[發明專利]小木漆高效快速擴繁方法

有效

• 申請號: 201410311305.4
• 申請日: 2014-07-02
• 公開（公告）號: CN104012417A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發明（設計）人: 何承忠;趙月明;李旦;劉玉鯤;段安安;許玉蘭;祝建兵;廖聲熙
• 申請（專利權）人: 西南林業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 昆明祥和知識產權代理有限公司 53114
• 代理人: 唐德林

1.一種小木漆高效快速擴繁方法，其特征在于按下列步驟實施：

（1）外植體的選擇與消毒：選取優良小木漆單株的當年生嫩莖或根萌幼苗，去除葉柄和葉片，用毛刷輕刷莖段表面，除去表面雜質，用2%的洗潔精水溶液浸泡10-15分鐘，在線狀自來水下沖洗1-2小時，剪成3-4cm長含1-2個葉腋的莖段，放于滅過菌的外植體缸內，移至超凈工作臺內進行消毒，75%乙醇浸泡20-30秒，1%的苯扎氯胺溶液浸泡1-2分鐘，無菌蒸餾水沖洗2-3次后，用0.1%升汞浸泡10-20分鐘，無菌蒸餾水沖洗5-8次，放于滅過菌的墊有濾紙的接種盤內，使濾紙能夠吸干外植體表面的殘留水分；

（2）啟動培養：將莖段兩端分別切去2-4mm，平放在啟動培養基上，葉腋朝上，啟動培養基的配方為：White?+?6-BA?0.5-2mg/L?+?NAA?0.02-0.5mg/L，20-30g/L蔗糖，4.0-5.0g/L瓊脂，pH為5.8-6.0；置于晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下暗培養15-20天后，葉腋處長出1-2cm高腋芽，再置于光照強度1000-2000Lux，光照時間12小時/天，晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下光照培養10-15天；

（3）增殖培養：待腋芽長到3-4cm高時，將其從老莖上剪下，去掉底部1-2個葉片，直立于幼苗增殖培養基上，對于較高腋芽，從基部切取含1-2個腋芽的莖段，并平放于增殖培養基上，增殖培養基的配方為：MS?+?ZT0.1-1.0mg/L?+?6-BA0.5-3.0mg/L?+?TDZ0.1mg/L，20-30g/L蔗糖，4.0-5.0g/L瓊脂，pH為5.8-6.0；置于晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下暗培養15-20天后，腋芽基部形成約1cm^3?的愈傷組織，莖段葉腋處長出1-2cm高腋芽，形態學下端也形成約1cm³的愈傷組織，再置于光照強度1000-2000Lux，光照時間12小時/天，晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下光照培養10-15天；基部愈傷組織誘導可出4-8個1-2cm高的不定芽，同時腋芽長到3-4cm；待15天后，待不定芽小苗長到3-4cm高，再將小苗切下，轉到相同的增殖培養基上，經過45天的培養，誘導出的小苗又可長到3-4cm，反復將高3-4cm的小苗切下進行增殖培養，可以使小木漆進行快速大量的擴繁，其增值倍數為4-5倍；

（4）生根培養：將3-4cm高的組培苗轉接到生根培養基上，生根培養基配方為：1/2MS?+?IAA0.05-0.2mg/L?+?IBA0.05-0.2mg/L，0.1-0.5g/L活性炭，20-30g/L蔗糖，4.0-5.0g/L瓊脂，pH為5.8-6.0；置于光照強度1000-2000Lux，光照時間12小時/天，晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下光照培養10-15天后，得到小木漆生根苗；

（5）煉苗與移栽：待生根苗的根長達1.5-2cm后，在室溫為25℃的室內打開瓶蓋，煉苗2-4天后，取出生根苗，洗凈沾附在根部的培養基，之后移栽到基質配比為腐殖土：河沙=1：1的沙盤中，移栽后注意控制溫室內的溫度在25-30℃之間，濕度在75-80%之間，10-15天后成活，移至杯口直徑為10cm的營養袋中，移栽基質配比同沙盤；再通過養護2-3個月，苗高達20-30cm時，移至室外空地造林，以待割取生漆。