[發明專利]PRL-1基因在制備診斷和/或治療肝癌產品中的應用

有效

• 申請號: 201410314784.5
• 申請日: 2014-07-02
• 公開（公告）號: CN104087663A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發明（設計）人: 尹東;金少文;王捷
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N33/573;A61K48/00;A61K39/00;A61K45/00;A61P35/00
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

技術領域

本發明屬于生物技術和醫學領域，具體涉及一種PRL-1基因在制備診斷和/或治療肝癌產品中的應用。

背景技術

肝細胞肝癌(hepatocellular?carcinoma，HCC)是世界第五大腫瘤，在癌癥相關死因順位中占第三位。超過75％的肝細胞癌病人在術后5年內復發和/或轉移，成為這部分病人死亡的主要原因。可逆性的蛋白酪氨酸磷酸化對于調節各種信號通路(包括參與腫瘤細胞粘附、侵襲和轉移的信號通路)非常關鍵，它的平衡由蛋白酪氨酸激酶(PTKs)和蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)兩大家族調控。與PTKs大家族相比，PTPs超家族還未得到廣泛研究。PTPs的肝再生磷酸酶(PRLs)亞家族是一類獨特的法尼基化磷酸酶，因其成員PRL-3在結直腸癌轉移灶中高表達而受到廣泛關注。

在PRLs亞家族成員中，PRL-3研究得最為透徹，且其表達升高與多種腫瘤(包括結直腸癌、乳腺癌、胃癌)的進展和轉移相關。PRL-3有望成為潛在的腫瘤預后標志物和治療靶點。與PRL-3對比，PRLs的另外兩個成員，PRL-1(又名PTP4a1)和PRL-2研究得較少。盡管PRL-1磷酸酶最先在再生肝組織中被發現，然而其在腫瘤細胞尤其是肝癌細胞中的功能及其機制仍十分不清楚。

發明內容

本發明的首要目的在于克服現有技術的缺點和不足，提供一種PRL-1基因在制備診斷肝癌產品中的應用。

本發明的另一目的在于提供上述基因在制備治療肝癌產品中的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種PRL-1基因在制備診斷肝癌產品中的應用，所述的診斷肝癌產品包括：通過RT-PCR、實時定量PCR、免疫檢測、原位雜交或基因芯片診斷肝癌的產品；

所述的通過RT-PCR診斷肝癌的產品包括至少一對特異擴增PRL-1基因的引物；

所述的特異擴增PRL-1基因的引物優選為引物PRL-1-CDS-F和引物PRL-1-CDS-R：

引物PRL-1-CDS-F：

5’-GGAAGATCTGCCAACATGTACCCATACGATGTTCCAGATTACGCTATGGCTCGAATGAACCGC-3’；

引物PRL-1-CDS-R：

5’-CGGCTCGAGTTATTGAATGCAACAGTTGTTTCTATGAC-3’；

所述的通過實時定量PCR診斷肝癌的產品包括至少一對特異擴增PRL-1基因的引物；

所述的特異擴增PRL-1基因的引物優選為引物PRL-1-F和引物PRL-1-R：

引物PRL-1-F：5’-ACCAATGCGACCTTAAACAAA-3’；

引物PRL-1-R：5’-AATCTGGTTGGATGGTGGTG-3’；

所述的通過免疫檢測診斷肝癌的產品包括：與PRL-1蛋白特異性結合的抗體，包括多克隆抗體和單克隆抗體；

所述的通過原位雜交診斷肝癌的產品包括：與PRL-1基因的核酸序列雜交的探針；

所述的通過基因芯片診斷肝癌的產品包括：與PRL-1基因的核酸序列雜交的探針；

在本發明中，可以使用一系列本領域已知的方法來制備針對PRL-1蛋白特異的抗體。例如，將提純的人PRL-1基因產物或它的抗原片段注射入動物體內以產生多克隆抗體。同樣，表達人PRL-1蛋白或它的抗原片段的細胞也可以用來對動物致免疫而產生抗體。根據本發明制備的抗體也可以是單克隆抗體，這些單克隆抗體可用雜交瘤技術制備(例如，Kohler?et?al.，Nature256：495，1975；Kohler?et?al.，Eur.J.Immunol.6：511，1976；Kohler?et?al.，Eur.J.Immunol.6：292，1976)。本發明的抗體包括可以阻抑PRL-1功能的抗體，也可以是不影響人PRL-1功能的抗體。每一類抗體都可以通過對人PRL-1基因產物的片段或功能域致免疫而產生，而人PRL-1基因產物及其片段可以用重組方法產生或用多肽合成儀進行合成。與非修飾形式的PRL-1基因產物結合的抗體，可以利用在原核細胞例如E.coli中產生的基因產物來免疫動物而得到。與翻譯后修飾形式如糖基化或磷酸化PRL-1蛋白或多肽結合的抗體，可以利用在真核細胞如酵母或昆蟲細胞中產生的基因產物來免疫動物而得到。