[發(fā)明專利]銀線草醇D在制備抑制肝癌細(xì)胞克隆形成的藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410315148.4
• 申請日: 2014-07-03
• 公開（公告）號: CN105267206A
• 公開（公告）日: 2016-01-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 余龍;唐麗莎
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)
• 主分類號: A61K31/365
• 分類號: A61K31/365;A61P35/00;A61P1/16
• 代理公司: 上海元一成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化工領(lǐng)域及醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及銀線草醇D在制備抗肝癌藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

原發(fā)性肝臟惡性腫瘤起源于肝臟的上皮或間葉組織，前者稱為原發(fā)性肝癌，是我國高發(fā)的，危害極大的惡性腫瘤。繼發(fā)性或稱轉(zhuǎn)移性肝癌系指全身多個器官起源的惡性腫瘤侵犯至肝臟。一般多見于胃、膽道、胰腺、結(jié)直腸、卵巢、子宮、肺、乳腺等器官惡性腫瘤的肝轉(zhuǎn)移。

肝臟是人體最大的實質(zhì)性器官，承擔(dān)人體的各類重要代謝功能，因此，肝臟一旦出現(xiàn)惡性腫瘤將導(dǎo)致未及生命的嚴(yán)重后果。又由于肝臟具有豐富的血流供應(yīng)，與人體的重要結(jié)構(gòu)如下腔靜脈、門靜脈、膽道系統(tǒng)等關(guān)系密切；肝臟惡性腫瘤發(fā)病隱匿，侵襲性生長快速，其治療甚為困難。

目前，治療方法包括手術(shù)、肝動脈結(jié)扎、肝動脈化療栓塞、射頻、冷凍、激光、微波以及化療和放射治療等方法。生物治療,中醫(yī)中藥治療肝癌也多有應(yīng)用。目前肝癌的治療以手術(shù)為首，這是因為放療和化療的副作用。許多化療藥物對正常細(xì)胞也有殺傷作用，導(dǎo)致患者自身免疫系統(tǒng)在治療過程中收到較大損傷。副作用較少的藥物鳳毛麟角，因此尋找新的候選化合物是肝癌預(yù)防和治療的重要課題。

銀線草為金粟蘭科植物銀線草(ChloranthusJaponicusSieb)的全草或根及根莖。倍半萜類化合物是金粟蘭科植物中比較重要的一類化合物，在整個金粟蘭科植物中均有分布，具有消炎解痙、抑制微生物等生物活性。銀線草中得到半萜類化合物結(jié)構(gòu)復(fù)雜其骨架可分為桉葉烷型、環(huán)桉烷型、吉馬烷型、菖蒲烷型等數(shù)種類型，同時它們具有內(nèi)酯、酮、醇、多聚體等多種形式。

銀線草全株供藥用，具有祛濕散寒、活血止痛、散瘀解毒之功效。民間驗方有許多有關(guān)銀線草的記載，如銀線草外敷可治療瘡癤、疥癬、無名腫毒、蛇咬傷、乳腺炎等疾病。

Kawabata等1990年首次從銀線草中分離出了1個由2個環(huán)桉型倍半萜內(nèi)酯聚合而成的二聚體化合物，命名為銀線草醇A(shizukaolA)，在1992年從銀線草中分離得到了3個由2個環(huán)桉型倍半萜內(nèi)酯聚合而成的二聚體化合物，命名為銀線草醇B-D(shizukaolB-D)。

申請?zhí)枮?00910095051.6、申請日為20091013、名稱為“烏藥烷型二聚倍半萜類化合物,其制備方法及其在制藥中的應(yīng)用”的中國發(fā)明專利申請中詳細(xì)闡述了銀線草醇D的制備方法，并且表明銀線草醇D能夠明顯增加L6細(xì)胞葡萄糖的消耗量，提示其能夠促進胰島素的作用，促進糖的攝取和轉(zhuǎn)運。

銀線草醇D，英文名為ShizukaolD，CASNo.：142279-42-3。銀線草醇D是天然產(chǎn)物，生物利用度較高、性質(zhì)較穩(wěn)定,具有臨床使用價值。隨著人們對此類化合物的化學(xué)和生物學(xué)研究的深入,其分子作用機制將逐步明確,這將進一步推動此類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾和構(gòu)效關(guān)系研究,并有助于提高此類化合物的藥用價值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供銀線草醇D的新的藥用用途。

本發(fā)明提供了銀線草醇D在制備抗肝癌藥物中的應(yīng)用，尤其是銀線草醇D在制備抑制肝癌細(xì)胞克隆形成的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明中依據(jù)：通常，細(xì)胞克隆形成率即細(xì)胞接種存活率，表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞成活并形成克隆的數(shù)量；貼壁后的細(xì)胞不一定每個都能增殖和形成克隆，而形成克隆的細(xì)胞必為貼壁和有增殖活力的細(xì)胞。克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

本發(fā)明所述的藥物制成針劑或者片劑。

所述的腫瘤來源于smmc-7721、SK-hep1、HepG2、QGY、Hep3B或者FOCUS細(xì)胞。

本發(fā)明中,所述的抑制肝癌細(xì)胞克隆形成的藥物可以是銀線草醇D和其他治療肝癌藥物的組合物。例如,所述的其他治療肝癌藥物是索拉菲尼。

另一方面,將銀線草醇D加入體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中，夠明顯抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和克隆形成。

其中,體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中,加入的銀線草醇D的藥物濃度大于0且小于50μmol/L。

一般而言，加入銀線草醇D的終濃度為1-100μM。例如，1-5μM，1-10μM，5-10μM，1-20μM，5-30μM，1-60μM，5-90μM，10-40μM，1-50μM，5-60μM，15-25μM，5-50μM，15-60μM，25-40μM，5-40μM，等等。較好的,銀線草醇D的藥物濃度小于20μmol/L。

本發(fā)明的一個實施例中采用的肝癌細(xì)胞是SMMC-7721細(xì)胞。

另一個實施例中采用的肝癌細(xì)胞是Focus細(xì)胞。