC1表達量可達正常時的10倍以上,且結構發生改變，使MUC1?的核心蛋白暴露出新的蛋白表位或新的糖抗原,分布于整個癌細胞表面，作為腫瘤特異的抗原，成為免疫細胞攻擊靶點(Miles?DW，TaylorPapadimitriou?JTherapeutic?aspects?of?polymorphic?epithelial?mucin?in?adenocarcinoma〔J〕Pharmacol?Ther，1999；82(1):97106),

本發明通過從噬菌體展示技術從肽庫中篩選得到了一種可以高效靶向DC細胞的多肽,?并與MUC1腫瘤特異性多肽抗原融合，利用多肽固相合成方法合成了“DC靶向融合肽”。并對其DC靶向能力、DC細胞致敏能力和激活CTL細胞腫瘤殺傷能力進行了評價。

??

發明內容

本發明的一個目的是提供一種靶向DC細胞的多肽。?

本發明所提供的DC靶向多肽，其氨基酸序列如SQE?ID?No:1或者SQE?ID?No:2或者SQE?ID?No:3所示。本發明提供一種DC靶向肽介導的DC-CTL免疫細胞治療技術。?

比起其他技術靶向肽技術具有以下優點：?