[發明專利]一種基于微孔薄膜的精子優選方法

有效

• 申請號: 201410304746.1
• 申請日: 2014-06-30
• 公開（公告）號: CN104099293A
• 公開（公告）日: 2014-10-15
• 發明（設計）人: 曾橋;薛志剛
• 申請（專利權）人: 浙江星博生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/076
• 分類號: C12N5/076
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

技術領域

本發明涉及精子優選方法，具體涉及一種基于微孔薄膜的精子優選方法。?

背景技術

精子活力是受孕的關鍵因素之一，精子活率高的精液，其活動力強的精子數量相對較高，因此受孕的機率也高。目前廣泛采用的精子優選技術有上游技術、密度梯度離心技術等優選技術。上游技術是利用精子自身活力向上泳動的原理而設計，精子在上游過程中，可以脫離精漿中某些內源性的抑精物質，如抗精子抗體，各類細胞等，并使精子在體外活動時間得以延長，但上游技術對高質量精子回收率相對較低。密度梯度離心技術處理后高質量精子回收率提高，但易造成精子DNA過氧化損傷，精子質量下降。中國專利公告號為CN102352305的發明專利，則公開了利用微流控芯技術，檢測和篩選精子，其原理是利用宮頸粘液在樣品池中吸附活力稍差的精子及白細胞、上皮細胞等，再利用緩沖液加樣池中加入緩沖液，通過緩沖液液流將樣品池中的活力高精子帶到樣品收集池中，達到高活力精子的篩選和收集，但該發明專利技術較復雜，既要宮頸粘液吸附，又要緩沖液被動將精子流沖到樣品收集池，精子不是主動流動，精子質量好壞不易控制。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種篩選簡單，篩選效果好，回收率較高，精子質量易控制的基于微孔薄膜的精子優選方法。?

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種基于微孔薄膜的精子優選方法，其步驟如下：?

a、將精液移入試管中，在精液的表面覆蓋上布滿微孔的微孔薄膜，所述微孔薄膜厚為50～200微米，所述微孔的孔徑為10～200微米；

b、在微孔薄膜上面加入精子培養液，所述精子培養液中含有濃度為0.1mol/L的氯化鈉、濃度為0.4mmol/L的磷酸二氫鉀、濃度為2.7mmol/L?的葡萄糖、濃度為4.7mmol/L的氯化鉀、濃度為0.2mmol/L?的七水硫酸鎂、濃度為2mmol/L?的二水氯化鈣、濃度為0.02mol/L的?N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸二鈉鹽（Hepes-Na）、濃度為4mmol/L?的碳酸氫鈉、濃度為0.3mmol/L丙酮酸鈉、體積百分濃度為0.34%的乳酸鈉（C₃H₅O₃Na）、質量百分濃度為0.002%的酚紅（Phenol?Red）；該精子培養液具有主動吸引精子移動的作用，通過微孔薄膜的阻隔，使高活力的精子優先從微孔中進入精子培養液中；

?c、將試管置于37℃下，恒溫15～45分鐘，回收微孔薄膜上方的精子培養液，得到優選的精子。

與現有技術相比，本發明的優點在于一種基于微孔薄膜的精子優選方法，利用精子培養液對精子的主動吸引，微孔薄膜的阻隔，微孔競爭性的通過，使高質量、高活力的精子優先到達精子培養液，在重力和活力競爭下，精子培養液中基本都是高活力的精子。本發明的方法篩選簡單，精子回收率較高，同時避免精子質量下降，篩選效果好，因此本發明是一種篩選簡單，篩選效果好，回收率較高，精子質量易控制的基于微孔薄膜的精子優選方法。?

附圖說明

圖1為本發明精子優選方法的示意圖。?

具體實施方式

以下結合附圖實施例對本發明作進一步詳細描述。?

實施例1?