[發明專利]金橙II降解菌L-15及其生產的菌劑

有效

• 申請號: 201410315204.4
• 申請日: 2014-07-03
• 公開（公告）號: CN104195065A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發明（設計）人: 劉秀艷;焦亮;郭軍;史曉亮
• 申請（專利權）人: 杭州電子科技大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;B09C1/10;C12R1/01;C02F101/38
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 杜軍

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及金橙II降解菌L-15及其生產的菌劑，是利用微生物的方法降解染料，適用于環境污染的治理。?

背景技術

偶氮染料(偶氮基兩端連接芳基的一類有機化合物)是紡織品服裝在印染工藝中應用最廣泛的一類合成染料，用于多種天然和合成纖維的染色和印花，也用于油漆、塑料、橡膠等的著色。在特殊條件下，它能分解產生20多種致癌芳香胺，經過活化作用改變人體的DNA結構引起病變和誘發癌癥。?

偶氮化合物共同的特征為分子中含有偶氮鍵“―N=N―”。一般說來，偶氮化合物的分子中含有1―3個“―N=N―”，鍵上連有苯或苯基，苯或苯基又連有―Cl、―NH2、―CH3、―SO3、―NO2及―OH等基團。?

偶氮染料污染的主要特點是污染量大，雖然偶氮染料廢水中殘留的染料成分濃度很低，但是排入水體也可以造成水體的透光率降低，破壞水體生態系統。這些染料結構穩定，具有抗堿、抗酸、抗微生物、抗光等特性，可以較長時間地滯留在環境中，因此存在潛在的健康危害。在生產和使用染料的地方，地下水和地表水的重要污染物就是偶氮染料。在很多染料工業密集的地區，河流和地下水都面臨著嚴重污染的危險。?

偶氮染料對人體的健康也有嚴重危害。日木人Yoshida等在20世紀30年代發現，溶劑黃可以引起老鼠肝細胞癌變。此后，人們才開始意識到，在生產和使用過程中，偶氮染料及其中間體具有危險性。芳香胺作為偶氮染料中間體，已被一些國家列為可疑致癌物，其中β-萘胺和聯苯胺已經被確認為是對人類最具烈性的致癌物。其中，偶氮基經常會與一個或多個芳香環系統相連，而形成共軛體系，從而作為染料的發色體。它幾平分布于所有顏色。偶氮染料不僅僅可以用于紡織品的印染，還可以用來染紙張、皮革、食品等。應該指出的是，在一般情況下，偶氮染料自身本不會危害人體健康，但是部分偶氮染料是用芳香胺類中間體合成的，而芳香胺類中間體具有致癌性，當人體皮膚長時間與其接觸后，通過人體正常的新陳代謝過程而釋放出的物質就會與其結合，結合后會發生還原反應，該反應會導致偶氮基斷裂，從而再次生成具有致癌性的芳香胺類的化合物，假如這些生成的化合物被人體重新吸收，在經過活化作用以后，人體的細胞就會在結構和功能方面發生改變，轉變成為人體病變的誘因。這樣的結果是，導致癌癥的可能性。?

偶氮染料金橙II產品可溶于水，偶氮染料金橙II對環境的污染，已嚴重危害著人類的健康其環境的綜合治理，偶氮染料金橙II在環境中的降解菌的開發未見有比較成熟的技術。?

發明內容

本發明的一個目的是提供了一種金橙II降解菌L-15。?

本發明提供的金橙II降解菌L-15，其菌株是嗜麥芽寡養單胞菌(Stenotrophomonas?maltophilia)，屬于黃單胞菌目的黃單胞菌科，于2014年6月11日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號CGMCC?NO.9289，主要生物學特性為菌落圓形不透明，為專性需氧的非發酵型革蘭氏陰性極生多鞭毛桿菌,在血平板上有強的氨味,無溶血；在營養瓊脂上顯示灰黃色素或無色素,菌落呈針尖狀,直徑0.5～1mm,中央突起；還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,氧化酶陰性,強解脂性,水解明膠和七葉苷,賴氨酸脫羧酶陽性；在氧化發酵試驗中,產酸緩慢或不顯產酸,但分解麥芽糖。?

本發明的另一個目的提供利用上述的金橙II降解菌L-15生產菌劑的方法，其工藝為：斜面種—搖瓶種子液—種子罐—產品（包裝劑型為液體菌劑）。?

該方法的具體步驟是：?

步驟(1).將金橙II降解菌L-15的試管種接種于發酵培養基中，振蕩培養至對數期；

步驟(2).將上述培養好的菌種按10﹪的接種量接種入500L種子罐，培養至對數生長期，種子罐所用的培養基配方及質量含量為：蛋白胨0.5﹪、酵母膏0.25﹪，用蒸餾水配制，pH為7.0；

步驟(3).將種子液按10﹪接種量接入生產罐培養，生產罐所用培養基與種子罐培養基相同；

步驟(4).在種子罐和生產罐的培養過程中無菌空氣的通氣量為1:0.6～1.2，攪拌速度為180～240r/min，培養溫度為30℃，整個工藝流程培養時間為48～60h，發酵結束后菌體數量達到10億個/mL以上，發酵完成后培養液出罐直接用塑料包裝桶或包裝瓶分裝成液體劑，該液體劑即為菌劑。

本發明的具體有益效果：?