[發明專利]人參皂苷Rd在制備促進皮膚創傷愈合和損傷組織修復藥物的應用

無效

• 申請號: 201410312581.2
• 申請日: 2014-07-02
• 公開（公告）號: CN104055785A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發明（設計）人: 霍洪亮;李鳳玉;彭雪薇
• 申請（專利權）人: 東北師范大學
• 主分類號: A61K31/704
• 分類號: A61K31/704;A61P17/02;A61P43/00
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技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，具體涉及人參皂苷Rd在制備促進皮膚創傷愈合和損傷組織修復藥物的應用。

背景技術

加快皮膚創傷愈合和損傷組織修復是一個古老的醫學課題，其中，加快皮膚創傷愈合是外科學研究中的熱點。創傷愈合和組織修復是各種修復細胞增殖、分化、遷移、凋亡的過程，也是多種細胞因子相互作用的過程。研制促進皮膚創傷愈合和損傷組織修復的藥物，對提高組織自我修復能力，縮短創傷愈合時間，增強機體活力有重要意義。

在創傷愈合組織修復過程中，(1)免疫細胞炎癥反應是創傷愈合和組織修復的基礎。雖然炎癥反應不直接參與創傷愈合和組織修補，但是，它能通過調節多種細胞因子分泌，增強免疫細胞活性和功能，產生氧自由基和釋放溶酶體，清除壞死組織和異物，防止感染發生，為創傷愈合修復細胞的活動創造條件。(2)成纖維細胞和細胞外基質對創傷愈合和組織修復起主要作用。成纖維細胞是構成肉芽組織的主要細胞成分之一，能合成和分泌膠原、纖維連接蛋白、彈性蛋白、蛋白多糖和透明質酸等多種細胞外基質。細胞外基質對細胞的形態、細胞的生長和分化有重要調節功能。(3)內皮細胞和新血管為創傷愈合和組織修復提供保障。內皮細胞是形成毛細血管的主要細胞，為創傷組織提供足夠的氧和營養物質，保證創傷愈合。內皮細胞還能分泌多種細胞因子，參與創傷組織的修復與調控。(4)角質細胞活化和上皮再生對創傷愈合和組織修復有重要作用。創傷愈合是由上皮組織中角質形成細胞的遷移來完成，使暴露的創傷重新被上皮覆蓋，角質形成細胞能通過分泌細胞因子，直接或間接參與創傷修復與調控。

總之，(1)(3)為創傷愈合和損傷組織修復提供基礎條件，(2)(4)是創傷愈合和損傷組織修復主體成分，增強皮膚成纖維細胞和皮膚角質祖細胞活性是加速皮膚創傷愈合和損傷組織修復的關鍵。篩選能促進皮膚成纖維細胞和皮膚角質祖細胞增殖，加快膠原蛋白分泌的活性成分，對研制促進皮膚創傷愈合和損傷組織修復藥物十分重要。

文獻報道，人參提取物能提高人皮膚成纖維細胞(HDF)活性，并具有明顯的抗氧化作用。人參皂苷Rg1衍生物人參皂苷F1能抵抗紫外線誘導的人皮膚角質細胞凋亡。人參皂苷Rb1能促進皮膚燒傷創面愈合過程中的血管生成。大量實驗證據表明，人參中具有預防皮膚損傷，促進皮膚再生的活性成分。

我們在人參中尋找到一種增強皮膚成纖維細胞活性，促進膠原蛋白產生，減少膠原蛋白降解，加快皮膚角質祖細胞分裂，從而促進皮膚創傷愈合和損傷組織修復的活性成分。

發明內容

本發明的目的是提供一種人參皂苷Rd,在制備促進皮膚創傷愈合和損傷組織修復藥物中應用。

實驗結果顯示，增強皮膚成纖維細胞活性，促進膠原蛋白分泌和加快皮膚角質祖細胞分裂對促進皮膚創傷愈合和損傷組織修復具有十分重要的作用。人參皂苷Rd能顯著促進HDFs細胞增殖、遷移、Ⅰ-型膠原蛋白表達和分泌；促進KPCs活性增強、細胞分裂加快。

首先在實驗室培養HDFs和KPCs，試用三種不同濃度的人參皂苷Rd細胞培養液處理HDFs和KPCs，應用MTT和ELISA等實驗方法，觀察到細胞活性均能顯著增強，增殖加快。應用RT-PCR和Western blot等實驗方法，觀察到Ⅰ-型膠原蛋白表達分泌增加，MMP1表達分泌減少。

有益效果:提高機體自我修復能力，加快皮膚創傷愈合，縮短創傷愈合時間，恢復機體功能。在戰地急救、意外傷害救護和外科手術中有重要意義。人參皂苷Rd能提高HDFs和KPCs活性。增加Ⅰ-型膠原蛋白分泌，抑制MMP1表達。具有提高皮膚創傷愈合和損傷組織修復的能力，能在制備促進皮膚創傷愈合和損傷組織修復的藥物中應用。

附圖說明

圖1為經Rd處理后，MTT檢測KPCs細胞活性。

圖2為經Rd處理后，MTT檢測HDFs細胞活性。

圖3為經Rd處理后，RT-PCR檢測HDFs細胞Ⅰ-型膠原mRNA表達水平。

圖4為經Rd處理后，Western blot檢測HDFs細胞Ⅰ-型膠原蛋白水平。

圖5為經Rd處理后，RT-PCR檢測HDFs細胞MMP1mRNA表達水平。

圖6為經Rd處理后，Western blot檢測HDFs細胞MMP1蛋白水平。

具體實施方式

1.KPCs和HDFs細胞培養