[發明專利]一種用于體外檢測Neurofibromastosis2疾病致病基因NF2的c.602delTG突變的試劑盒

有效

• 申請號: 201410306409.6
• 申請日: 2014-06-26
• 公開（公告）號: CN104878080B
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 張俊廷;郝淑煜;馮潔;李達;吳震;王亮;張力偉
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學附屬北京天壇醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種用于體外檢測Neurofibromastosis 2疾病致病基因NF2的c.602delTG突變的試劑盒。該試劑盒包括如下引物對：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。本發明首次發現了NF2疾病致病基因NF2的c.602delTG突變，并且證明該突變位點與NF2疾病相關。進一步設計了檢測該突變位點的引物，并將其用于診斷NF2疾病。通過產前篩查及新生兒NF2基因突變篩查，可以降低NF2疾病患兒的出生率，指導攜帶致病基因的患者生活行為，預防疾病發生，大大緩解社會壓力。體外檢測NF2疾病相關基因NF2的c.602delTG突變的試劑盒對于這些學科研究與發展都是不可或缺的。

技術領域

本發明涉及一種檢測NF2基因c.602delTG突變的試劑盒，該試劑盒可用于該疾病的輔助診斷和新藥開發，屬于生物技術領域。

背景技術

神經纖維瘤病2型疾病(neurofibromatosis type2，NF2)是一種常染色體遺傳疾病，其主要特征為雙側聽神經瘤(圖1)，常伴發顱內和髓內神經鞘瘤、腦膜瘤和室管膜瘤等多種腫瘤。多數腫瘤為良性，但是由于這些腫瘤位于顱內或椎管內造成神經或腦組織的壓迫，引起一系列嚴重癥狀，主要包括聽力喪失，視力下降，四肢肌力減退，面部感覺減退，眼臉閉合不全，咽反射消失，皮下結節等，NF2的發病率高，約1/25 000，且自發突變率高，外顯率100％。由于NF2表型多樣，NIH確定了NF2的診斷標準：①CT或MRI顯示雙側聽神經瘤；②直系一級親屬患NF2以及單側聽神經瘤或至少有以下病變中的2個：神經纖維瘤、腦膜瘤、膠質瘤、神經鞘瘤和青少年晶狀體后包膜下混濁。

NF2基因定位于22號染色體長臂1區二帶(22q12)，長約110 000 bp，編碼區cDNA長為1785bp，含17個外顯子，通過選擇剪接產生兩個主要蛋白亞型schwannomin或Merlin。這個蛋白屬于Ezrin，Radixin，Moesin(ERM)家族，主要在細胞骨架和細胞膜之間起連接作用。但是，NF2也是一個腫瘤抑制基因，NF2功能失活不但與家族性神經系統腫瘤有關而且與散發的神經系統腫瘤有關。NF2基因編碼蛋白Merlin可以抑制細胞增殖，同時其可以與核內泛素連接酶E3 相互作用，抑制調控細胞周期基因表達和激活細胞凋亡基因表達。更重要是，Merlin通過多種生物信號通路參與了腫瘤抑制作用。目前，發現Merlin通過酪氨酸受體激酶通路，抑制細胞增殖，而NF2患者Merlin蛋白失活，使得酪氨酸受體激酶(RTKs)通路激活，促進細胞異常增殖。在RTKs-ERK/MAPK通路中Rac、Pakl蛋白起到重要的作用。Paks(p212activated kinases)是具致癌性的Rac/CDC42依賴的Ser/Thr激酶，整聯蛋白信號肽(細胞黏附相關分子)通過Paks將Merl in磷酸化使其失活，促使正常細胞進行有絲分裂；Merlin對Racl起負性調節，抑制其下游效應物Paks，從而抑制了細胞生長，或Merlin直接抑制Paks活性阻斷Rac介導的信號通路。此外，發現表皮生長因子受體家族(ErbB家族)，包括血管生長因子受體(EGFR)和血小板來源的生長因子受體(PDGFRb)，通絡酪氨酸受體激酶(RTKs)通路參與了NF2腫瘤的形成，在Merlin基因缺失細胞中發現抑制EGFR信號通路的藥物可以抑制細胞的生長。在神經鞘瘤的組織標本中發現許多ErbB家族蛋白的表達?？笶rbB家族蛋白抗體可以抑制神經鞘瘤細胞的增殖。在臨床前期雙側聽神經瘤模型實驗中發現表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑埃羅替尼可以有效的抑制腫瘤細胞的增殖。最近，研究報道血管生長因子單克隆抗體阿瓦斯汀改善NF2患者的聽力功能。

目前在基因水平對NF2型疾病進行篩查的方法或試劑盒還未曾報道。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種用于輔助診斷神經纖維瘤病2型疾病的試劑盒。

本發明所提供的用于輔助診斷NF2型疾病的試劑盒，包括如下引物對：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。