[發明專利]一種基于微管液路板的精子優選玻片及優選方法

有效

• 申請號: 201410305044.5
• 申請日: 2014-06-30
• 公開（公告）號: CN104099236A
• 公開（公告）日: 2014-10-15
• 發明（設計）人: 曾橋;薛志剛
• 申請（專利權）人: 浙江星博生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12N5/076
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

技術領域

本發明涉及精子優選，具體涉及一種基于微管液路板的精子優選玻片及優選方法。?

背景技術

精子活力是受孕的關鍵因素之一，精子活率高的精液，其活動力強的精子數量相對較高，因此受孕的機率也高。目前廣泛采用的精子優選技術有上游技術、密度梯度離心技術等優選技術。上游技術是利用精子自身活力向上泳動的原理而設計，精子在上游過程中，可以脫離精漿中某些內源性的抑精物質，如抗精子抗體，各類細胞等，并使精子在體外活動時間得以延長，但上游技術對高質量精子回收率相對較低。密度梯度離心技術處理后高質量精子回收率提高，但易造成精子DNA過氧化損傷，精子質量下降。中國專利公告號為CN102352305的發明專利，則公開了利用微流控芯技術，檢測和篩選精子，其原理是利用宮頸粘液在樣品池中吸附活力稍差的精子及白細胞、上皮細胞等，再利用緩沖液加樣池中加入緩沖液，通過緩沖液液流將樣品池中的活力高精子帶到樣品收集池中，達到高活力精子的篩選和收集，但該發明專利技術較復雜，既要宮頸粘液吸附，又要緩沖液被動將精子流沖到樣品收集池，精子不是主動流動，精子質量好壞不易控制。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種篩選簡單，篩選效果好，回收率較高，精子質量易控制的基于微管液路板的精子優選玻片。本發明也提供了利用該精子優選玻片優選精子的方法。?

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：?

一種基于微管液路板的精子優選玻片，包括樣品池和精子收集池，在所述樣品池與所述精子收集池之間設置有1層微管通道，所述精子優選玻片上還設置有1～3個廢棄池，在所述廢棄池與所述精子收集池之間設置有1層微管通道，所述微管通道的內徑為10～200微米，所述微管通道距所述樣品池、所述精子收集池和所述廢棄池的池底50～100微米。微管通道可以是直管，也可以是曲管。

一種利用基于微管液路板的精子優選玻片優選精子的方法，其步驟如下：?

a、先在精子收集池加入透明質酸（可以市售，也可以自配），所述透明質酸表面距所述精子收集池的池底50～100微米，再將精液移入樣品池中，同時在樣品池中加滿精子培養液，所述精子培養液中含有濃度為0.1mol/L的氯化鈉、濃度為0.4mmol/L的磷酸二氫鉀、濃度為2.7mmol/L?的葡萄糖、濃度為4.7mmol/L的氯化鉀、濃度為0.2mmol/L?的七水硫酸鎂、濃度為2mmol/L?的二水氯化鈣、濃度為0.02mol/L的?N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸二鈉鹽（Hepes-Na）、濃度為4mmol/L?的碳酸氫鈉、濃度為0.3mmol/L丙酮酸鈉、體積百分濃度為0.34%的乳酸鈉（C₃H₅O₃Na）、質量百分濃度為0.002%的酚紅（Phenol?Red）；

b、將精子優選玻片置于37℃下，恒溫15～45分鐘，在所述精子收集池中得到優選的精子。

與現有技術相比，本發明的優點在于一種基于微管液路板的精子優選玻片，包括樣品池和精子收集池，在樣品池與精子收集池之間設置有1層微管通道，精子優選玻片上還設置有1～3個廢棄池，在廢棄池與精子收集池之間設置有1層微管通道，微管通道的內徑為10～200微米，微管通道距樣品池、精子收集池和廢棄池的池底50～100微米。利用精子培養液對精子的主動吸引和在微管液路板流動，精子隨精子培養液主動流動到精子收集池中，利用精子收集池的透明質酸對高活力精子的黏附作用，粘住活力高的精子，質量差的精子則繼續隨精子培養液流動到達廢棄池中，精子收集池中基本都是高活力的精子。本發明的方法篩選簡單，精子回收率較高，同時避免精子質量下降，篩選效果好，因此本發明是一種篩選簡單，篩選效果好，回收率較高，精子質量易控制的基于微管液路板的精子優選玻片。?

附圖說明

圖1為實施例1結構示意圖；?

圖2為實施例2結構示意圖。

具體實施方式

以下結合附圖實施例對本發明作進一步詳細描述。?

實施例1?

如圖1所示的一種基于微管液路板的精子優選玻片，包括樣品池1和精子收集池2，在樣品池1與精子收集池2之間設置有1層直管型微管通道3，精子優選玻片上還設置有2個廢棄池4，在廢棄池4與精子收集池2之間設置有1層直管型微管通道3，微管通道3的內徑為10～200微米（如人的精子可以設為35微米），微管通道3距樣品池1、精子收集池2和廢棄池4的池底50～100微米。

實施例2?