[發(fā)明專利]一種揚子鱷抗菌肽Alligatorin6及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410314114.3
• 申請日: 2014-07-03
• 公開（公告）號: CN104177485B
• 公開（公告）日: 2017-06-06
• 發(fā)明（設計）人: 王義鵬;于海寧;蔡莎莎;高久香
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;C07K1/20;A61K38/17;A61K8/64;A61P31/04;A23K20/195;A23L3/3526
• 代理公司: 北京市科名專利代理事務所(特殊普通合伙)11468
• 代理人: 程美瓊

技術領域

本發(fā)明涉及一種天然的抗菌肽及其應用，更具體的說，涉及一種來源于揚子鱷的抗菌肽Alligatorin6及其應用，屬于生物醫(yī)學技術領域。

背景技術

傳統(tǒng)抗生素在治療細菌性感染疾病方面取得了顯著效果，但是近年來，隨著傳統(tǒng)抗生素在醫(yī)學和養(yǎng)殖業(yè)等領域的濫用，微生物對傳統(tǒng)抗生素產生了越來越強的耐受性，微生物耐藥問題已成為嚴重威脅人類健康的難題。一直以來微生物耐藥性的應對手段是使用對耐藥微生物尚未使用過的新的或者替代性的抗微生物制劑，而這種新的抗生素使用一段時間后，微生物會進一步對這種新的抗生素產生耐藥性，因此這就需要持續(xù)開發(fā)新的抗微生物制劑。開發(fā)出一種新型抗菌機制藥物是解決微生物耐受性問題的一個新方向。

抗菌肽是一種小分子多肽，對細菌、真菌、病毒和原蟲等均具有殺滅作用?？咕木哂蟹肿恿啃?、結構簡單、殺菌活性強等特點。大多數(shù)抗菌肽的殺菌機制是通過作用于細菌細胞膜上的磷脂雙分子層，破壞細胞膜完整性并在細胞膜上形成跨膜通道，造成細胞內容物溶出而導致細胞死亡。這種獨特的殺菌機制一般不易引起微生物耐藥性。而且抗菌肽對哺乳動物正常細胞和組織一般沒有毒害性，不存在殘留問題，因此抗菌肽有望成為一種新型的高效的抗菌藥物，具有廣闊的開發(fā)應用前景。

發(fā)明內容

本發(fā)明目的是為解決傳統(tǒng)抗生素的不足之處，提供了一種來源于揚子鱷的抗菌肽Alligatorin6，另外提供了該抗菌肽的氨基酸序列以及其在抗菌方面的應用。揚子鱷抗菌肽Alligatorin6具有廣譜高效的抗菌作用，對革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌具有極強的抗菌活性，且具有分子量小、合成簡單、溶血活性低、鹽耐受性、熱耐受性和熱穩(wěn)定性好的特點，可應用于醫(yī)藥、化妝品、食品保鮮和養(yǎng)殖業(yè)領域。

為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明提供了如下技術方案：

本發(fā)明中揚子鱷抗菌肽Alligatorin6由26個氨基酸組成，分子量為3044.5Da，等電點為12.48，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示：Thr Arg Trp Leu Trp Leu Leu Arg Gly Gly Leu Lys Ala Ala Gly Trp Gly Ile Arg Ala His Leu Asn Arg Asn Gln，所有氨基酸均為L-型。

本發(fā)明也提供了揚子鱷抗菌肽Alligatorin6的化學制備方法：

根據(jù)獲得揚子鱷抗菌肽Alligatorin6成熟肽的氨基酸序列，用自動多肽合成儀(433A,Applied Biosystems)合其全序列，通過HPLC反相柱層析脫鹽純化；用高效液相色譜HPLC方法鑒定其純度，分子量測定采用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALDI-TOF)，等電聚焦電泳測定等電點，用自動氨基酸測序儀測定氨基酸序列結構；

另外，本發(fā)明提供了揚子鱷抗菌肽Alligatorin6的應用，在制備抗菌藥物或組合物、抑制細菌生長藥物或組合物、防腐劑、動物飼料添加劑和化妝品添加劑中的應用。

本發(fā)明的優(yōu)點是提供了一種來源于揚子鱷的抗菌肽Alligatorin6以及其在抗菌方面的應用。抗菌肽Alligatorin6具有廣譜高效的抗菌作用，且具有分子量小、合成簡單、溶血活性低、鹽耐受性、熱耐受性和熱穩(wěn)定性好的特點，可應用于醫(yī)藥、化妝品、食品保鮮和養(yǎng)殖業(yè)領域。

具體實施方式

實施例1：

揚子鱷抗菌肽Alligatorin6的發(fā)現(xiàn)

通過檢索，從美國國家生物技術信息中心(National Center for Biotechnology Information，http://www.ncbi.nlm.nih.gov)網(wǎng)站的揚子鱷基因組數(shù)據(jù)中發(fā)現(xiàn)一條基因序列(XP_006026474.1)，長度為459bp，編碼的多肽前體由152個氨基酸殘基組成。該基因及其編碼的多肽前體分別如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示：